血清IL－6、IL－8和TNF－α在膽道術(shù)后感染監(jiān)測中的價(jià)值

姚燕珍 鮑舟君 張曉幫 安明和 方國安

膽道感染在肝膽外科比較常見，術(shù)后倘若認(rèn)識不足或治療措施不當(dāng)可進(jìn)展為重癥膽道感染，后者的病死率高達(dá)30%［1］。因此，術(shù)后密切監(jiān)測感染的嚴(yán)重程度、準(zhǔn)確評估病情是預(yù)防惡化的關(guān)鍵。由于僅30%～60%的膽道感染患者膽汁培養(yǎng)呈陽性，因此，多數(shù)情況下需借助一些非特異性的炎癥標(biāo)志物來判斷是否有細(xì)菌感染，如常規(guī)的體溫、WBC計(jì)數(shù)和GR%(中性粒細(xì)胞百分比)等，但它們受個(gè)體間差異、生理和病理因素的影響較大，在準(zhǔn)確性和及時(shí)性方面已經(jīng)難以滿足要求［2］。細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞主動分泌的、具有廣泛生物學(xué)功能的多肽或蛋白質(zhì)。研究表明，血漿中細(xì)胞因子的變化甚至早于急性時(shí)相蛋白，且與感染程度具有良好的線性關(guān)系［3］。然而，國內(nèi)將細(xì)胞因子檢測用于膽道術(shù)后感染監(jiān)測的報(bào)道很少。本文通過對35例膽汁細(xì)菌培養(yǎng)陽性的膽道感染患者的血清IL－6、IL－8和TNF－α進(jìn)行聯(lián)合檢測，并分別以細(xì)菌性肺炎、病毒性肝炎為對照，探討了它們在膽道感染術(shù)后炎癥監(jiān)測中的臨床應(yīng)用價(jià)值。

資料與方法

1．病例與分組:35例膽汁細(xì)菌培養(yǎng)陽性的膽道感染患者均來源于筆者醫(yī)院2010年肝膽外科的住院患者，其中膽囊切除21例、膽總管切開14例，男性13例、女性22例，中位年齡65歲(31～80歲);細(xì)菌性感染對照組為40例細(xì)菌性肺炎患者，其中男性32例，女性8例，中位年齡75歲(44～88歲);病毒性感染對照組為21例慢性乙型病毒性肝炎患者，其中男性16例，女性5例，中位年齡44歲(20～66歲);正常對照組是19例來自本院體檢中心的健康個(gè)體，其中男性10例，女性9例，中位年齡60歲(32～76歲)。

2．血液學(xué)檢測:所有病例于清晨抽取空腹肘靜脈血3ml，分離血清，并保存于－80℃冰箱，待標(biāo)本收齊后一次性檢測IL－6、IL－8和 TNF－ α，均采用 ELISA 法，單位為 pg/ml，試劑購自上海朗道生物公司，測定儀器為美國Bio－Rad公司生產(chǎn)的680型酶標(biāo)儀。

3．統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS 16．0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以(x±s)表示，因測定值不呈正態(tài)分布，全部轉(zhuǎn)換為10為底的對數(shù)，然后采用單因素方差分析(one－way ANOVA)進(jìn)行均數(shù)比較，均數(shù)間兩兩比較采用最小顯著差法(LSD)，以p＜0．05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;診斷價(jià)值通過計(jì)算ROC曲線下面積(AUG)來評價(jià)，以約登指數(shù)(靈敏度+特異度－1)最大值對應(yīng)的切點(diǎn)值來確定陽性臨界值。

結(jié) 果

1．各組IL－6、IL－8和TNF－α的測定值及組間比較:見表1，IL－6、IL－8和TNF－α在各組均存在顯著差異(p＜0．01)，其中IL－6和IL－8由高到低均依次為:膽道感染組=細(xì)菌性肺炎組＞病毒性肝炎組＞正常對照組，TNF－α則依次為:細(xì)菌性肺炎組＞膽道感染組＞病毒性肝炎組＞正常對照組。

