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    牡蠣水解蛋白制備及脫腥技術(shù)研究

    2012-12-03 05:45:16許慶陵周勇強(qiáng)戰(zhàn)宇顧彩琴曾慶祝
    食品研究與開(kāi)發(fā) 2012年10期
    關(guān)鍵詞:脫腥解液拉德

    許慶陵,周勇強(qiáng),戰(zhàn)宇,顧彩琴,曾慶祝,*

    (1.廣州大學(xué)分析測(cè)試中心,廣東 廣州 510006;2.廣州大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,廣東 廣州 510006)

    牡蠣,肉味鮮美,是一種高營(yíng)養(yǎng)的水產(chǎn)品,有“海中牛奶”之稱,是我國(guó)四大養(yǎng)殖貝類之一,在廣東、廣西、福建、浙江、臺(tái)灣等沿海地區(qū)都進(jìn)行大量人工養(yǎng)殖,其大多數(shù)作為生鮮食品消費(fèi),但牡蠣出水后會(huì)很快死亡,容易被微生物污染,且不耐藏,不耐凍[1]。目前,國(guó)內(nèi)牡蠣以鮮食和制成干肉制品或罐頭制品為主,少量加工成蠔油或其它調(diào)味品。隨著牡蠣養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展,牡蠣已出現(xiàn)供過(guò)于求和價(jià)格下跌的趨勢(shì),開(kāi)發(fā)牡蠣加工利用的新途徑對(duì)促進(jìn)牡蠣養(yǎng)殖業(yè)進(jìn)一步發(fā)展具有十分重要意義[2]。

    目前,針對(duì)牡蠣的研究開(kāi)發(fā)熱點(diǎn)有,從牡蠣中提取抗氧化活性肽和抗腫瘤活性肽[3-4]、采用胰蛋白酶、胃蛋白酶或木瓜蛋白酶制備牡蠣水解蛋白,但水解效果不甚理想[5],采用Alcalase堿性蛋白酶制備牡蠣水解蛋白的研究報(bào)道相對(duì)較少。剛捕獲的魚(yú)貝類腥臭味輕微,但隨著鮮度下降,腥臭味逐漸增強(qiáng)。牡蠣肉經(jīng)過(guò)酶解制得水解蛋白之后,呈現(xiàn)出牡蠣特殊香氣和味道,主要呈味成分是酶解產(chǎn)生的氨基酸、小分子肽類,以及醛、酮、酸和酚類等[6]。同時(shí),水解液中也有一定腥味,這種腥味給牡蠣水解蛋白的風(fēng)味帶來(lái)了負(fù)面影響,所以有必要對(duì)牡蠣水解蛋白進(jìn)行脫腥,使其具有更加純正的牡蠣風(fēng)味,其中,美拉德反應(yīng)是一種脫腥的可選方法[7-8]。針對(duì)牡蠣酶解蛋白液脫腥技術(shù)的研究起步較晚,大多是在2009年才開(kāi)始研究[7],有關(guān)研究報(bào)道也不多。為此,本實(shí)驗(yàn)采用Alcalase堿性蛋白酶道也不多。為此,本實(shí)驗(yàn)采用Alcalase堿性蛋白酶對(duì)牡蠣進(jìn)行水解制備牡蠣水解蛋白,通過(guò)正交試驗(yàn)優(yōu)化其水解條件,并對(duì)牡蠣水解蛋白液的腥味脫去技術(shù)進(jìn)行研究和優(yōu)化,豐富和完善牡蠣水解蛋白的制備技術(shù),為牡蠣肉的深加工和綜合利用提供依據(jù),提高牡蠣的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)價(jià)值。

    1 材料和方法

    1.1 材料及試劑

    新鮮牡蠣:購(gòu)自超市;Alcalase堿性蛋白酶:丹麥諾維信公司;食品級(jí)活性炭:市售;葡萄糖:市售;甲醛、鹽酸、氫氧化鈉等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

