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    CD133和CD44在前列腺癌中的表達及意義

    2012-11-27 14:17:40胡新生郭國營
    關(guān)鍵詞:前列腺癌發(fā)病率前列腺

    冀 陽,胡新生,郭國營

    (河南省新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院 泌尿外二科,河南 新鄉(xiāng) 453000)

    前列腺癌(cancer of prostate)是西方國家發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一[1]。近年來,隨著我國人民的生活習(xí)慣及環(huán)境的改變,前列腺癌在我國的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增加的趨勢,目前已位居泌尿系統(tǒng)腫瘤的第3位,僅次于膀胱癌和腎癌。因為前列腺癌早期的臨床癥狀較為隱匿,出現(xiàn)臨床癥狀時已有遠處轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致預(yù)后不良,是臨床治療的難點。因此,尋找與前列腺癌細胞增殖,轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為相關(guān)的靶基因,對于提高前列腺癌的早期和治療方法具有重要的臨床意義,為此本研究對存檔的前列癌標本進行CD133和CD44的檢測,以期為臨床研究結(jié)直腸癌的的發(fā)病及轉(zhuǎn)移提理論基礎(chǔ)。

    1 對象與方法

    1.1 研究對象

    選取2000年10月~2011年10月在我院確診為膀胱癌并進行手術(shù)的患者作為觀察組,共72例。納入標準:①經(jīng)過病理確認為前列腺癌;②術(shù)前患者均未進行激素、化療和放療等治療;③并且所有患者臨床資料包括腫瘤大小、數(shù)目、病理分級和臨床分期等均齊全。排除標準:①合并其他器官惡性腫瘤的患者;②伴有消化系統(tǒng)其他疾病的患者。并且選取33例病理證實為正常前列腺組織作為對照組。

    1.2 免疫組化染色方法

    CD133和CD44試劑均購于武漢博士德生物工程有限公司,SP試劑盒、DAB顯色劑均購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司,嚴格按照試劑盒染色操作程序進行,具體步驟:石蠟切片脫蠟至水后,在 30 mL的 3%H2O2去離子水孵育10min以消除內(nèi)源性過氧化物酶活性;抗原修復(fù)后分別滴加一抗,4℃過夜,PBS沖洗3次;滴加生物素標記的二抗工作液,37℃孵育 30min,PBS沖洗3次;滴加辣根酶標記鏈霉卵白素,37℃孵育 30 min,PBS沖洗3次;DAB顯色;自來水充分沖洗、蘇木復(fù)染、脫水透明和常規(guī)封片。用PBS代替-抗做陰性對照,操作全過程由同一病理技師完成,以避免人為誤差。

    1.3 判斷標準

    CD133和CD44結(jié)果判斷按照免疫組化染色陽性腫瘤細胞比例和染色強度進行評分,無陽性細胞為0分,<10%為1分,10%~50%為2分,≥50%為3分,無著色為0分,輕度著色為1分,中度著色為2分,重度著色為 3分,<3分為陰性(-),≥3分為陽性(+)。

    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

    所有數(shù)據(jù)均經(jīng)過專人校隊后輸入計算機,采用SPSS11.5建立數(shù)據(jù)庫,單因素檢驗采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有顯著性。

    2 結(jié)果

    2.1 兩組患者CD133和CD44表達情況比較

    CD133和CD44的在觀察組中的表達表達陽性率均明顯高于對照組,差異均有顯著性(P<0.01),詳見表1。

    2.2 CD133在不同臨床病理指標中的表達的比較

    表1 CD133和CD44在病例組與對照組中的表達 例(%)

    表2 CD133在不同臨床病理指標中的表達 例(%)

    表3 CD44在不同臨床病理指標中的表達

    CD133表達與病理分級分期,T分期,遠處轉(zhuǎn)移等指標密切相關(guān)(P<0.05),而與前列腺癌患者的年齡,腫瘤數(shù)目,組織分型無明顯的相關(guān)性(P>0.05),詳見表2。

