精子形態(tài)與體外受精妊娠結(jié)局的關(guān)系①

陳鵬勛 康運(yùn)凱 姚紅霞 李紅娟 楊國(guó)強(qiáng)

(鄭州人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 鄭州 450000)

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展、環(huán)境污染加劇、生活和工作壓力增大,育齡夫婦中不孕不育的發(fā)病率逐年增加,其全球發(fā)病率約為10%～15%。不育不孕的夫婦往往需要臨床治療來建立妊娠,但常規(guī)的手術(shù)、藥物或激素治療對(duì)部分患者的療效不明顯。近年來,輔助生殖技術(shù)在治療不育不孕癥方面發(fā)展迅速,其中體外受精胚胎移植技術(shù)(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)的治療效率高,但在受精過程中有20%～30%的患者會(huì)出現(xiàn)受精率低下(受精率<30%)或不受精[1],影響IVF-ET受精結(jié)局。目前,仍沒有一項(xiàng)檢查可以準(zhǔn)確預(yù)測(cè)IVF受精結(jié)局,精子形態(tài)學(xué)分析與IVF受精結(jié)局的關(guān)系已有少量文獻(xiàn)報(bào)道[2],但仍有爭(zhēng)議。本文通過分析正常形態(tài)精子比率與IVF受精率的關(guān)系,來探討精子形態(tài)與IVF妊娠結(jié)局的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年1月至2010年10月來我院檢驗(yàn)科做精液分析檢查的IVF助孕的42例新鮮移植周期。女方年齡25～34歲,平均(30.4±1.5)歲,男方年齡26～35歲,平均(31.0±1.4)歲。不孕原因包括盆腔輸卵管因素、男性因素、不明原因不孕以及多次人工授精不孕;男方取卵日精液正?；蜉p度少弱精,排除有染色體的異常、先天性或遺傳性疾病的患者。

1.2 方法

1.2.1 精液的采集和分析 禁欲3～7d,手淫法采集精液,置于干凈的取精杯中,在37℃恒溫箱中靜置,完全液化后取液化精液0.5mL,加入生理鹽水1mL,5000r/min、3min離心2次去除精漿。用生理鹽水調(diào)整精子密度至(40～60)×106/mL,取20uL于清潔的載玻片上,均勻涂片后待其自然干燥,改良巴氏染色方法進(jìn)行染色,油鏡下計(jì)數(shù)200個(gè)或以上精子的形態(tài)。精液常規(guī)分析參數(shù)根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的標(biāo)準(zhǔn)[3]判定,按WHO編寫的精液分析手冊(cè)規(guī)定的精子形態(tài)分析方法觀察每條精子的頭部、頸部、中部、尾部和胞漿小滴,如全部正常記為正常精子。

1.2.2 輔助生殖方法 根據(jù)患者年齡、基礎(chǔ)內(nèi)分泌和基礎(chǔ)卵泡數(shù)的不同,分別采用:(1)長(zhǎng)方案:從人促性腺激素(Gonadotropin,Gn)治療周期的前一月經(jīng)周期的黃體中期皮下注射短效GnRHa(Decapeptyl,0.1mg/支,德國(guó)Ferring公司)0.05mg/d,月經(jīng)周期d3-d5,開始肌注Gn(Gonal-F,75IU/支,瑞士Serono公司)至注射hCG日。②短方案:于月經(jīng)周期第2天開始注射短效GnRHa,0.1mg/d,第3天起加用Gn至注射hCG日。取卵日精液常規(guī)分析均使用Makler板計(jì)數(shù)并觀察活率,精液處理采用Percoll梯度離心法。

1.2.3 參數(shù)比較和分組 記錄女方年齡、男方年齡、不孕年限、不孕原因和獲卵數(shù);取卵日精液常規(guī)分析結(jié)果,精子形態(tài)分析結(jié)果和IVF的受精率。按照IVF受精率,將42例移植周期分為2組(<30%組和≥30%組),比較2組患者相關(guān)參數(shù)差異。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,數(shù)據(jù)以(±s)表示;采用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法有兩隨機(jī)樣本t檢驗(yàn)和卡方檢驗(yàn),以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

受精率<30%組和受精率≥30%組相關(guān)參數(shù)比較見表1受精率<30%組正常形態(tài)精子比率顯著低于受精率≥30%組(P<0.05),精子頭部畸形、頸部畸形和尾部畸形比率均顯著高于受精率≥30%組(P<0.05);2組在患者一般情況、取卵日精液常規(guī)分析結(jié)果方面無顯著性差異(P>0.05)。

表1 受精率＜30%組和受精率≥30%組相關(guān)參數(shù)比較(±s)

表1 受精率＜30%組和受精率≥30%組相關(guān)參數(shù)比較(±s)

參數(shù)受精率＜30%組 受精率≥30%組 t/χ2 P例數(shù) 15 27女方年齡(歲) 31.2±1.6 30.6±1.4 1.265 0.2133男方年齡(歲) 32.0±1.5 31.3±1.3 1.583 0.1213不孕年限(年) 7.0±1.0 6.6±0.8 1.419 0.1636不孕原因(輸卵管/男方/不明原因) 8/1/6 13/0/14 2.136 0.3436獲卵數(shù)(個(gè)) 13.8±1.7 13.1±1.0 1.686 0.0995精液量(mL) 2.6±0.2 2.7±0.3 1.153 0.2556精子密度(×106) 111.3±16.0 107.8±12.6 0.783 0.4384 A級(jí) 23.0±2.2 22.1±1.7 1.479 0.1471 B級(jí) 27.6±2.0 28.6±1.9 1.604 0.1165直線運(yùn)動(dòng)精子數(shù) 274263.3±78917.7 254537.9±68785.1 0.845 0.4032正常形態(tài)比率(%) 13.5±2.2 19.2±2.7 6.979 ＜0.001頭部畸形比率(%) 73.6±4.6 68.7±4.2 3.503 0.0011頸部畸形比率(%) 6.9±1.1 5.7±1.0 3.495 0.0012尾部畸形比率(%) 7.5±1.7 5.8±1.3 3.758 0.0005