    1.2 儀器與設(shè)備

    數(shù)顯恒溫水浴振蕩器THZ-82:江蘇省金壇市宏華儀器廠;DHS-20型精密酸度計(jì):上海雷磁儀器廠;紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)UV-2100:北京瑞利儀器有限公司;自動(dòng)凱氏定氮儀S5:德國(guó)Labor-Technik;六聯(lián)同步電動(dòng)攪拌機(jī)JJ-6:江蘇金壇市華歐儀器廠;冷凍離心機(jī)J-6M:美國(guó)BECKMAN;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀Hei-VAP,德國(guó)Heidolph;微型實(shí)驗(yàn)室噴霧干燥儀YC-015:上海雅程儀器設(shè)備有限公司。

    1.3 方法

    1.3.1 牡蠣水解蛋白制備

    原料解凍→搗碎→按適當(dāng)料液比加水→牡蠣原料漿液→調(diào)節(jié)酸堿度→加入蛋白酶→酶解→滅酶活→離心分離→真空濃縮。

    1.3.2 測(cè)定方法

    水解度(DH%)測(cè)定:甲醛滴定法[10]。

    1.3.3 脫腥工藝

    取一定量牡蠣水解蛋白液→加入脫腥劑(活性炭/葡萄糖)→恒溫脫腥→離心(4000 r/min,10 min)→過(guò)濾→上清液→感官評(píng)定。

    1.3.4 感官評(píng)定方法

    腥味感官評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1及表2。

    表1 活性炭脫腥評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Sensory evaluation tandards of deodorization by activecarbon

    表2 美拉德反應(yīng)產(chǎn)物風(fēng)味評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 2 Sensory evaluation tandards of flavor by Mailard reaction

    2 結(jié)果與討論

    2.1 牡蠣水解蛋白制備工藝條件

    2.1.1 酶添加量的確定

    取5份牡蠣原料漿液,分別加入酶活量500×16.67 ×10-6、600 ×16.67 ×10-6、700 ×16.67 ×10-6、800 ×16.67×10-6、900 ×16.67×10-6kat/L 的 Alcalase堿性蛋白酶,于60℃水浴鍋中恒溫水解2.5 h(其間保持pH恒定),然后100℃水浴滅酶10 min,再經(jīng)5000 r/min離心20 min,取上清液測(cè)水解度,結(jié)果見(jiàn)圖1。

    圖1 酶加量對(duì)水解度的影響Fig.1 Effect of additive mount of enzyme on the DH

    圖1表明,酶加量對(duì)牡蠣水解度的影響較大,隨著酶加量從 500×16.67×10-6kat/L~900×16.67×10-6kat/L的增加,牡蠣水解度由35.9%到41.28%增大。當(dāng)酶加量增至 800×16.67×10-6kat/L(即:13.34 mkat/L)時(shí),其水解度的增長(zhǎng)趨勢(shì)平緩。從理論上不難解釋,隨著酶量的增加,酶與底物蛋白質(zhì)的接觸幾率增加,酶對(duì)底物蛋白質(zhì)的解裂作用增強(qiáng),因此,水解度也逐漸增加?;诔杀疽蛩氐目紤],選用13.34 mkat/L為適宜酶加量。

    2.1.2 水解時(shí)間的確定

    取5份牡蠣原料漿液,分別加入13.34 mkat/L Alcalase堿性蛋白酶,在60℃下分別恒溫水解1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h(其間保持 pH 恒 1.5、2.0、2.5、3.0 h(其間保持pH恒定),然后100℃水浴滅酶10 min,再經(jīng)5000 r/min離心20 min,取上清液測(cè)水解度,結(jié)果見(jiàn)圖2。

    圖2 水解時(shí)間對(duì)水解度的影響Fig.2 Effect ofhydrolysis time on the DH

    圖2表明,隨著水解時(shí)間延長(zhǎng),水解度逐漸增加,當(dāng)水解時(shí)間達(dá)到2.5 h時(shí),水解度達(dá)到最高,隨后水解度基本保持恒定,這說(shuō)明酶解時(shí)間達(dá)2.5 h時(shí),底物蛋白質(zhì)已基本被水解,再延長(zhǎng)酶解時(shí)間,水解度也不再增加?;诮?jīng)濟(jì)效率因素,酶解時(shí)間初為2.5 h。

