基于GC-MS對比分析印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)揮發(fā)油中的化學(xué)成分

Nuriza Rahmadini，甘彥雄，鄭勇鳳，汪蕾，余佳麗，廖婉，傅超美

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基于GC-MS對比分析印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)揮發(fā)油中的化學(xué)成分

Nuriza Rahmadini，甘彥雄，鄭勇鳳，汪蕾，余佳麗，廖婉，傅超美

［摘要］目的：研究比較印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)揮發(fā)油組成成分及相對含量。方法：采用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，以氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）分析三者的化學(xué)成分，檢索NIST譜庫，選擇可信度大于80%的成分。結(jié)果：三個樣品共推測出16個化合物，其中印尼姜黃6種、姜黃9種、蓬莪術(shù)5種；印尼姜黃和姜黃共有α姜黃烯，印尼姜黃與蓬莪術(shù)共有樟腦，姜黃和蓬莪術(shù)共有芳姜黃酮、吉馬酮，其他成分差異較大。結(jié)論：印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)揮發(fā)油所含成分既有一定相似性，也有一定差異性。

［關(guān)鍵詞］印尼姜黃；姜黃；蓬莪術(shù)；GC-MS；揮發(fā)油；成分差異

［作者單位］成 都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥資源系統(tǒng)研究與開發(fā)利用省部共建國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川成都，611137

Email:rheeza_dhinie@yahoo.com

Email:liaowan2011@126.com；傅超美，博士，教授，從事新制劑、新劑型和中藥炮制工藝與機(jī)理研究工作Email:chaomeifu@126.com

印尼姜黃為姜科植物Curcuma xanthorrhiza Roxb.的根莖，亦有文獻(xiàn)稱其為印尼莪術(shù)［1］或束骨姜黃［2］，是咖喱的主要原料［3］，主產(chǎn)于印度尼西亞等東南亞國家，印度亦盛產(chǎn)［4］，當(dāng)?shù)赜袑⑵渥鳛樗幬锸褂玫膫鹘y(tǒng)。姜黃為姜科植物Curcuma longa L. 的根莖，蓬莪術(shù)為姜科植物Curcuma phaeocaulis Valeton的根莖，均收載于《中國藥典》2015年版一部，是臨床常用中藥，是著名的川產(chǎn)道地藥材［5］。三者來源于同一科屬，外觀性狀具有較大的相似性，且均含有較多的揮發(fā)油，具有保肝、抗炎、抗氧化、抗腫瘤等作用［6-8］。然而其藥效有一定差異，推測是由于其化學(xué)成分各有異同所致，因此有必要對三者的揮發(fā)油成分分析比較。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）分離效果好、檢測靈敏度高，結(jié)合工作站中數(shù)據(jù)庫可推測樣品中各成分，特別適宜于揮發(fā)油的定性分析［9］?？蓪C-MS應(yīng)用于印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)揮發(fā)油的定性分析，以期找出三者的特征性成分及共有成分，利于闡釋藥效異同的物質(zhì)基礎(chǔ)。

1　試驗(yàn)儀器與材料

1.1 儀器

Agilent GC-MS G7890A-5975C（美國安捷倫公司）；粉碎機(jī)（DJ靈巧型，上海淀久中藥機(jī)械制造有限公司）；微型渦旋混合儀（上海滬西分析儀器廠有限公司）；高速臺式離心機(jī)（上海市安亭科學(xué)儀器廠）。

1.2 試劑

正己烷（色譜純），購于天津市津南區(qū)咸水沽工業(yè)園區(qū)，批號：20140303；無水硫酸鈉（分析純AR），購于成都市科龍化工試劑廠，批號：20130502；實(shí)驗(yàn)用水為雙蒸水。

印尼姜黃購于印度尼西亞蘇加武眉（sukabumi，Indonesia），姜黃、蓬莪術(shù)購于成都荷花池中藥材專業(yè)市場，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室鑒定，分別為印尼姜黃Curcuma xanthorrhiza Roxb.、姜黃Curcuma longa L.、蓬莪術(shù)Curcuma phaeocaulis Valeton的干燥根莖。

