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    SMG-1在腫瘤疾病中的研究價值及進(jìn)展

    2014-03-10 21:44:01王慶光許利劍
    醫(yī)學(xué)研究雜志 2014年1期
    關(guān)鍵詞:證實(shí)途徑誘導(dǎo)

    王慶光 許利劍

    在哺乳動物細(xì)胞內(nèi),PIKK家族包括6個成員,分別是哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥突變基因(ATM),共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥Rad3相關(guān)蛋白(ATR),DNA依賴蛋白激酶催化因子(DNA-PKcs),生殖器形成抑制基因(SMG-1)和轉(zhuǎn)化/轉(zhuǎn)錄域相關(guān)蛋白(TRRAP)。其中SMG-1是最新發(fā)現(xiàn)的成員,因與秀麗隱桿線蟲(C.elegans)的CeSMG-1蛋白同源而得名。cDNA文庫測序顯示SMG-1基因可編碼含有3031個氨基酸的蛋白質(zhì),該蛋白包含1個保守的激酶結(jié)構(gòu)域、PIK相關(guān)激酶獨(dú)特的C-末端結(jié)構(gòu)域以及FKBP12-雷帕霉素復(fù)合物的結(jié)合位點(diǎn)結(jié)構(gòu)域(與在mTOR中發(fā)現(xiàn)的類似)。人們對于SMG-1的認(rèn)識始于其參與的無義介導(dǎo)的mRNA降解(non-sense mRNA decay,NMD)途徑,該途徑能夠迅速識別并降解因無義突變或移碼突變產(chǎn)生的含有提前終止密碼子(premature termination codons,PTC)的mRNA,避免具有潛在毒性的截短蛋白的產(chǎn)生。隨著研究的深入,人們發(fā)現(xiàn)SMG-1同ATM、ATR等PIKK蛋白激酶一樣,也在DNA損傷修復(fù)中發(fā)揮維持基因組穩(wěn)定性的作用。但不同的是它還介導(dǎo)了包括RNA損傷在內(nèi)的更為廣泛的應(yīng)激反應(yīng)。為進(jìn)一步探討其價值,有研究證實(shí)SMG-1基因敲除或突變后,腫瘤細(xì)胞對放化療及TNF-α誘導(dǎo)凋亡的敏感度顯著提高,提示該基因?qū)拱┧幬锘蛏渚€等誘導(dǎo)的腫瘤損傷具有保護(hù)作用,可能是腫瘤耐藥及抗輻射的潛在因素之一。最新研究顯示SMG-1還參與調(diào)控細(xì)胞生長、增殖甚至有抑制腫瘤發(fā)生進(jìn)展的潛能。目前已有研究將其引入腫瘤的病因機(jī)制及相關(guān)治療的研究。本文將歸納總結(jié)當(dāng)前有關(guān)SMG-1的功能研究及在腫瘤中的研究進(jìn)展。

    一、NND途徑

    1.SMG-1介導(dǎo)的NMD途徑:NMD途徑是近年發(fā)現(xiàn)的一種在真核生物中廣泛存在的高度保守的RNA監(jiān)控機(jī)制,也是研究比較透徹的SMG-1介導(dǎo)的功能之一。NMD途徑通過迅速識別并降解無義突變產(chǎn)生的含有提前終止密碼子的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,阻止具有潛在毒害的截短蛋白的表達(dá)及堆積,并且該途徑還能夠調(diào)節(jié)小部分正常轉(zhuǎn)錄[1]。Yamashita 等[2]發(fā)現(xiàn)抑制SMG-1活性后NMD途徑也受到抑制,后續(xù)研究證實(shí)SMG-1作為Upf1(up-frameshift protein)磷酸化激酶,是觸發(fā)NMD反應(yīng)的重要因子之一。在該途徑中,SMG-1能夠通過與Upf1相結(jié)合并促使其磷酸化,同時與 eRF1、eRF3形成 SURF(SMG1-Upf1-eRF)復(fù)合物,而磷酸化后的Upf1則繼續(xù)招募SMG-5/SMG-7復(fù)合物并引發(fā)對無義mRNA的脫帽降解,避免了缺陷mRNA的繼續(xù)翻譯[3,4]。盡管如此,還是有少量的含有PTC的缺陷mRNA逃逸NMD途徑的識別跟降解并最終翻譯表達(dá)出C端截?cái)嗟鞍?,而在這些蛋白中,大部分并不具備原有正常功能,或者競爭性抑制正常蛋白發(fā)揮作用,或者獲得其他異常功能,此類蛋白堆積均會導(dǎo)致機(jī)體患病,并引發(fā)相關(guān)表型[5]。目前,NMD途徑的保護(hù)作用已被證實(shí)在人類遺傳病病因?qū)W中扮演著至關(guān)重要的角色。在已知人類疾病相關(guān)基因突變中,約30%的突變產(chǎn)生了含PTC的mRNA[6]。例如β-地中海貧血癥和進(jìn)行性小腦性共濟(jì)失調(diào)及萎縮等已被證實(shí)是由于相關(guān)基因的外顯子發(fā)生了無義突變,最終導(dǎo)致相關(guān)蛋白無法正常合成或合成量不足而致?。?,8]。

