眼瞼基底細(xì)胞癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-2和-9表達及其對預(yù)后判斷的價值

焦勝敏 (廊坊衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院，河北 廊坊 065001)

眼瞼基底細(xì)胞癌是眼瞼惡性腫瘤中最常見的一種，常見于老年人，雖然發(fā)病緩慢，但其生物學(xué)行為仍有自身特點〔1〕。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2和-9是MMPs家族重要成員，對細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解作用明顯，對轉(zhuǎn)移有明顯促進作用〔2〕。本實驗應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測眼瞼基底細(xì)胞癌中MMP-2和-9表達，探討二者在不同臨床特征中的表達差別，關(guān)注二者相關(guān)性，以期為研究腫瘤生物學(xué)行為提供幫助。

1 材料與方法

1.1 材料 2007年10月至2008年10月廊坊市人民醫(yī)院眼瞼基底細(xì)胞癌手術(shù)后蠟塊組織86例，其中男46例，女40例，年齡35～80(平均57.9)歲。納入均符合WHO關(guān)于基底細(xì)胞癌診斷標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn):①術(shù)前行放、化療患者;②臨床資料不完全的患者。同時選取眼瞼松弛癥患者60例正常眼瞼組織為對照組，其中男35例，女25例。兩組患者一般臨床特征無明顯差別，具有可比性。隨訪12～60(平均43.2)個月。

1.2 免疫組織化學(xué)方法 MMP-2和-9試劑均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。應(yīng)用免疫組化SP法檢測，應(yīng)用DAB染色。嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作，并均由同一病理科技術(shù)人員完成，嚴(yán)格質(zhì)控。

1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) MMP-2和-9免疫組化染色結(jié)果均由兩位病理主治醫(yī)師共同閱片得出。MMP-2和-9蛋白均以細(xì)胞質(zhì)有棕黃色顆粒為陽性，每張切片觀察10個具有代表性的高倍鏡視野，計算陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，取平均數(shù)。結(jié)果以≥25%為陽性，以＜25%為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗和線性相關(guān)分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者MMP-2和-9蛋白表達 觀察組MMP-2〔50(58.14%)〕和-9表達陽性率〔56(65.12%)〕明顯高于對照組〔23(38.33%)，18(30.00%)〕(χ2=5.545 7，P=0.018 5;χ2=17.436 3，P ＜0.000 1)。

2.2 MMP-2和-9表達與基底細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系基底細(xì)胞癌中MMP-2和-9表達陽性率與腫瘤體積、是否復(fù)發(fā)及K67表達密切相關(guān)。見表1。

表1 MMP-2和-9陽性表達與基底細(xì)胞癌臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

2.3 基底細(xì)胞癌中MMP-2和-9表達的相關(guān)性 經(jīng)線性相關(guān)分析顯示，基底細(xì)胞癌中MMP-2和-9表達呈正相關(guān)(r=0.43，P=0.028 1)。

2.4 基底細(xì)胞癌中MMP-2和-9表達與預(yù)后的關(guān)系 經(jīng)生存分析顯示基底細(xì)胞癌中MMP-2和-9表達與生存時間相關(guān)(P＜0.05)，即基底細(xì)胞癌中MMP-2和-9高表達患者預(yù)后差。

3 討論

基底細(xì)胞癌治療以廣泛、徹底切除為主，術(shù)后加用放療，一般預(yù)后較為理想，但是患者術(shù)后轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)較多，主要與其惡性生物學(xué)行為有關(guān)，主要是侵襲和轉(zhuǎn)移〔3〕。基底細(xì)胞癌細(xì)胞要實現(xiàn)侵襲和轉(zhuǎn)移，必須穿過由ECM和基底膜構(gòu)成的屏障，腫瘤生長依靠血管生成，而在侵襲和轉(zhuǎn)移過程中，腫瘤細(xì)胞必須穿過由ECM和基底膜構(gòu)成的屏障。當(dāng)前觀察降解ECM的重要成分是MMPs，而在此過程中起作用的是MMPs家族，MMP-2和-9是鋅離子依賴的蛋白水解酶，也稱明膠酶，可由腫瘤細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞以酶原形式分泌，并經(jīng)水解后激活，具有較強的降解基底膜成分功能，被認(rèn)為與腫瘤惡性進程、侵襲和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)〔4，5〕。劉潔等〔6〕通過免疫組化方法檢測基底細(xì)胞癌中MMP-9表達，認(rèn)為MMP-9表達增加和Ⅳ型膠原表達減少，對基底細(xì)胞癌侵襲和轉(zhuǎn)移有重要價值。

本實驗結(jié)果提示MMP-2和-9在眼瞼基底細(xì)胞癌發(fā)生及進展中起重要作用。聯(lián)合檢測腫瘤中MMP-2和-9表達可能對判斷眼瞼基底細(xì)胞癌患者預(yù)后有一定意義。本實驗結(jié)果提示MMP-2和-9在蛋白水平上具有協(xié)同正向作用。MMP-2和-9均具有血管新生的作用，且具有同源性，這是二者協(xié)同表達的重要內(nèi)在原因〔7，8〕，當(dāng)MMPs激活后，通過與細(xì)胞膜上特異性受體結(jié)合而發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)，尤其是促進腫瘤發(fā)生發(fā)展。

1 狄正鴻，崔 樂，周 卓，等.基底細(xì)胞癌中MMP-2、TIMP-4表達的研究〔J〕.中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2008;37(1):100-2.

2 劉愛東.基質(zhì)金屬蛋白酶-9在胃癌中的表達及意義〔J〕.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011;20(18):2226-7.

3 Karahan N，Baspinar S，Bozkurt KK，et al.Increased expression of COX-2 in recurrent basal cell carcinoma of the skin:a pilot study〔J〕.Indian J Pathol Microbiol，2011;54(3):526-31.

4 劉愛東，龐久玲，劉士生.胃癌中基質(zhì)金屬蛋白酶-9和CD105表達關(guān)系的研究〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2009;29(4):886-7.

5 Monhian N，Jewett BS，Baker SR，et al.Matrix metalloproteinase expression in normal skin associated with basal cell carcinoma and in distal skin from the same patients〔J〕.Arch Facial Plast Surg，2005;7(4):238-43.

6 劉 潔，魏羽佳，宋守榮.MMP-9和Ⅳ型膠原在皮膚基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌中表達情況的初步探討〔J〕.貴州醫(yī)藥，2010;34(3):202-4.

7 Yucel T，Mutnal A，F(xiàn)ay K，et al.Matrix metalloproteinase expression in basal cell carcinoma:relationship between enzyme profile and collagen fragmentation pattern〔J〕.Exp Mol Pathol，2005;79(2):151-60.

8 Oh ST，Kim HS，Yoo NJ，et al.Increased immunoreactivity of membrane type-1 matrix metalloproteinase(MT1-MMP)and β-catenin in high-risk basal cell carcinoma〔J〕.Br J Dermatol，2011;165(6):1197-204.