表1 各組IL－6、IL－8和TNF－α的均值及組間兩兩比較

2．IL－6、IL－8和TNF－α在診斷細(xì)菌性感染中的價(jià)值比較:將膽道感染組和細(xì)菌性肺炎組分為細(xì)菌性感染組，病毒性肝炎組和正常對照組分為非細(xì)菌性感染組，然后繪制ROC曲線，見圖1。其中TNF－α的曲線下面積最大，為 0．984(95%CI:0．953～1.015)，其次是 IL －8，為 0．952(95%CI:0．915 ～0.989)，IL －6最低，為 0．918(95%CI:0．866 ～0.971)。IL－6的約登指數(shù)等于0．708時(shí)值最大，即測定值＞17．4 pg/ml時(shí)診斷細(xì)菌性感染的敏感度為93．3%，特異度為77．5%;IL－8的約登指數(shù)等于0.768時(shí)值最大，即測定值＞102．1pg/ml時(shí)診斷細(xì)菌性感染的敏感度為89．3%，特異度為87．5%;TNF－α的約登指數(shù)等于0．975時(shí)值最大，即測定值 ＞104.5pg/ml時(shí)診斷細(xì)菌性感染的敏感度為100．0%，特異度為97．5%，見表2。

圖1 IL－6、IL－8和TNF－α診斷細(xì)菌性感染的ROC曲線

表2 IL－6、IL－8和TNF－α取約登指數(shù)最大值時(shí)的敏感度、特異度及診斷臨界值

討 論

IL－6、IL－8和TNF－α都屬于促炎細(xì)胞因子，主要由活化的單核－吞噬細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生［4］。本研究結(jié)果顯示，IL－6、IL－8和 TNF－α 在膽道感染組和細(xì)菌性肺炎組均比病毒性肝炎組和正常對照組顯著增高(p＜0．01)，表明膽道感染不僅與細(xì)菌性肺炎等其他細(xì)菌性感染一樣，IL－6、IL－8和TNF－α都是增高的，而且還比病毒性感染(至少比病毒性肝炎)高［5］。然而，IL －6和IL －8在膽道感染組和細(xì)菌性肺炎組間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0．05)，提示二者在鑒別感染部位中作用不大，符合非特異性炎癥標(biāo)志物的特點(diǎn)。不過，TNF在細(xì)菌性肺炎組較膽道感染組高(p＜0．05)，盡管增高幅度不大(表1)，具體原因有待進(jìn)一步闡明，可能與肺部感染一般范圍較大、較易擴(kuò)散有關(guān)。

既然IL－6、IL－8和TNF－α在細(xì)菌性感染組(膽道感染組和細(xì)菌性肺炎組)要比非細(xì)菌性感染組(病毒性肝炎組和正常對照組)顯著增高，本研究進(jìn)一步比較了三者的特異度和敏感度。ROC曲線顯示三者都在參考線的左上區(qū)域，其中線下面積由大到小依次為TNF－α、IL－8和IL－6，且當(dāng)約登指數(shù)取最大值時(shí)，特異度和敏感度最好的是TNF－α、其次是IL－8和IL－6，表明在鑒別細(xì)菌性感染和非細(xì)菌性感染中TNF－α的價(jià)值最高，IL－8和IL－6次之。因?yàn)槟懙栏腥局?0%以上的患者膽汁細(xì)菌培養(yǎng)呈陰性(不能排除有細(xì)菌感染)而無法做藥敏試驗(yàn)，因此，只能根據(jù)經(jīng)驗(yàn)嘗試性使用抗生素。此時(shí)，迫切需要一個(gè)特異、敏感、且能快速反映感染嚴(yán)重程度的監(jiān)測指標(biāo)。本研究顯示，IL－8、IL－6和TNF－α都符合這一要求，其中以TNF－α為最佳，但由于本次研究病例數(shù)較少，還需大樣本量的研究來進(jìn)一步確認(rèn)［6］。

1 陳規(guī)劃，易述紅．重癥膽道感染［J］．腹部外科，2009，22(1):8－9

2 溫先勇，鄭燕，向成玉，等．醫(yī)院感染診治中急性時(shí)相蛋白的變化研究［J］．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2006，16(12):1343－1346

3 Scheller J，Chalaris A，Schmidt－Arras D，et al．The pro－ and anti－inflammatory properties of the cytokine interleukin－6［J］．Biochim Biophys Acta，2011，1813(5):878 －888

4 董旭，劉素云，畢建成，等．氟伐他汀對高血壓病患者血壓與C反應(yīng)蛋白和白介素6的影響［J］．中華心血管病雜志，2008，36(4):344－345

5 馬爽，滕琳，尹辛大，等．可溶性E－選擇素和白介素8與重癥肺炎嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究［J］．中華急診醫(yī)學(xué)雜志，2009，18(11):1203－1206

6 Friebe A，Volk HD．Stability of tumor necrosis factor alpha，interleukin 6，and interleukin 8 in blood samples of patients with systemic immune activation［J］．Arch Pathol Lab Med，2008，132(11):1802 －1806