    2.NMD途徑在腫瘤發(fā)病機(jī)制中的研究:目前NMD途徑也開始被引入到探究腫瘤疾病的相關(guān)研究中,并證實(shí)其與人類腫瘤疾病有著密切關(guān)系。Noensi等[9]提出可通過抑制NMD途徑來鑒定腫瘤突變基因,其主要原理是干擾NMD途徑的關(guān)鍵因子SMG-1和hUpf1的表達(dá)來抑制或弱化NMD途徑的效應(yīng),再通過基因芯片技術(shù)比較基因表達(dá)的前后變化,表達(dá)上調(diào)者即可能為發(fā)生突變的抑癌基因。在此基礎(chǔ)上,Paillusson等[10]提出采用GFP標(biāo)記報(bào)告基因系統(tǒng)來監(jiān)測NMD,使研究更加形象直觀。隨后人們通過類似方法,在結(jié)腸癌、前列腺癌、乳腺癌及卵巢癌中均發(fā)現(xiàn)了相關(guān)的抑癌基因[9,11,12]。目前研究已證實(shí)BRCA1、p53以及WT1等抑癌基因發(fā)生無義突變所產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物會被NMD途徑識別并降解,從而喪失抗癌效應(yīng),最終誘發(fā)腫瘤形成[13]。SMG-1所介導(dǎo)的NMD途徑作為mRNA轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)機(jī)制之一,在真核生物基因表達(dá)的監(jiān)控方面扮演重要角色,并為腫瘤疾病的發(fā)病機(jī)制研究提供了新的思路及方法。

    二、SMG-1在應(yīng)激反應(yīng)中的作用及價值

    1.SMG-1介導(dǎo)的基因毒性應(yīng)激反應(yīng):隨著研究投入的增加,人們對SMG-1的認(rèn)識也有了更全面的認(rèn)知,國內(nèi)外的研究者發(fā)現(xiàn)SMG-1不僅在NMD途徑中發(fā)揮關(guān)鍵作用,而且還參與DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)、缺氧及凋亡等多個生物進(jìn)程[14]。PIKK在協(xié)調(diào)包括核苷酸損傷在內(nèi)的多種基因毒性壓力反應(yīng)中發(fā)揮維持基因組穩(wěn)定的重要作用。其中,ATM和DNA-PKcs主要在DNA雙鏈損傷應(yīng)答中起作用,ATR則主要參與單鏈DNA損傷及復(fù)制叉停滯的應(yīng)激應(yīng)答,但彼此之間并沒有嚴(yán)格分界。后續(xù)研究證實(shí)SMG-1也能夠感知DNA損傷,將DNA損傷信號轉(zhuǎn)導(dǎo)到下游靶蛋白并通過級聯(lián)放大反應(yīng)啟動應(yīng)激系統(tǒng),并誘導(dǎo) p53基因serine 15位點(diǎn)的磷酸化[15]。Gehen等、Brumbaugh等也先后證實(shí)了SMG-1在基因毒性應(yīng)激反應(yīng)中能夠通過活化P53和P21介導(dǎo)的蛋白水解作用來調(diào)節(jié)G1/S周期進(jìn)程,引起細(xì)胞周期的阻滯,為DNA修復(fù)提供時間。若涉及廣泛的損傷,則激活凋亡機(jī)制引起細(xì)胞凋亡。

