輸血前不規(guī)則抗體篩查的臨床意義

摘 要 目的：探討篩查不規(guī)則抗體對臨床輸血的意義，以保證輸血治療安全有效。方法：對2009年7月-2010年7月來本院擬輸血的患者標本，進行輸血前不規(guī)則抗體檢測，并對抗體篩檢陽性者進一步行抗體鑒定，并對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析。結(jié)果：在3 145例被檢血清標本中，用微柱凝膠法檢出血型不規(guī)則抗體陽性者10例，陽性率為0.32%，其中，抗C 4例，抗D 3例，抗E 2例，抗Ec 1例，均屬于Rh血型系統(tǒng)。結(jié)論：在輸血前對受血者血液進行血型不規(guī)則抗體篩選、特異性鑒定， 輸注不含相應(yīng)抗原的血液， 對確保輸血安全及效果均有重要的臨床意義。

關(guān)鍵詞 不規(guī)則抗體 抗體篩查 輸血反應(yīng) 輸血安全

中圖分類號：R457.1；R446.62 文獻標識碼：B 文章編號：1006-1533(2012)07-0024-02

在血型抗體中，除抗A、抗B或抗AB以外，由血液免疫產(chǎn)生的血型抗體，在血型血清學(xué)檢驗中被稱為不規(guī)則抗體，由于有臨床意義的不規(guī)則抗體會導(dǎo)致溶血性輸血反應(yīng)，破壞輸入血液中不匹配的紅細胞或縮短其壽命，產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)，輕則影響治療結(jié)果，重則危及患者生命；此外，對孕婦而言，不規(guī)則抗體會引起新生兒溶血病，影響新生兒臟器發(fā)育，并損害其智力發(fā)育，嚴重者則會危及新生兒的生命安全。

為了解A、B、O血型以外血型不規(guī)則抗體產(chǎn)生的頻率及其類型分布，上海市中醫(yī)藥大學(xué)附屬曙光醫(yī)院在鑒定受血者A、B、O及RhD血型的基礎(chǔ)上，應(yīng)用微柱凝膠法，對擬輸血的受血者血液標本進行血型不規(guī)則抗體篩選，對結(jié)果陽性者再進行抗體特異性鑒定，為受血者選擇不含相應(yīng)抗原以及交叉配血試驗相合的血液進行輸注，以保證臨床輸血治療的安全有效。

1 標本來源和檢測方法

1.1 標本來源

自2009年7月-2010年7月，至我院進行治療性輸血和手術(shù)備血的血液病、腫瘤、消化道出血及其他疾病患者3 145例，年齡12~90歲，其中男性1 833例，女性1 312例。

1.2 方法

1.2.1 試劑

微柱凝膠抗人球蛋白卡[強生(上海)醫(yī)療器材有限公司]。標準試劑紅細胞，抗體鑒定譜細胞1～11號，IgG抗D、抗C、抗Ec、抗E試劑血清和抗人球蛋白試劑均由上海市血液中心提供 。

1.2.2 儀器

微柱凝膠卡37 ℃專用孵育器、卡式離心機由強生(上海)醫(yī)療器材有限公司提供，血庫專用離心機由臺灣貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.2.3 微柱凝膠卡檢測方法

抽取被檢者血液標本3 ml，置37 ℃水浴10 min，離心分離血清與紅細胞，在微柱凝膠卡上標記被檢者姓名及血型不規(guī)則抗體篩查細胞的編號，分別吸取血型不規(guī)則抗體篩查細胞懸液10 μl，被檢者血清40 μl和緩沖液50 μl加入微柱凝膠卡中， 置37 ℃專用器孵育10 min，使用BioVue卡式離心機離心5 min，肉眼觀察結(jié)果。紅細胞均勻沉于管底者為陰性，懸浮于凝膠表面或凝膠中段者為陽性。對陽性標本再用試管法做間接抗人球蛋白試驗，進行對照比較，對確證試驗仍為抗體篩選陽性的血液標本再用譜細胞進行抗體特異性鑒定。

1.2.4 間接抗人球蛋白試驗

在試管內(nèi)加入被檢者血清2滴和2% ～5%試劑紅細胞懸液1滴，混勻，在37 ℃孵育1 h后，用生理鹽水洗滌3次，倒盡末次洗滌的鹽水，吸干試管邊緣的水分，于試管內(nèi)加入抗人球蛋白試劑2滴，3 000 r/min離心15 s，觀察結(jié)果， 有凝集者為陽性，無凝集者為陰性;在陰性結(jié)果的試管內(nèi)加入質(zhì)控細胞1滴，3 000 r/min離心15 s，出現(xiàn)凝集者說明試驗結(jié)果可靠。

