慢性乙性肝炎患者血清HBV DNA與e抗原含量的關系

許世琴 田鵬飛

慢性乙性肝炎是我國常見病多發(fā)病，乙型肝炎病毒(HBV)標志物非常重要，指導臨床診治，血清HBeAg和HBV DNA含量反映了乙肝的復制狀態(tài)，是選擇抗病毒治療及評價藥物療效最重要的指標［1，2］。為了進一步了解慢性乙性肝炎患者血清HBV DNA與e抗原含量的關系，對此進行了研究，現(xiàn)匯報如下:

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年4月至2011年4月診治的慢性乙性肝炎198例，其中男108例，女90例;年齡21～68歲，平均32.6歲。病程3～9年，平均病程4.2年;所有病例均符合1995年5月北京第5次全國傳染病寄生蟲病學術會議制定的病毒性肝炎防治方案診斷標準。

1.2 儀器及檢查方法 HBeAg定量檢測采用上海新波生物技術有限公司提供Anytest 2000時間分辨熒光免疫分析儀，試劑由安圖綠科提供時間分辨熒光免疫分析法乙肝兩對半試劑。檢測嚴格按試劑盒要求操作。奧地利產(chǎn)的BC2010酶標儀，洗板機是北京優(yōu)利特。

HBV DNA定量檢測使用DA-7600型熒光定量擴增檢測儀，采用中山大學達安基因股份有限公司生產(chǎn)的信號引物能量轉(zhuǎn)移熒光標記法(AmpliSensor)HBV DNA試劑盒進行定量聚合酶鏈反應(PCR)檢測，靈敏度為5.0×102copies/ml，陽性取≥1×103copies/ml為陽性，陰性時取實測拷貝值，低于靈敏度以下作零拷貝處理。

1.3 統(tǒng)計學方法 使用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析，計量資料用均數(shù)±標準差(±s)表示，采用t檢驗處理數(shù)據(jù)。

2 結果

本組198例慢性乙性肝炎患者檢測中血清HBeAg陰性68例，其中41例HBV DNA檢測為陽性。對本組病例進行HBV DNA定量并與HBeAg定量、HBsAg定量進行觀察。具體見表1。

表1 HBV DNA定量并與HBeAg定量、HBsAg定量觀察(±s)

表1 HBV DNA定量并與HBeAg定量、HBsAg定量觀察(±s)

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3 討論

乙型肝炎病毒(HBV)標志物的檢測多采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，該方法快速簡便，試劑穩(wěn)定期長，測試成本低，但只能定性檢測，不能反映抗原抗體含量的變化，敏感度低，不能夠全面反映疾病變化［3］。時間分辨熒光免疫分析(TRFIA)是以鑭系元素銪(Eu)等作為熒光標記物，具有測量靈敏度高，示蹤物穩(wěn)定，定量分析量程寬，無放射污染和應用范圍廣等優(yōu)點。血清HBV DNA以被廣泛應用，被認為是評估HBV復制水平的金指標［4］。

HBeAg被公認為乙肝病毒復制及傳染性的標志，HBeAg是HBV核心區(qū)基因的一部分，在HBV DNA復制過程中，由前C基因與C基因一起產(chǎn)生一個P25前體多肽鏈，在經(jīng)轉(zhuǎn)膜作用及自身消化后剪去頭尾兩段，最終形成HBeAg。由于產(chǎn)生HBeAg的前體多肽鏈P25來自HBV復制過程中前基因RNA，因此外周血中HBeAg是HBV體內(nèi)復制過程中產(chǎn)生的副產(chǎn)物。由此可見，乙肝患者血清中存在HBeAg是病毒復制活躍的標志，通過本組定量檢測HBV DNA及HBVM，發(fā)現(xiàn)隨HBV DNA載量增加，其各組HBeAg值也增加，HBeAg值與HBV DNA定量間有一定的相關性。

通過本組病例觀察部分HBeA g陰性病例HBV DNA檢測陽性。由于HBV DNA復制，與HBV DNA載量水平不一定平行。HBeAg陰性的患者仍有半數(shù)以上可檢出HBV DNA，說明HBeAg與HBV DNA的變化并不一致，因此不能僅以ELISA法測定血清HBeAg陰性就確定HBV在體內(nèi)無復制現(xiàn)象，而要以敏感性較高的熒光定量PCR法檢測HBV DNA載量水平，才能更確切地判斷HBV復制狀況。

血清HBeAg陰性而抗HBe陽性的患者有高滴度的HBV DNA。個別HBeAg陰性或e系統(tǒng)雙陽的患者其HBV DNA定量水平高于HBeAg陽性組均值，呈高水平復制，可能與病毒變異有關［5］。

［1］王功遂，王曼曼，明朗，等.HBeAg定量在慢性乙型肝炎診斷和治療中的價值.中華傳染病雜志，2004，22(4):255-258.

［2］王添章，張宜俊，劉樹人，等.慢性HBV感染者血清HBV DNA與HBeAg量的關系及臨床意義.檢驗醫(yī)學，2004，19(1):71-72.

［3］袁漢堯，呂世靜，黃胺，等.乙肝病毒標志物時間分辨免疫測定與放射免疫測定的分析比較.數(shù)理醫(yī)藥學雜志，2003，16(5):456-458.

［4］周小平.乙肝病毒基因定量分析的臨床意義及應用價值.中西醫(yī)結合雜志，2003，13(5):311-313.

［5］李君，陳娟，臧桂珍，等.慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA與HBeAg、HBeAb含量的關系.東南大學學報，2004，23(4):250-252.