超臨界CO2萃取鳳眼草揮發(fā)油化學(xué)成分

劉宇，梁劍平，華蘭英，尚若峰，王學(xué)紅，呂嘉文，李冰

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所，甘肅省新獸藥工程重點實驗室，甘肅 蘭州 730050）

鳳眼草為苦木科臭椿屬臭椿 [Ailanthus altissima（Mill.）Swingle]的果實，是我國民間常用的中草藥[1]。鳳眼草色白而泛黃，味苦性寒，具有清熱、止血、利濕、殺蟲、抗菌、等功效，用于治療赤白帶下、收斂止瀉、便血、崩漏、瘡毒紅腫等[2]。

我國臭椿植物資源十分豐富，但國內(nèi)外對其果實鳳眼草的研究報道較少。本實驗采用毛細(xì)管色譜-質(zhì)譜（GC－MS）聯(lián)用技術(shù)對其揮發(fā)油成分進(jìn)行分析，首次對其43種化合物進(jìn)行鑒定，并用峰面積歸一化法測定了各成分的相對含量。本文采用了超臨界CO2萃取技術(shù)從鳳眼草中提取揮發(fā)油，以求對鳳眼草的化學(xué)成分及成分的含量有一個系統(tǒng)、全面的認(rèn)識和了解，為深入研究并綜合開發(fā)鳳眼草的藥用價值和經(jīng)濟(jì)價值提供科學(xué)的依據(jù)。

1 試驗部分

1.1 材料

鳳眼草：2009年4月購于亳州市寶華藥業(yè)有限公司，并由蘭州大學(xué)藥學(xué)院馬志剛教授鑒定，植物標(biāo)本（0904023）保存于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所新獸藥開放重點實驗室。

1.2 試驗儀器及條件

超臨界 CO2萃取儀：Applied Separation lnc.，Speed SFE-2/4；氣相色譜-質(zhì)譜儀：Agilent 7890A/5975C。色譜柱：DB-225毛細(xì)管熔融石英柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；柱溫為80℃，以3℃/min的速率升至260℃，保持40 min；進(jìn)樣口溫度為260℃；載氣為He氣，流速為 0.3 mL/min；進(jìn)樣量為 0.2 μL，分流比為 50∶1。質(zhì)譜條件：離子源為EI，電子能量為70 eV，接口溫度為280℃、質(zhì)量范圍為50 amu～500 amu，溶劑延遲2.0 min。

1.3 揮發(fā)油的提取

取鳳眼草15 g，粉碎過20目篩，投入萃取釜中，對萃取釜進(jìn)行加熱，當(dāng)萃取釜溫度達(dá)到40℃，打開CO2氣瓶，調(diào)節(jié)萃取釜壓力達(dá)36 MPa，待制冷系統(tǒng)、萃取溫度和CO2流量穩(wěn)定后開始循環(huán)萃取，萃取2 h后從解析釜出料，得淡黃色油狀物，收率12.6%，揮發(fā)油用氯仿溶解稀釋，密封保存，供分析用。

2 成分鑒定

在上述色譜條件下進(jìn)樣，得到鳳眼草揮發(fā)油的總離子流圖，見圖1。

啟動HP689OMS化學(xué)工作站，檢索NIST98譜圖庫，結(jié)合有關(guān)文獻(xiàn)人工檢索確定其化學(xué)組成[3-5]，見表1。另外，通過與正烷烴化合物的保留時間比較，采用線性插人的方法計算揮發(fā)油中各成分的保留指數(shù)，進(jìn)一步確證各化合物。按峰面積歸一化法計算各化合物在揮發(fā)油中的百分含量，具體分析結(jié)果見表1。

圖1 鳳眼草揮發(fā)油的氣相色譜總離子流圖Fig.1 Total ion current chromatogram of the volatile oil from the seeds of Ailanthus altissima（Mill.） Swingle

表1 鳳眼草揮發(fā)油氣相色譜-質(zhì)譜法分析結(jié)果Table 1 Determination result of the volatile oil from the seeds of Ailanthus altissima（Mill.） Swingle by GC-MS

續(xù)表1 鳳眼草揮發(fā)油氣相色譜-質(zhì)譜法分析結(jié)果Continue table 1 Determination result of the volatile oil from the seeds of Ailanthus altissima（Mill.） Swingle by GC-MS

3 結(jié)果與討論

由圖1可知，采用了超臨界CO2萃取技術(shù)從鳳眼草中提取揮發(fā)油，通GC/MS分析，從鳳眼草揮發(fā)油中分離出83個化合物，鑒定了其中42個，其峰面積相對含量約占揮發(fā)油總量的92.91%。由表1可以看出，鳳眼草揮發(fā)油的主要組分為：鄰苯二甲酸異丁辛酯（7.05%），棕櫚酸（8.74%），（Z，Z）－9，12－十八碳二烯酸（20.47%），（Z）－9，17－十八碳二烯醛（15.14%），22，23－二氫豆甾醇（14.09%），3，5，6，7，8，8a－六氫－4－8a－二甲基－6－[1-甲乙烯基]-2（1H）萘酮（6.86%），α－香樹脂醇（2.04%），羽扇烯酮（3.53%）等。

4 結(jié)論

傳統(tǒng)的提取揮發(fā)油方法主要是水蒸氣蒸餾法、有機(jī)溶劑浸提法和壓榨法等。本文采用了超臨界CO2萃取技術(shù)，所需的操作溫度較低，避免了其中有效成分的分解與破壞，產(chǎn)品質(zhì)量好，而且提取速度快，收率也較傳統(tǒng)方法高得多。采用了超臨界CO2萃取技術(shù)從鳳眼草中提取揮發(fā)油，分析其揮發(fā)油組分和含量，為深入研究并綜合開發(fā)這一資源提供科學(xué)依據(jù)。

[1]全國中草藥匯編組.全國中草藥匯編[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，1992:711

[2]趙春超，邵建華，王金輝，等.鳳眼草的化學(xué)成分[J].中草藥，2006，37(12):1768-1771

[3]叢浦珠，蘇克曼.分析化學(xué)手冊（第九分冊質(zhì)譜分冊）[M].2版.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2000:136,149,210,251,291,863

[4]曾志，曾隴梅.甾醇及其衍生物的質(zhì)譜學(xué)規(guī)律（I）[J].質(zhì)譜學(xué)報，1994，15(2):11-16

[5]曾志，曾隴梅.甾醇及其衍生物的質(zhì)譜學(xué)規(guī)律（II）[J].質(zhì)譜學(xué)報，1996，17(3):26-29