    2.SMG-1表達(dá)與腫瘤放化療所致DNA損傷抗性的關(guān)系:Brumbaugh等發(fā)現(xiàn)敲除SMG-1基因的人骨肉瘤細(xì)胞可出現(xiàn)自發(fā)性DNA損傷,并對輻射的敏感度顯著增強(qiáng)。研究還發(fā)現(xiàn)SMG-1表達(dá)水平的差異使得人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)陽性的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)患者較HPV陰性者放化療反應(yīng)性較好,且前者的總生存率及無病生存率都明顯高于后者,造成這種表達(dá)差異的原因是HPV中的轉(zhuǎn)化基因E6/E7能夠引起SMG-1基因啟動子超甲基化,導(dǎo)致SMG-1表達(dá)下調(diào),且學(xué)者們發(fā)現(xiàn)低SMG-1水平時能誘導(dǎo)更多的細(xì)胞凋亡,從而表現(xiàn)出對電離輻射的高敏感度。夏啟勝等[16]研究發(fā)現(xiàn)通過siRNA技術(shù)抑制SMG-1基因后,人肺癌H1299細(xì)胞株對順鉑及吉西他濱等化療藥物的敏感度有所增加,其機(jī)制與腫瘤細(xì)胞線粒體凋亡信號通路活性增強(qiáng)有關(guān)。此外,還發(fā)現(xiàn)胰腺癌PANC-1細(xì)胞在吉西他濱處理后可引起miR-155/BIC表達(dá)上調(diào),而此效應(yīng)能被SMG-1 siRNA顯著抑制。在胰腺癌細(xì)胞中,升高的miR-155抑制一些抑癌基因的表達(dá),促進(jìn)癌細(xì)胞的生長。由此可推測,通過siRNA技術(shù)或藥物等途徑來下調(diào)SMG-1的表達(dá)可提高腫瘤細(xì)胞對放化療的敏感度,從而改善腫瘤患者預(yù)后。

    3.SMG-1在氧化、缺氧應(yīng)激中的作用:在秀麗隱桿線蟲中SMG-1基因失活者的壽命較正常者延長,Ingrid等證實(shí)其原因在于SMG-1失活引起蟲體氧化抗性增強(qiáng),并推測調(diào)控壽命的功能可能仍在哺乳動物中保存。TERRA是端粒染色質(zhì)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的端粒重復(fù)單元的RNA序列,能夠調(diào)節(jié)端粒酶的活性,對維持端粒穩(wěn)定性起到重要作用。研究發(fā)現(xiàn)SMG-1在端粒中富集,通過調(diào)控TERRA與端粒染色質(zhì)的結(jié)合及解離來維持端粒的穩(wěn)定性,避免形成異常的DNA/RNA結(jié)構(gòu)。缺氧時腫瘤細(xì)胞中SMG-1可被激活,通過部分阻斷MAPK途徑而抑制缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的活性,進(jìn)而減少低氧誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和存活因子(carbonic anhydraseⅨ,CA9)的分泌,同時限制了腫瘤細(xì)胞的遷徙轉(zhuǎn)移。通過檢測SMG-1表達(dá)水平或變異情況可預(yù)測腫瘤患者對MAPK或血管形成抑制劑的治療療效,靶向上調(diào)SMG-1的藥物聯(lián)合血管形成抑制劑將可取得更優(yōu)的療效,將為腫瘤患者的治療提供新的思路。

    4.SMG-1參與細(xì)胞因子介導(dǎo)的凋亡應(yīng)激反應(yīng):人們發(fā)現(xiàn)SMG-1不僅像ATM、ATR一樣存在于細(xì)胞核內(nèi),還可同時出現(xiàn)在胞質(zhì)內(nèi)。因此,研究者推測SMG-1除了介導(dǎo)紫外線照射、復(fù)制壓力等介導(dǎo)的DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)外,還可能在細(xì)胞因子及核外刺激所誘導(dǎo)的應(yīng)激反應(yīng)中發(fā)揮作用。為了驗(yàn)證此假設(shè),Oliveira等通過檢測SMG-1基因敲除前后對一些可誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的因子的敏感度變化,發(fā)現(xiàn)了敲除了SMG-1基因后U2OS骨肉瘤細(xì)胞對TNF-α誘導(dǎo)其凋亡的速度及程度均明顯增加。SMG-1發(fā)揮的抗TNF-α誘導(dǎo)的凋亡效應(yīng)是通過調(diào)節(jié)凋亡抑制因子FLIP(FADD樣白介素-1β轉(zhuǎn)換酶抑制蛋白)的降解來完成的。研究證實(shí)SMG-1及NF-κB誘導(dǎo)激酶(NF-κB -inducing kinase,NIK)在類 Smac低分子及TNF-α治療中可通過維持c-FLIP的水平,避免引發(fā)caspase-8依賴的凋亡途徑。Meslin等研究證實(shí)SMG-1是粒酶B應(yīng)激反應(yīng)激酶,在粒酶B介導(dǎo)的DNA損傷應(yīng)激反應(yīng)中具有不可替代的作用,一旦SMG-1基因敲除,粒酶B所誘導(dǎo)的靶細(xì)胞凋亡作用也隨之削弱。雖然在這兩治療方案中SMG-1發(fā)揮的作用并不一致,但仍揭示了SMG-1表達(dá)情況對預(yù)測治療效應(yīng)的價值,也為治療方案的抉擇提供了理論依據(jù)。

