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      兩種檢測D-二聚體方法的比較

      2012-12-15 02:30:56
      中外醫(yī)療 2012年20期
      關(guān)鍵詞:濁法膠體金二聚體

      李 莉

      鄭州市中心醫(yī)院,河南鄭州 450000

      血漿D-二聚體(D-dimer)是纖維蛋白降解產(chǎn)物,是一個特異性的纖溶過程標記物,其水平的增加可反映繼發(fā)性纖溶活性的增強,D-二聚體水平增高提示機體內(nèi)存在血栓形成和繼發(fā)性纖溶亢進。 近年來,D-二聚體逐漸拓展到許多領(lǐng)域,盡管其診斷特異性不高,但該實驗具有高度的敏感性和極佳的陰性預測能力,特別是應(yīng)用于深靜脈血栓(DVT)肺靜脈栓塞(PE)以及彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的診斷,D-二聚體的定量測定也常用作臨床監(jiān)測溶栓效果的指標之一,另外,也用于惡性腫瘤、產(chǎn)科并發(fā)癥和糖尿病并發(fā)癥的診斷中。 現(xiàn)將該院兩種檢測D-二聚體的方法進行比較,結(jié)果如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      該院2011年12月-2012年1月病房的住院病人4 650 例,其中男2 543 例,女2 107 例,年齡在20~99 歲之間。

      1.2 方法

      2011年12月2 300 例病人采用挪威Nycocard 公司生產(chǎn)的D-二聚體單一試劑盒及配套的測讀儀Nycocard Reader 。2012年1月的2 350 例病人采用免疫比濁Sysmex CA1500 全自動血凝儀進行檢測,試劑為德國德靈公司提供。

      1.3 標本采集與處理

      采集待檢者靜脈血1.8 mL 于含有109 mmol/L 枸櫞酸鈉0.2 mL的專用真空采血管中,充分混勻后用3000 r/min 離心10 min,分離血漿進行檢測。

      1.4 試驗原理

      膠體金法試驗原理,加入樣品中的D-二聚體分子被包有特異性單克隆抗體的濾過膜吸附,隨后加入D-二聚體單克隆抗體與膠體金的偶聯(lián)物溶液,膜上的D-二聚體抗體與偶聯(lián)物發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并發(fā)生顏色變化,通過光度計檢測讀數(shù),顏色的深淺與D-二聚體含量成正比。 免疫比濁法的原理,樣品中的D-二聚體分子與包被有高特異性D-二聚體單克隆抗體的乳膠顆粒結(jié)合后,乳膠顆粒發(fā)生凝集,在405nm檢測透光強度變化,凝集程度與樣本中的D-二聚體含量成正比。

      1.5 統(tǒng)計學處理

      用SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件進行t 檢驗和P 值比較。

      2 結(jié)果

      4650 例樣本中,Nycocard 試劑盒的陽性率為27.69%,Sysmex CA1500 全自動血凝儀法陽性率為32.34%,免疫比濁法的陽性率高于膠體金法,兩者差異有統(tǒng)計學意義。見表1。

      表1 4650 例樣本兩種方法檢測D-二聚體結(jié)果分析

      3 討論

      D-二聚體檢測最先用于臨床排除肺栓塞風險的評估中,且被證實有臨床價值。 臨床和實驗室也嘗試通過動態(tài)觀察D-二聚體水平來進行外科手術(shù)后血栓風險評估。近年來,D-二聚體檢測在心血管疾病、 惡性腫瘤以及精神疾病的領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。 D-二聚體的檢測在上述疾病的診斷、 疾病的發(fā)生發(fā)展,臨床用藥監(jiān)測,疾病預后的觀察均具有十分重要的意義。