3 討論

精液常規(guī)分析是臨床上評(píng)價(jià)男性生育能力的主要檢查項(xiàng)目,但精液常規(guī)分析受各種因素的影響,變化較大。目前,尚無一種可以確切評(píng)價(jià)男性生育能力的方法,臨床上往往采用一組精液檢測(cè)結(jié)果綜合分析而作出判斷。精子形態(tài)學(xué)分析是近年來才在我國(guó)逐漸被重視的用于評(píng)價(jià)男性生育力的檢測(cè)指標(biāo)之一,但精子形態(tài)在預(yù)測(cè)IVF妊娠結(jié)局中所起的作用尚存爭(zhēng)議。

Macleod等于1951年首先提出了對(duì)精子形態(tài)的分類,此后較多的研究開始關(guān)注精子形態(tài)與受精能力的關(guān)系,形態(tài)異?？墒咕訂适芫芰?dǎo)致不育。王瑞雪[4]等研究顯示,精子形態(tài)與其功能密切相關(guān),任何精子形態(tài)上的缺陷都將導(dǎo)致其功能下降,影響男性生育力。Guzick等[5]報(bào)道稱,精子頭部缺陷,精子運(yùn)動(dòng)速度慢,不能到達(dá)輸卵管,無法與卵子結(jié)合,位于精子頭部的頂體異?？墒咕訂适芫芰?導(dǎo)致不育。高洋等[6]的研究結(jié)果顯示,精子形態(tài)與IVF受精率呈顯著正相關(guān)性,正常形態(tài)≥12%和正常形態(tài)<12%組問IVF受精率顯著性差異,但妊娠率和流產(chǎn)率無顯著性差異。羅開玲等[7]研究顯示,在常規(guī)IVF中,精子的形態(tài)對(duì)卵子的受精率有著明顯的影響,在精液精子密度≥20×106/mI,活動(dòng)率≥5%,a+b級(jí)精子≥5%;或精子密度>5×106～<20×106/mI,同時(shí)a+b級(jí)運(yùn)動(dòng)精子>20%條件下,正常形態(tài)精子≥5%,可選擇常規(guī)IVF治療;正常形態(tài)精子百分率高,卵子受精率亦較高。這些研究說明精子形態(tài)與受精率關(guān)系密切。

本研究得出與上述研究相似的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)精率<30%組正常形態(tài)精子比率顯著低于受精率≥30%組,精子頭部畸形、頸部畸形和尾部畸形比率均顯著高于受精率≥30%組;2組在患者一般情況、取卵日精液常規(guī)分析結(jié)果方面無顯著性差異。提示精子形態(tài)與IVF妊娠結(jié)局關(guān)系密切,且當(dāng)其<15%時(shí),IVF部分受精率顯著下降。

綜上所述,精液常規(guī)分析正?；蚴禽p度少弱精時(shí),正常形態(tài)精子比率與IVF的受精結(jié)局關(guān)系密切;當(dāng)精子的形態(tài)異常時(shí),易引起精子與透明帶的結(jié)合異?；虼┩府惓?導(dǎo)致IVF部分受精率顯著降低;所以正常形態(tài)精子比率<15%時(shí),可以考慮全部或大部分卵子行ICSI受精,避免卵子浪費(fèi)。

[1] 崔險(xiǎn)峰.應(yīng)用嚴(yán)格精子形態(tài)學(xué)測(cè)定法評(píng)估精子形態(tài)對(duì)體外受精率的影響[J].中華男科學(xué),2006,12(9):842～843.

[2] 李 曉 曄 ,白 曉 紅,宋 學(xué) 茹,等 .精 子形態(tài)對(duì)體外受精-胚胎移植妊娠結(jié)局的影響[J].國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志,2011,38(1):72～75.

[3] 黃茜,劉鋒,鄒彥,等.計(jì)算機(jī)輔助分析與人工計(jì)數(shù)分析精子形態(tài)結(jié)果比較[J].山東醫(yī)藥,2010,50(15):72～73.

[4] 王瑞雪,劉睿智.精子形態(tài)與精子功能關(guān)系研究進(jìn)展[J].中華男科學(xué)雜志,2007,13(4):348～351.

[5] Guzick D S,Overstreet J W,Factor-Litrak P,et a1.Sperm morphology, motility and concentration in fertile and infertile men[J]. N Engl J Med,2001,345(19):1388～1393.

[6] 高洋,劉東云,張孝東,等.原發(fā)不育精子形態(tài)對(duì)常規(guī)體外受精(IVF)結(jié)局的影響[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,35(9):1427～1429.

[7] 羅開玲,丘映,鄧志華,等.嚴(yán)格精子形態(tài)分析正常形態(tài)精子百分率對(duì)常規(guī)IVF受精率的影響研究[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,27(1):92～93.