    前文所述的包括化療藥物、射線一級各種環(huán)境應(yīng)激壓力反應(yīng)在內(nèi)的研究中表明,SMG-1表達(dá)水平及其活性在抗癌治療中所起的作用并非一致,因此它的作用取決于疾病的類型及治療策略。在不同疾病及治療措施中,其在耐藥或者增敏方面的價值還有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

    三、SMG-1調(diào)控生長及與腫瘤的關(guān)系

    SMG-1基因被認(rèn)為是被忽視的新抑癌基因,COSMIC數(shù)據(jù)庫顯示乳腺癌、腎癌及胃癌中均存在SMG-1基因的變異,并且在肺癌及黑色素瘤細(xì)胞系中其mRNA呈低表達(dá)水平。人類蛋白圖譜分析報(bào)告顯示在惡性淋巴瘤中無SMG-1的表達(dá)。因此SMG-1有抑制腫瘤產(chǎn)生的作用,但若缺失將大大增加罹患腫瘤的概率。然而此抑癌效應(yīng)與NMD途徑并無關(guān)聯(lián),Rouhana等利用RNAi篩查技術(shù)抑制NMD途徑的其他成分驗(yàn)證了SMG-1該效應(yīng)的獨(dú)特性。在渦蟲實(shí)驗(yàn)中,SMG-1通過抑制mTOR信號通路而協(xié)調(diào)生長調(diào)控,敲除SMG-1基因的渦蟲則表現(xiàn)為無節(jié)制的增殖并且無分化能力,最終因形成腫瘤而死亡。為證實(shí)這種突變是否會導(dǎo)致細(xì)胞的非正常生長而引發(fā)癌癥及進(jìn)一步探究SMG-1在體內(nèi)的生物學(xué)作用。研究人員構(gòu)建了SMG-1基因缺陷小鼠模型,發(fā)現(xiàn)純合子SMG-1敲除鼠因胚胎發(fā)育缺陷而死亡,僅有雜合子可存活,但壽命也較正常組縮短,原因在于此類小鼠有發(fā)生腫瘤的傾向。這些研究結(jié)果提示SMG-1是潛在的腫瘤抑制基因,一旦變異或缺失都將增加腫瘤形成的風(fēng)險(xiǎn)。

    然而目前研究還證實(shí)通過siRNA技術(shù)敲除SMG-1后的骨髓瘤細(xì)胞與對照組相比生存能力下降,同時急性髓性白血病中SMG-1mRNA表達(dá)上調(diào)。而且降低SMG-1表達(dá)或者抑制其活性所導(dǎo)致SMG-1功能缺失引起的表型也各不相同。因此說明SMG-1功能的具有復(fù)雜性,為后續(xù)的研究提出了新的方向及挑戰(zhàn)。