1.2.5 質(zhì)控對照細胞的制備

1） 陽性質(zhì)控細胞的制備人抗D血清2滴加O型RhD陽性壓積紅細胞2滴，混勻置37 ℃致敏30 min，用生理鹽水洗滌3次備用。2） 陰性質(zhì)控細胞的制備 人抗D血清2 滴，加O型RhD 陰性壓積紅細胞2滴或AB血清2滴加O型RhD陽性壓積紅細胞2滴，混勻置37 ℃30 min，用生理鹽水洗滌3次，倒盡末次洗滌的鹽水，吸干試管邊緣的水分，于試管內(nèi)加入抗人球蛋白試劑2滴，3 000 r/min離心15 s，觀察其結(jié)果。

1.2.6 血型不規(guī)則抗體特異性的確認

對血型不規(guī)則抗體篩選試驗陽性的血液標本，在排除冷凝集素和其他假凝集干擾以后，進行血型不規(guī)則抗體特異性鑒定，對照該抗體與譜細胞反應(yīng)格局確認血型不規(guī)則抗體的特異性，并同時檢測被檢者紅細胞上的相應(yīng)抗原是否為陰性。

2 結(jié)果

3 145例被檢者中檢出血型不規(guī)則抗體10例，陽性率為0.32% （10/3 145），與不規(guī)則抗體在正常人群中檢出率為0.3%～2.0%的報道相符[1]。其中男性患者陽性4例，均有輸血史；女性患者陽性6例，4例有輸血史，2例有妊娠史。紅細胞不規(guī)則抗體陽性的抗體鑒定，結(jié)果分別是抗C 4例，占40%（4/10），抗D 3例，占30%（3/10），抗E 2例，占20%（2/10），抗Ec 1例，占10%（1/10）均屬于Rh血型系統(tǒng)。此10例患者分別采用特殊配血、輸注不含相應(yīng)抗原的血液或輸注洗滌紅細胞等方法進行輸血治療，結(jié)果安全有效。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，本院檢出的不規(guī)則抗體以Rh血型系統(tǒng)占多數(shù)，主要是經(jīng)多次反復(fù)大量輸血或妊娠免疫等刺激產(chǎn)生。Rh血型系統(tǒng)是最復(fù)雜的遺傳多態(tài)性血型系統(tǒng)之一，被視為是臨床上產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)的主要原因。所有的Rh抗體都有潛在的臨床意義，RhE、RhC抗原的免疫原性雖不如RhD抗原強，但任何輸血量都可刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，因此抗E、抗C是引起交叉配血不合、新生兒溶血病和溶血性輸血反應(yīng)的重要原因之一[2]，且多在A、B、O血型正反定型不符、交叉配血困難、新生兒溶血病和自身免疫性溶血性貧血等進行血型血清學(xué)檢查時才被發(fā)現(xiàn)[3]。不規(guī)則抗體多為免疫球蛋白G( IgG)類抗體，IgG抗體屬單倍體，分子長度約24 nm，在鹽水介質(zhì)中不能凝集，只能致敏相應(yīng)的紅細胞，必須通過特定的方法（如牛血清蛋白、酶、抗球蛋白和凝聚胺等）才能使致敏紅細胞發(fā)生凝集。此次不規(guī)則抗體篩查陽性的10例患者，后分別采用特殊配血、輸注不含相應(yīng)抗原的血液或輸注洗滌紅細胞等方法進行輸血治療，保證了輸血治療的安全有效。

由A、B、O血型不相容引起的急性溶血性輸血反應(yīng)并不常見，主要由人為差錯引起，而A、B、O血型系統(tǒng)以外的不規(guī)則抗體是引起溶血性輸血反應(yīng)的主要原因。若受血者抗體陽性，而又輸注了有相應(yīng)抗原的紅細胞，可引起溶血反應(yīng)，造成溶血或輸注無效。故進行不規(guī)則抗體篩檢(尤其對有輸血史及妊娠史的患者)，檢出有臨床意義的抗體，選擇不含相應(yīng)抗原的血液輸注，可有效減少或避免溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生，對保證輸血安全具有重要意義。

目前，美國、日本和澳大利亞等國家均已將不規(guī)則抗體篩查列入常規(guī)檢測。在我國，尚未將不規(guī)則抗體檢測作為輸血前的常規(guī)檢測項目，本研究在輸血前常規(guī)檢測不規(guī)則抗體，保證了輸血安全，提高了輸血治療效果，值得臨床推廣。

參考文獻

[1] 向東， 張雄民， 王鍵萍， 等. 22 例患者血型不規(guī)則抗體分析[J]. 臨床輸血與檢驗， 2003， 5(2): 103-105.

[2] 樸春花， 嚴花實， 許青松， 等. Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體5例[J]. 中國輸血雜志， 2010， 23(7): 557.

[3] 楊世明， 張紅麗， 張勇萍， 等. 自身免疫性溶血性貧血患者的血清學(xué)特性檢測分析[J]. 細胞與分子免疫學(xué)雜志， 2008， 24(8): 834-835.

（收稿日期：2011-12-12）