乙肝攜帶產(chǎn)婦血清、乳汁及新生兒血清中HBV DNA載量的關(guān)系探討

夏 偉 陳 芳

1.重慶市大渡口區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400084；2.四川省自貢市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川自貢 643000

中國屬于乙型肝炎病毒（HBV）感染高流行區(qū)，一般人群的HBsAg陽性率高達(dá)9.09%。接種與未接種乙型肝炎疫苗人群的HBsAg陽性率分別達(dá)4.51%和9.51%[1]。文獻(xiàn)報(bào)道[2]，產(chǎn)婦HBV感染度高達(dá)23.51%。如何阻斷HBV的母嬰傳播是臨床傳染病學(xué)研究的焦點(diǎn)之一。目前對(duì)于乙肝攜帶者產(chǎn)后母乳喂養(yǎng)會(huì)否傳染HBV仍存在爭(zhēng)議[3]。血清HBV DNA是判斷乙肝傳染性和病毒復(fù)制最直接可靠的指標(biāo)[4-6]。筆者采用熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)乙型肝炎病毒攜帶產(chǎn)婦血清、乳汁和新生兒血清中HBV DNA含量，以探討產(chǎn)婦血清不同HBV DNA水平與乳汁和新生兒血清HBV DNA載量之間的關(guān)系，為臨床采取合適的孕期處理措施和產(chǎn)后母乳喂養(yǎng)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集與處理

收集2009年12月～2011年12月我院婦產(chǎn)科分娩的乙型病毒性肝炎病毒感染產(chǎn)婦293例，年齡19～43歲，平均27歲。血清標(biāo)本采集：產(chǎn)婦空腹靜脈采血2 mL、新生兒出生后24 h內(nèi)（未實(shí)施被動(dòng)和主動(dòng)免疫）于股靜脈采血2 mL，均在2 h內(nèi)分離血清備用。乳汁標(biāo)本采集：清洗乳房后，擠乳汁1.5～2.5 mL于消毒試管內(nèi)立即送檢。乳汁標(biāo)本處理參考文獻(xiàn)[7]，先將標(biāo)本3 000 r/min離心10 min（離心半徑20 cm），棄上層脂肪層，取中層乳清進(jìn)行檢測(cè)。分離后的血清和乳汁標(biāo)本儲(chǔ)存于-70℃冰箱保存，同時(shí)完成檢測(cè)。

1.2 試劑、方法與儀器

HBV DNA熒光定量檢測(cè)試劑盒（中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司），嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，檢測(cè)過程實(shí)施全面質(zhì)量控制。以病毒載量≥1.0×103copies/mL判為陽性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀FTC-2000型（上海楓嶺生物技術(shù)有限公司）。

1.3 分組方法

根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，將產(chǎn)婦血清HBV DNA載量劃分為血清陰性組（HBV DNA＜103copies/mL）、血清低拷貝組（103copies/mL≤HBV DNA≤106copies/mL）和血清高拷貝組（HBV DNA＞106copies/mL）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示，組間對(duì)比采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HBV感染產(chǎn)婦血清HBV DNA載量

293例HBV感染產(chǎn)婦中，HBV DNA陰性組、低拷貝組和高拷貝組分別占50.2%、21.8%和28.0%。見表1。

表1 293例產(chǎn)婦血清中HBV DNA檢測(cè)結(jié)果

2.2 HBV感染產(chǎn)婦血清HBV DNA不同載量組與乳汁及新生兒血清中HBV DNA載量的關(guān)系

血清HBV DNA陰性組產(chǎn)婦乳汁中HBV DNA檢出率為0。而血清低拷貝組和高拷貝組產(chǎn)婦乳汁HBV DNA的陽性檢出率分別為12.5%（8/64）和76.8%（63/82），前者明顯低于后者（P＜0.01）。而血清HBV DNA陰性組、低拷貝組和高拷貝組之間新生兒血清HBV DNA陽性率分別為2.0%（3/147）、3.1%（2/64）和3.7%（3/82），三者之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 HBV感染產(chǎn)婦乳汁及新生兒血清中HBV DNA檢測(cè)結(jié)果[n（%）]

3 討論

乙型肝炎病毒（HBV）屬嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae），為部分雙鏈環(huán)狀DNA。HBV DNA是乙肝病毒的遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)，是反映HBV復(fù)制及傳染性的直接標(biāo)志。從本研究結(jié)果看，有50.2%乙肝攜帶產(chǎn)婦血清HBV DNA陰性，49.8%為陽性，其中低拷貝組和高拷貝組HBV DNA陽性率分別為21.8%和28.0%。在147例血清HBV DNA陰性組中，產(chǎn)婦乳汁中HBV DNA全部陰性。在血清HBV DNA的陽性的產(chǎn)婦中，低拷貝組產(chǎn)婦乳汁HBV DNA的陽性率僅為12.5%，而高拷貝組產(chǎn)婦乳汁HBV DNA的陽性率高達(dá)76.8%，陽性率顯著高于低拷貝組。說明產(chǎn)婦血清HBV DNA分泌到乳汁中可能存在一個(gè)濃度臨界值（閾值），106copies/mL很可能就是產(chǎn)婦血清HBV DNA分泌到乳汁的閾值濃度。血清HBV DNA達(dá)到或超過臨界值濃度時(shí)，乳汁中HBV DNA陽性率大幅顯著增加，而小于這個(gè)界值濃度時(shí)乳汁HBV DNA陽性率低。這與文獻(xiàn)[8]研究結(jié)果基本一致。低拷貝組乳汁HBV DNA陽性率仍比血清HBV DNA陰性組產(chǎn)婦高，兩者差異有統(tǒng)計(jì)意義。

因此，對(duì)于母乳喂養(yǎng)問題建議如下，乳汁HBV DNA陽性的產(chǎn)婦，不宜哺乳喂養(yǎng)，而應(yīng)采取人工喂養(yǎng)。當(dāng)產(chǎn)婦血清和乳汁HBV DNA均陰性時(shí)可以放心實(shí)行母乳喂養(yǎng)，當(dāng)產(chǎn)婦血清HBV DNA陽性濃度在103～106copies/mL時(shí)，應(yīng)檢測(cè)乳汁HBV DNA濃度確定可否母乳喂養(yǎng)（乳汁HBV DNA陰性可進(jìn)行，陽性則不可進(jìn)行母乳喂養(yǎng)）；當(dāng)產(chǎn)婦血清HBV DNA濃度達(dá)到或超過閾值濃度106copies/mL時(shí)，HBV DNA容易大量進(jìn)入乳汁，則不宜進(jìn)行母乳喂養(yǎng)，而建議進(jìn)行人工喂養(yǎng)。

本研究結(jié)果表明，新生兒血清HBV DNA陽性率為2.0%～4.9%，在血清陰性組、低拷貝組和高拷貝組產(chǎn)婦中無差異（P＞0.05）。這說明產(chǎn)婦血清中HBV DNA陽性率與胎兒宮內(nèi)感染率無顯著相關(guān)性，與文獻(xiàn)報(bào)道相符[9]。HBsAg陽性產(chǎn)婦中49.8%（146/293）具傳染性，而宮內(nèi)感染率才3.1%～4.9%。其原因很可能是HBV母嬰垂直傳播受到胎盤屏障的阻隔。換言之，胎盤屏障受損是胎兒宮內(nèi)感染的一個(gè)重要因素。這一點(diǎn)啟示我們臨床醫(yī)師針對(duì)HBV感染的孕婦在孕期要盡量減少藥物或其他因素對(duì)胎盤屏障損傷，以減少胎兒宮內(nèi)感染率。

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