    2.1.3 水解溫度的確定

    取5份牡蠣原料漿液,分別加入13.34 mkat/L Alcalase堿性蛋白酶,分別在 40、50、60、70、80 ℃下恒溫水解2.5h(其間保持pH恒定),100℃水浴滅酶10min,再經(jīng)5000 r/min離心20 min,取上清液測(cè)水解度,結(jié)果見(jiàn)圖3。

    圖3 溫度對(duì)水解度的影響Fig.3 Effect ofhydrolysis temperature on the DH

    圖3表明,在40℃~60℃時(shí),隨著溫度的升高,水解度增加,60℃時(shí)水解度達(dá)到最高,超過(guò)60℃時(shí)水解度隨溫度的升高反而下降,這可能是由于隨著溫度的升高,Alcalase堿性蛋白酶的活性有所降低,因此水解效率降低。因此,酶解溫度初定60℃為宜。

    2.1.4 酶解pH的確定

    取5份牡蠣原料漿液,分別用0.05 mol/L NaOH溶液或 HCl溶液調(diào) pH 為 7.5、8.0、8.5、9.0、9.5,分別加入13.34 mkat/L的Alcalase堿性蛋白酶,在60℃下酶解,其間分別保持各自恒定的pH,恒溫水解2.5 h,然后100℃水浴滅酶10 min,再5000 r/min下離心20 min,取上清液測(cè)水解度,結(jié)果見(jiàn)圖4??芍?,pH對(duì)水解度的影響較大,當(dāng)pH為8.0時(shí)水解度達(dá)最大,繼續(xù)增大pH會(huì)影響酶活力,導(dǎo)致水解度反而下降。所以,酶解pH初選8.0。

    2.1.5 酶解工藝條件優(yōu)化

    圖2 pH對(duì)水解度的影響Fig.2 Effect pH on the DH

    為優(yōu)化牡蠣酶解工藝條件,在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,采用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案,選擇酶加量、溫度、時(shí)間和pH 4個(gè)因素,每個(gè)元素選3個(gè)水平,以水解度為指標(biāo)進(jìn)行酶解工藝條件優(yōu)化。因素及水平安排見(jiàn)表3,正交試驗(yàn)方案及結(jié)果見(jiàn)表4。

    表3 正交試驗(yàn)L9(34)因素水平表Table 3 Factor and levels of L9(34)

    表4 正交試驗(yàn)方案及結(jié)果Table 4 Orthogonal test results of hydrolysis

    由正交試驗(yàn)結(jié)果表4可知,影響水解度的主次因素為A>B>D>C,即酶加量>水解時(shí)間>pH>溫度。再對(duì)獲得的兩個(gè)實(shí)驗(yàn)優(yōu)方案為A2B2C1D2和A2B3C1D2進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),A2B2C1D2方案的水解度為最高39.25%。因此,確定酶解的最優(yōu)方案為A2B3C1D2,即:酶加量13.34 mkat/L,水解時(shí)間 2.5 h,pH8.0,溫度 65℃。

    2.2 水解蛋白脫腥實(shí)驗(yàn)

    2.2.1 活性炭脫腥

    2.2.1.1 活性炭使用量的確定

    取10 mL水解蛋白液5份,按1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%比例分別加入活性炭(試驗(yàn)組號(hào)依次為A1、A2、A3、A4、A5),充分?jǐn)嚢?,?45 ℃恒溫水浴中保持80 min,再經(jīng)4000 r/min離心10 min,上清液經(jīng)過(guò)濾后按照表1的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官評(píng)分,評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表5中A1~A5所示。

    表5 活性炭使用條件對(duì)脫腥效果的影響Table 5 Effect of operation condition of active carbon on deodourization