      D-二聚體的測定方法很多,有定性和半定量的膠乳凝集實驗(LATEX)及定量的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA),膠體金免疫滲透試驗和免疫比濁法。 乳膠凝集法是一種半定量試劑盒,敏感性較低,且肉眼觀察,有主觀差異,只能作為篩查,該方法臨床現(xiàn)在已很少使用。ELISA 法檢測D-二聚體不受膽紅素、血紅蛋白、纖維蛋白原和FDP 干擾,因此更精確,敏感性更高[1]。 但由于其操作費時(約需3 h),每次均需做標準曲線,因此不適合單個標本檢測,比較適合批量的檢測。 金標斑點滲濾法操作簡便,不需要自動化的儀器,又能定量,單個或成批標本可隨時檢測[2]。 操作人員不需要進行專門培訓,可以進行床旁檢測,因此很多實驗室也采用這種方法進行檢測。全自動血凝儀免疫比濁法具有重復性好,可定量,操作簡單,人為因素少等優(yōu)點。 但這個方法需要有大型自動化儀器,價格昂貴,且操作者需要進行專門培訓,因此在一些不具備條件的基層醫(yī)院開展有一定的難度。

      現(xiàn)在國內(nèi)實驗室檢測D-二聚體使用最廣泛的是膠體金免疫滲濾法和免疫比濁法,曾有人報道這兩種方法檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學意義,兩種方法相關(guān)性良好[3-4],但在實驗室的日常工作中發(fā)現(xiàn),2011年12月雙抗體夾心挪威Nycocard Reader 多功能全定量檢測儀法測定的2 300 例病人,陽性637 例,陽性率僅為27.69%,而2012年1月改用免疫比濁法測定了2 350 例病人陽性者760 例,陽性率達到32.34%,免疫比濁法的陽性率明顯高于膠體金斑點滲濾法,經(jīng)過配對χ2檢驗,其陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 我們所得到的結(jié)果在一定程度與夏汛生[5],周靜[6]的研究相一致。

      由于D-二聚體片段的異源性,單克隆抗體的多樣性,目前D-二聚體檢測沒有國際標準品和行業(yè)標準品,從而造成不同檢測方法之間數(shù)據(jù)差距很大,不同檢測方法陽性率、敏感性和特異性均不同,所以不同檢驗結(jié)果的可比性很差,即使用同一份血漿標本用不同的方法進行測定,結(jié)果差異也非常明顯,我們的研究結(jié)果也證實了這兩種方法的差異。 目前暫時可行的解決辦法是同一實驗室內(nèi)只采取一種D-二聚體的測定方法,根據(jù)不同檢測體系制定各自的相關(guān)疾病的臨界值,并向臨床進行說明[7]。 因此建議各家醫(yī)院根據(jù)自己的條件,選擇一種適合自己實驗室的方法,加強與臨床進行溝通,避免疾病漏診或誤診,為臨床提供可靠的依據(jù)。

      [1] 彭黎明,鄧承祺.現(xiàn)代血栓與止血的實驗室檢測及應(yīng)用[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:637.

      [2] 張莉.檢測血漿D-二聚體的新金標斑點滲濾法試劑盒的臨床適用性[J].檢驗醫(yī)學,2010,25(1):30-32.

      [3] 周玉環(huán),彭和平,何文,等.D-二聚體檢測診斷肺栓塞的方法學研究與臨床意義[J].中國實用醫(yī)藥,2010,20(5):72-73.

      [4] 崔煥波,侯曉杰,榮愛紅.2 種D-二聚體檢測方法比較[J].中國實驗診斷學,2007,11(4):500-501.

      [5] 夏汛生,唐寧,張碧玉,等.D-二聚體兩種定量方法的評價[J].血栓與止血學,2007,13(2).

      [6] 周靜,孫家瑜,孫加冠,等.5 種D-二聚體檢測方法用于排除可疑靜脈血栓栓塞癥的臨床評價[J].四川大學學報:醫(yī)學版,2009,40(6):1078-1081.

      [7] 門劍龍,任靜.D-二聚體臨床應(yīng)用及標準化分析進展[J].中華檢驗醫(yī)學雜志,2010,33(8):793-796.

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