2　方法與結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)方法

2.1.1 揮發(fā)油的提取 取適量印尼姜黃粉、姜黃、蓬莪術(shù)適量，照2015年版《中國藥典》“揮發(fā)油提取”甲法進(jìn)行水蒸氣蒸餾，提取完全后加入適量無水Na2SO4，靜置1 h，即得具有特殊氣味的黃色透明揮發(fā)油。

2.1.2 氣相條件 采用Agilent 19091S-433 柱（30 m×250 μm×0.25 μm），進(jìn)樣口溫度250 ℃，分流比5:1，汽化室溫度250 ℃，柱溫采取程序升溫（初始溫度60 ℃，以 20 ℃.min-1速率升溫至130 ℃，以2 ℃.min-1速率升溫至180 ℃，以20 ℃.min-1速率升溫至220 ℃），載氣為氦氣，流速1.0 mL.min-1，進(jìn)樣量1 μL。

2.1.3 質(zhì)譜條件 采用電子電離源（EI）正離子模式，離子源溫度 200℃，采用全掃描模式。

2.1.4 供試品制備 取水蒸氣蒸餾法制得的揮發(fā)油少量，用正己烷稀釋，經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過，即得。

2.2 試驗(yàn)結(jié)果

以上述方法對印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)的揮發(fā)油進(jìn)行分析，分別獲得三者總離子流圖，見圖1～圖3，經(jīng)Agilent增強(qiáng)型ChemStation工作站數(shù)據(jù)處理，檢索NIST08譜庫并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)［10-13］推測出三者揮發(fā)油中成分，采用面積歸一化法分別得到其百分含量，見表1。

圖1 印尼姜黃總離子流色譜圖

圖2 姜黃總離子流色譜圖

圖3 蓬莪術(shù)總離子流色譜圖

表1 印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)各成分百分含量

3　5.179　α松油醇α-Terpineol　98-55-5　1.24 4　8.496　β欖香烯β-Cyclohexane　515-13-9　1.75 5 10.681　α姜黃烯α-Curcumene　644-30-4　37.3　3.75 6 11.147莪術(shù)烯Curzerene　17910-09-7　4.72 7　11.42　β甜沒藥烯β-Bisabolene　95-61-4　0.53 8　11.5　β姜黃烯β-curcumene　1000374-17-4 32.8 9 13.039　g欖香烯g-Elemene　29873-99-2　3.47 10 15.104 α細(xì)辛腦Asarone　2883-98-9　0.93 11 16.789　芳姜黃酮Artumerone　1000292-71-0　41.34　3.68 12 16.929姜黃酮Tumerone 180315-67-7　11.52 13 17.961　　吉馬酮Cyclodecadien　6902-91-6　4.46　14.63 14 18.187姜黃新酮Curlone　87440-60-6　12.39 15 18.807　　姜黃二酮Curdione　13657-68-6　1.93 16 20.232　印尼姜黃醇Xanthorrhizol　030199-26-9　6.84

由上表可知，從三種莪術(shù)中定性推測出16種化合物，其中印尼姜黃6種、姜黃9種、蓬莪術(shù)5種；印尼姜黃和姜黃共有α姜黃烯，但前者含量是后者的10倍（37.3%，3.75%）；印尼姜黃與蓬莪術(shù)共有樟腦，且含量近似（3.69%，3.84%）；姜黃和蓬莪術(shù)共有芳姜黃酮、吉馬酮，但含量差異較大（41.34%，3.68%）（4.46%，14.63%）。印尼姜黃6種成分占揮發(fā)油總百分比88.82%；其中α姜黃烯占37.3%、β姜黃烯占32.8%，兩者即占揮發(fā)油總量的70.1%，是印尼姜黃的主要成分；印尼姜黃醇占6.84%，是其特征性成分。姜黃中9種成分占揮發(fā)油總百分比為77.4%；其中芳姜黃酮占41.34%，是其主要成分；另外姜黃酮、姜黃新酮含量分別為11.52%、12.39%，也是其特征性成分。蓬莪術(shù)中5種成分占揮發(fā)油總百分比為25.14%；吉馬酮占14.63%，是其主要成分；β欖香烯占1.75%，是其特征性成分。