    由表5實(shí)驗(yàn)A1~A5可知,隨著活性炭使用添加量的增加,其顏色、澄清度及脫腥效果都是越來(lái)越好。當(dāng)活性炭添加量增至2.5%時(shí),綜合得分及狀態(tài)與活性炭添加量增至3.0%時(shí)一樣,得分均為13分,此時(shí),牡蠣酶解液的顏色為淡黃色,溶液澄清,腥味很小。因此,確定活性炭添加量為2.5%較為經(jīng)濟(jì)適宜。

    2.2.1.2 脫腥時(shí)間的確定

    取10 mL水解蛋白液5份,各加入2.5%活性炭,充分?jǐn)嚢?,?5℃水浴中下分別保持20、40、60、80、100 min(試驗(yàn)組號(hào)依次為 B1、B2、B3、B4、B5),再經(jīng)4000 r/min離心10 min,上清液經(jīng)過(guò)濾后按照表1的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官評(píng)分,評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表5中B1~B5所示,可知,隨著脫腥時(shí)間的增加,牡蠣酶解液的感官評(píng)分越來(lái)越高,說(shuō)明其脫腥效果越來(lái)越好。脫腥時(shí)間的達(dá)80 min時(shí),脫腥效果已達(dá)到最佳。因此,確定80 min為宜,此條件下,牡蠣酶解液的顏色為淡黃色,溶液澄清透明,無(wú)腥味。

    2.2.1.3 最適脫腥溫度的確定

    取水解液5份,每份10 mL,加入2.5%活性炭,充分?jǐn)嚢?,分別置于 25、35、45、55、65 ℃(試驗(yàn)組號(hào)依次為 C1、C2、C3、C4、C5)水浴中保持 80 min,再經(jīng)4000 r/min離心10 min,上清液經(jīng)過(guò)濾后按照表1的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官評(píng)分,評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表5中C1~C5所示,可知,從25℃到45℃,感官評(píng)分隨水溫遞增,說(shuō)明脫腥效果漸好。當(dāng)脫腥溫度在55℃以上時(shí),酶解液的顏色反而加深,澄清和腥味幾乎沒(méi)有變化,因此,確定適宜脫腥溫度為45℃。

    2.2.2 美拉德反應(yīng)脫腥

    2.2.2.1 葡萄糖添加量的確定

    取10mL水解液5份,分別加入1.0%、2.0%、3.0%、4.0%、5.0%葡萄糖(試驗(yàn)組號(hào)依次為 A1、A2、A3、A4、A5),攪拌至充分混勻,在100℃水浴中保持30 min,再經(jīng)4000 r/min離心10 min,上清液經(jīng)過(guò)濾后按照表2的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官評(píng)分,評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表6中A1~A5所示。

    表6 美拉德反應(yīng)條件對(duì)脫腥效果的影響Table 6 Effect of condition of Maillard reaction on deodourization

    由表6可知,在添加量為1.0%~3.0%時(shí),酶解液的感官風(fēng)味總分隨添加量增加,說(shuō)明其感官風(fēng)味越來(lái)越好;而當(dāng)葡萄糖添加量超過(guò)3.0%以后,酶解液的香味濃郁,沒(méi)有腥味,苦味也幾乎沒(méi)有,但是,酶解液特有的風(fēng)味有所減弱,而且鮮味受到一定抑制。因此,美拉德反應(yīng)所用還原糖(葡萄糖)的適宜添加量為3.0%。

    2.2.2.2 美拉德脫腥時(shí)間的確定

    取10 mL水解液5份,加入3.0%葡萄糖,充分?jǐn)嚢?,?100 ℃水浴中分別保持 10、20、30、40、50 min(試驗(yàn)組號(hào)依次為 B1、B2、B3、B4、B5),再經(jīng) 4000 r/min 離心10 min,上清液經(jīng)過(guò)濾后按照表2的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官評(píng)分,評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表6中B1-B5所示,可知,當(dāng)反應(yīng)時(shí)間達(dá)到30 min時(shí),其感官風(fēng)味評(píng)定分?jǐn)?shù)升至最高,感覺(jué)無(wú)腥味及無(wú)苦味;當(dāng)反應(yīng)時(shí)間在40 min以上時(shí),其鮮味反而因時(shí)間的延長(zhǎng)而受到抑制。因此,確定美拉德反應(yīng)還原糖(葡萄糖)的適宜反應(yīng)時(shí)間為30 min,此時(shí),酶解液具有糖香味,無(wú)腥味,鮮味濃郁,無(wú)苦味。