    SMG-1功能的具有多元性及復(fù)雜性,SMG-1所介導(dǎo)的NMD途徑及基因毒性應(yīng)激反應(yīng)都在一定程度上起到了保護(hù)性作用,減少了基因突變及突變引起表型,并在粒酶B等治療研究中,SMG-1的表達(dá)及酶活性是抗癌治療起效或增效的決定因素,SMG-1被認(rèn)為是抑癌基因,一旦缺乏將導(dǎo)致腫瘤發(fā)生率升高。此外,SMG-1所介導(dǎo)的基因毒性應(yīng)激反應(yīng)是化療、放療及TNF-α等治療中耐藥耐射線的因素之一,在骨髓瘤、急性髓性白血病等惡性腫瘤疾病中呈高表達(dá)。因此,SMG-1所介導(dǎo)的角色并不一致,而SMG-1在癌癥的發(fā)展過程中扮演的不同角色取決于疾病的類型、分期乃至所選擇的治療策略。鑒于SMG-1在化療藥物和放療中的耐藥效應(yīng)以及在粒酶B和血管形成抑制劑等治療中的增敏價值,完全可用于療效評估,并依此為腫瘤患者提供合理的個性化治療方案。同時SMG-1作為腫瘤抑制基因,目前關(guān)于其在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及治療方面的研究成果并不是很多,還需進(jìn)一步地探討SMG-1在癌癥生物學(xué)中錯綜復(fù)雜的作用機(jī)制及其在腫瘤生物學(xué)中的地位跟價值。SMG-1有望成為腫瘤治療的突破點(diǎn)之一,為腫瘤疾病的診治提供新的思路及方法。

    1 Nicholson P,Yepiskoposyan H,Metze S,et al.Nonsense-mediated mRNA decay in human cells:mechanistic insights,functions beyond quality control and the double - life of NMD factors[J].Cell Mol Life Sci,2010,67(5):677 -700

    2 Yamashita A,Ohnishi T,Kashima I,et al.Human SMG-1,a novel phosphatidylinositol 3-kinase-related protein kinase,associates with components of the mRNA surveillance complex and is involved in the regulation of nonsense - mediated mRNA decay[J].Genes Dev,2001,15(17):2215 -2228

    3 Hwang J,Maquat LE.Nonsense-mediated mRNA decay(NMD)in animal embryogenesis:to die or not to die,that is the question[J].Curr Opin Genet Dev,2011,21(4):422 -430

    4 Yamashita A.Role of SMG-1-mediated Upf1 phosphorylation in mammalian nonsense - mediated mRNA decay[J].Genes Cells,2013,18(3):161-175

    5 Kerr TP,Sewry CA,Robb SA,et al.Long mutant dystrophins and variable phenotypes:evasion of nonsense - mediated decay[J].Hum Genet,2001,109(4):402 -407

    6 Bhuvanagiri M,Schlitter AM,Hentze MW,et al.NMD:RNA biology meets human genetic medicine[J].Biochem J,2010,430(3):365-377

    7 Baserga SJ,Benz EJ Jr.Nonsense mutations in the human beta-globin gene affect mRNA metabolism[J].Proc Natl Acad Sci U S A,1988,85(7):2056 -2060

    8 Gerards M,den Bosch BV,Calis C,et al.Nonsense mutations in CABC1/ADCK3 cause progressive cerebellar ataxia and atrophy[J].Mitochondrion,2010,10(5):510 -515

    9 Noensie EN,Dietz HC.A strategy for disease gene identification through nonsense- mediated mRNA decay inhibition[J].Nat Biotechnol,2001,19(5):434 -439

    10 Paillusson A,Hirschi N,Vallan C,et al.A GFP-based reporter system to monitor nonsense- mediated mRNA decay[J].Nucleic Acids Res,2005,33(6):e54

    11 Huusko P,Ponciano-Jackson D,Wolf M,et al.Nonsense-mediated decay microarray analysis identifies mutations of EPHB2 in human prostate cancer[J].Nat Genet,2004,36(9):979 - 983

    12 Montagna M,Agata S,De Nicolo A,et al.Identification of BRCA1 and BRCA2 carriers by allele-specific gene expression(AGE)analysis[J].Int J Cancer,2002,98(5):732 -736

    13 Perrin Vidoz L,Sinilnikova OM,Stoppa Lyonnet D,et al.The nonsense-mediated mRNA decay pathway triggers degradation of most BRCA1 mRNAs bearing premature termination codons[J].Hum Mol Genet,2002,11(23):2805 -2814

    14 Brown JA,Roberts TL,Richards R,et al.A novel role for hSMG-1 in stress granule formation[J].Mol Cell Biol,2011,31(22):4417 -4429

    15 Gewandter JS,Bambara RA,O'Reilly MA.The RNA surveillance protein SMG1 activates p53 in response to DNA double-strand breaks but not exogenously oxidized mRNA[J].Cell Cycle,2011,10(15):2561-2567

    16 夏啟勝,李源貞,李紅艷,等.抑制人類生殖器形成抑制基因?qū)Ψ切〖?xì)胞肺癌H1299細(xì)胞化療敏感性的影響[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2011,91(8):554 -559

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