3　結(jié)論與討論

通過本研究，明確了印尼姜黃、姜黃、蓬莪術(shù)揮發(fā)油所含成分既有一定相似性，也有一定差異性，這是其藥效差異的物質(zhì)基礎(chǔ)。印尼姜黃和姜黃共有α姜黃烯，印尼姜黃與蓬莪術(shù)共有樟腦，姜黃和蓬莪術(shù)共有芳姜黃酮、吉馬酮；印尼姜黃主要含有α姜黃烯和β姜黃烯，特征性成分是印尼姜黃醇；姜黃主要含有芳姜黃酮，特征性成分是姜黃酮、姜黃新酮；蓬莪術(shù)主要含有吉馬酮，特征性成分是β欖香烯。這為后續(xù)成分分離鑒定及藥理研究奠定了理論基礎(chǔ)。

研究中所得成分為GC-MS分析得到的離子碎片及其質(zhì)荷比等信息通過NIST08數(shù)據(jù)庫比對推測得到的，且可信度在80%～99%之間，對成分的最終鑒定確認(rèn)工作需要對照品比對或采用IR或NMR等更多分析方法的共同研究。實(shí)驗(yàn)中采用的水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，提取過程中加熱時間較長，可能會對部分不穩(wěn)定的倍半萜類揮發(fā)油成分產(chǎn)生影響。在蓬莪術(shù)的GC-MS測定中，由于NIST08譜庫收載數(shù)據(jù)有限，只指認(rèn)出了5種成分，占揮發(fā)油的四分之一，因其他成分可信度低于80%，不可取信。此外印尼姜黃和姜黃的指認(rèn)成分也不多，后續(xù)研究可利用高分辨質(zhì)譜進(jìn)行測定，并升級數(shù)據(jù)庫以利于對所得成分的分析。

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（責(zé)任編輯：何瑤）

Comparison of volatile oil of Indonesia Jianghuang， Jianghang and PengEzhu based on GC-MS analysis

NurizaRahmadini ， GAN Yan-xiong， ZHENG Yong-feng， WANG Lei， YU Jia-li， LIAO Wan， FU Chao-mei // （School of Pharmacy， Chengdu University of Traditional Chinese Medicine； National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research， Development and Utilization of Chinese Medicine Resources， Chengdu 611137， Sichuan）

［Abstract］The composition and relative contents of volatile oil from Indonesian Jianghuang， Jianghuang and PengEzhu were researched and compared. Method: The volatile oil was extracted by steam distillation， and then the chemical compounds of three herbal was analyzed by gas chromatography - mass spectrometry （GC-MS）. Compound with more than 80% credibility were selected after retrieving of NIST library. Result: 16 active compounds were found in three samples， including 6 compounds of Indonesian Jianghuang， 9 compounds of Jianghuang and 5 compounds of Pengezhu. α- curcumene was found in both Indonesian Jianghuang and Jianghuang. Camphor was found in both Indonesian Jianghuang and PengEzhu. Urmerone and Germacrone were found in both Jianghuang and PengEzhu. But other components were different. Conclusion: Both similarity and difference of volatile oil can be found among Indonesian Jianghuang， Jianghuang and PengEzhu

［Key words］Indonesian Jianghuang； Jianghuang； Pengezhu； GC-MS； volatile oil； Chemical difference

［中圖分類號］R 285.5

［文獻(xiàn)標(biāo)識碼］A

［文章編號］1674-926X（2016）02-007-03

［基金項(xiàng)目］國 家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目（81403103）；中藥資源四川省青年科技創(chuàng)新研究團(tuán)隊(duì)（2015TD0028）；四川省科技支撐計(jì)劃（2014SZ0156）；四川省教育廳面上項(xiàng)目（2013SZB0781）

［作者簡介］Nuriza Rahmadini，在讀碩士，印度尼西亞人，從事新制劑、新劑型和中藥炮制工藝與機(jī)理研究工作 Tel:18227689769

［通訊作者］廖婉，博士，講師，從事新制劑、新劑型和中藥炮制工藝與機(jī)理研究工作

［收稿日期］2016-02-18