    2.2.2.3 美拉德反應(yīng)溫度的確定

    取10 mL水解液5份,加入3.0%葡萄糖,充分?jǐn)嚢?,分別放置在 60、70、80、90、100℃(試驗(yàn)組號(hào)依次為 C1、C2、C3、C4、C5)水浴中恒溫保持 30 min,再經(jīng)4000 r/min離心10 min,上清液經(jīng)過(guò)濾后按照表2的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行感官評(píng)分,評(píng)分結(jié)果見(jiàn)表6中C1~C5所示,可知,酶解液的感官風(fēng)味評(píng)定總分隨反應(yīng)溫度升高而遞增,說(shuō)明溫度對(duì)其風(fēng)味有影響。隨著溫度的升高,美拉德反應(yīng)程度越深,產(chǎn)生的香味也越突出,在溫度為100℃下的美拉德反應(yīng)所產(chǎn)生的感官風(fēng)味達(dá)到最佳。因此,確定美拉德反應(yīng)的適宜溫度為100℃,此時(shí),酶解液具有濃郁香味,無(wú)腥味,鮮味濃郁,且無(wú)苦味。

    3 結(jié)論

    1)采用Alcalase堿性蛋白酶制備牡蠣水解蛋白的最適工藝條件為:酶用量13.34 mkat/L,水解溫度65℃,pH 8.0,水解時(shí)間2.5 h,在此條件下牡蠣蛋白質(zhì)的水解度高達(dá)40.38%。

    2)通過(guò)活性炭及美拉德反應(yīng)對(duì)牡蠣水解蛋白液脫腥技術(shù)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn):活性炭吸附及美拉德反應(yīng)兩種方法對(duì)酶解液的脫腥均能產(chǎn)生一定的效果;活性炭脫腥的最適條件是活性炭使用量2.5%、脫腥時(shí)間80 min、脫腥溫度45℃;美拉德反應(yīng)脫腥的最適條件是葡萄糖添加量3.0%、脫腥時(shí)間30 min、脫腥溫度100℃;綜合比較兩者的脫腥效果,美拉德反應(yīng)為較好的脫腥方法。

    [1]陶晶,楊瑞金,張文斌,等.即食牡蠣軟罐頭的研制[J].食品研究與開(kāi)發(fā),2008,29(4):94-98

    [2]吳文龍,楊志娟.雙酶法水解牡蠣肉工藝條件的研究[J].食品科技,2005(11):32-34

    [3]王春波,蘭曉明,王洪江,等.牡蠣軟體中抗菌蛋白的制備及活性研究[J].海洋湖沼,2010,41(1):33-38

    [4]陳艷輝,李超柱,黎丹戎,等.動(dòng)物蛋白酶解制備廣西產(chǎn)牡蠣肉抗腫瘤活性肽的實(shí)驗(yàn)研究[J].食品工業(yè)科技,2010,31(8):167-169

    [5]譚雯文,周延華,梁海秋,等.牡蠣蛋白的純化及酶解條件的研究[J].現(xiàn)代食品科技,2006,22(2):79-82

    [6]汪何雅,楊瑞金,王璋.牡蠣的營(yíng)養(yǎng)成分及蛋白質(zhì)的酶法水解[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2003,27(2):163-168

    [7]張潔,董士遠(yuǎn),郭曉偉.美拉德反應(yīng)用于牡蠣酶解液脫腥的研究[J].食品工業(yè)科技,2009,30(11):215-217

    [8]葉盛權(quán),吳暉,賴富饒,等.牡蠣酶解過(guò)程的成分變化及脫腥初步研究[J].現(xiàn)代食品科技,2009,25(3):262-265

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