    2.3 CD44在不同臨床病理指標中的表達的比較

    CD44表達與病理分級,T分期,遠處轉(zhuǎn)移,等指標密切相關(guān)(P<0.05),而與前類型癌患者的年齡,腫瘤數(shù)目,組織分型無明顯的相關(guān)性(P>0.05),詳見表3。

    3 討論

    前列腺癌是老年男性常見的惡性腫瘤之一,因其起病隱匿,并且臨床表現(xiàn)與前列腺增并無明顯的區(qū)別,常常被誤診為前列腺增生,直到出現(xiàn)尿路癥狀和骨痛才去就診,這時患腫瘤已發(fā)生了浸潤或轉(zhuǎn)移,預(yù)后較差。前列腺癌在西方國家癌發(fā)病率較高,2008年美國發(fā)病率和死亡率分別居男性惡性腫瘤的前兩位[2]。近年來由于我國人民生存環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)、生活方式的改變以及人口老齡化的加劇,前列腺癌患者的發(fā)病率和死亡率也呈明顯增高趨勢[3]。因此,研究前列腺癌的腫瘤學(xué)發(fā)生、發(fā)展及產(chǎn)生機制,對指導(dǎo)前列腺癌的治療有具有重要意義。

    近年來的研究顯示:腫瘤干細胞在許多惡性腫瘤組織中存在,并且在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展,復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的中發(fā)揮著重要作用,其中CD133和CD44是最常見的腫瘤干細胞特征性的表面標志物之一[4-5],研究顯示:兩種標志物在前列腺癌細胞中存在CD133和CD44的表達,其中CD133主要位于前列腺癌細胞漿和胞膜中,CD44主要表達于前列腺癌細胞膜上,其在前列腺癌組織中有較強的增殖能力、克隆形成能力、致瘤能力[6-7],但CD133和CD44與前列腺癌病理分級,臨床分期,腫瘤轉(zhuǎn)移,組織分型等的相關(guān)性目前尚不清楚。為此本研究采用免疫組化的方法對72例前列腺癌患者組織中的CD133和CD44進行了分型,結(jié)果發(fā)現(xiàn):CD133和CD44都在各級別的前列腺癌組織中均可以見CD133和CD44陽性細胞,并且隨著前列腺癌的分級越高,病理分期越晚,CD133和CD44陽性細胞比例越高,并且有遠處骨轉(zhuǎn)移及其他器官轉(zhuǎn)移的患者前列腺癌組織中兩種標記物陽性比例也明顯高于未發(fā)生轉(zhuǎn)移的前列腺癌患者,這說明CD133和CD44與前列腺癌病理分級,臨床分期,腫瘤轉(zhuǎn)移密切相關(guān),以往對于前列腺癌的實驗室診斷主要依靠血清前列腺特異性抗原(PSA)是目前臨床診斷前列腺癌主要方法之一,但存在一定的假陽性,限制了其在前列腺癌的診斷中的應(yīng)用價值,而本研究顯示CD133和CD44在前列腺癌與良性前列腺組織中的表達差異顯著,并且與與前列腺癌的臨床分期,病理分級,癌細胞轉(zhuǎn)移密切相關(guān),使CD133和CD44可能成為診斷前列腺癌的腫瘤標記物。但是本研究也存在局限性,未對前列腺癌患者進行隨訪,無法明確CD133和CD44與前列腺癌的預(yù)后是否存在相關(guān)性。為此,本研究在以后的研究中將重點關(guān)注CD133和CD44與前列腺癌長期生存率的相關(guān)性。

    綜上所述,前列腺癌患者中CD133和CD44異常表達,二者在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用,并且與前列腺癌的病理分級、臨床分期和癌轉(zhuǎn)移具有密切相關(guān)性。

    [1]SINGH P,SRIVASTAVA A.Update in palliative management of hormone refractory?cancer of prostate[J].Indian J Urol,2007,23(1):43-50.

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    [5]CHETTY C,VANAMALA SK,GONDI CS,et al.MMP-9 induces CD44 cleavage and CD44 mediated cell migration in glioblastoma xenograft cells[J].Cell Signal,2012,24(2):549-559.

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