非小細(xì)胞肺癌患者血清肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β的檢測(cè)及臨床意義*

陳志軍，史莉瑾，趙國(guó)昌，王忠民

（1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院胸外科，河南新鄉(xiāng)， 453100；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南新鄉(xiāng)， 453100）

非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung caner，NSCLC）是臨床最常見的肺癌類型，是惡性腫瘤死亡的首要原因，已成為威脅人類生命健康的重要疾病。化療是NSCLC治療最重要的手段之一，然而由于NSCLC具有早期復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)，其療效并不理想，5年生存率在8.9%～15.0%之間[1-2]。NSCLC的轉(zhuǎn)移涉及癌基因、抑癌基因、生長(zhǎng)因子和黏附分子等，是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程。癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和侵襲是腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素，許多細(xì)胞因子在腫瘤轉(zhuǎn)移中扮演重要角色[3]。肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hepatocyte growth factor，HGF）是一種在肝、腎組織受損后促進(jìn)再生的生長(zhǎng)因子，HGF還對(duì)多種癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和侵襲也具有促進(jìn)作用[4-5]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）是目前公認(rèn)的重要的促纖維化因子，它與多種惡性腫瘤的形成、侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后有關(guān)[6]。但目前有關(guān)HGF和TGF-β在NSCLC血清中的表達(dá)及其與臨床病理資料之間的相關(guān)研究少見報(bào)道。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)NSCLC血清中HGF和TGF-β的表達(dá)與NSCLC臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系，進(jìn)一步闡明NSCLC的發(fā)病機(jī)制和為NSCLC的治療尋找新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析了2005年3月～2010年5月在我院行肺癌根治術(shù)收的73例NSCLC患者為研究對(duì)象，均有完整的臨床資料并成功完成隨訪。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均經(jīng)病理組織學(xué)和/或細(xì)胞學(xué)診斷為NSCLC，并按肺癌國(guó)際分期標(biāo)準(zhǔn)（UICC，2002）為Ⅲ～Ⅳ期，KPS評(píng)分≤60分，預(yù)計(jì)生存期≥3個(gè)月，既往未接受過(guò)抗腫瘤治療或者距離末次抗腫瘤治療時(shí)間2個(gè)月以上。73例患者中，男44例，女29例；年齡36～78歲，平均（62.6±11.2）歲；病理類型：鱗狀細(xì)胞癌58例；腺癌15例；Ⅲ期57例，Ⅳ期16例。另選同期在我院體檢的健康查體者70例為對(duì)照組，男40例，女 30例；年齡 35～75歲，平均（61.8±14.3歲）。NSCLC組與對(duì)照組在性別和年齡構(gòu)成方面差異無(wú)顯著性（P＜0.05），具可比性。

1.2 方法

分別取NSCLC患者手術(shù)前空腹12 h清晨肘靜脈血，對(duì)照組取體檢日空腹12 h清晨肘靜脈血，樣本量為3mL，3000 r/min離心15min后分取血清，置-80℃冰箱保存待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA） 方法檢定血清HGF、TGF-β水平，所用HGF和TGF-β試劑盒為深圳晶美公司產(chǎn)品，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料（均數(shù)之間的比較）用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有顯著性。所有計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 NSCLC組和對(duì)照組血清HGF和TGF-β水平比較

NSCLC組血清HGF、TGF-β均顯著高于對(duì)照組，相比較差異有顯著性（t=4.046，3.994，P ＜0.05）。結(jié)果見表1。

表1 NSCLC組和對(duì)照組血清HGF、TGF-β 水平比較 （）

表1 NSCLC組和對(duì)照組血清HGF、TGF-β 水平比較 （）

注：?與對(duì)照組比較，P＜0.05

組別n HGF/（pg/mL）TGF-β/（ng/mL）對(duì)照組 70 198.78±16.12 1.02±0.08 NSCLC組 73 373.94±30.32? 2.64±0.21?t值 4.046 3.994 P＜0.05 ＜0.05

2.2 HGF、TGF-β表達(dá)與NSCLC臨床病理指標(biāo)的關(guān)系

臨床分期Ⅳ期的血清HGF、TGF-β水平顯著高于Ⅲ期，相比較差異有顯著性（t=3.941，3.898；P＜0.05）；腫瘤低分化組血清HGF、TGF-β水平顯著高于高中分化組，相比較差異有顯著性（t=3.471，3.656；P ＜0.05）；發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移組血清 HGF 和TGF-β水平顯著高于腫瘤未轉(zhuǎn)移組，相比較差異有顯著性 （t=3.357，3.615；P ＜0.05）。血清 HGF、TGF-β水平在性別、年齡和腫瘤病理類型之間比較差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。結(jié)果見表2。

表2 HGF和TGF-β表達(dá)與NSCLC臨床病理指標(biāo)的關(guān)系 （）

表2 HGF和TGF-β表達(dá)與NSCLC臨床病理指標(biāo)的關(guān)系 （）

n HGF/（pg/mL）t P TGF-β/（ng/mL）t P性別男44 385.46±31.25 2.326 ＞0.05 2.84±0.23 2.610 ＞0.05女29 356.46±28.90 2.34±0.19年齡＜60歲 23 367.81±29.82 2.203 ＞0.05 2.57±0.21 2.234 ＞0.05≥60歲 50 376.76±30.55 2.67±0.22病理類型鱗癌 58 370.99±30.08 2.234 ＞0.05 2.60±0.21 2.308 ＞0.05腺癌 15 385.35±31.25 2.79±0.23臨床分期Ⅲ期 57 316.25±25.64 3.941 ＜0.05 2.24±0.18 3.898 ＜0.05Ⅳ期 16 579.45±46.98 4.06±0.33分化程度高中分化 52 317.81±25.77 3.471 ＜0.05 2.20±0.18 3.656 ＜0.05低分化 21 512.93±41.59 3.74±0.30腫瘤轉(zhuǎn)移有41 447.69±36.30 3.357 ＜0.05 3.21±0.26 3.615 ＜0.05無(wú)32 279.45±22.66 1.91±0.15

3 討論

手術(shù)根治性切除仍然是NSCLC主要的治療方法，但由于NSCLC易轉(zhuǎn)移，大多數(shù)患者術(shù)后死于腫瘤轉(zhuǎn)移和肺癌復(fù)發(fā)。傳統(tǒng)的肺癌TNM分期作為評(píng)估患者術(shù)后轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的指標(biāo)很難做出準(zhǔn)確的估計(jì)。近年來(lái)隨著腫瘤分子生物學(xué)水平研究的不斷發(fā)展，尋求NSCLC新的有效的預(yù)測(cè)指標(biāo)，及早對(duì)NSCLC進(jìn)行準(zhǔn)確診斷，為患者爭(zhēng)取手術(shù)時(shí)間、預(yù)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)以及病情進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

由于腫瘤的發(fā)生與發(fā)展是一個(gè)多因素、多步驟的復(fù)雜病理過(guò)程，多種細(xì)胞因子與腫瘤的發(fā)生、腫瘤細(xì)胞增殖以及腫瘤分化密切相關(guān)[7]。研究發(fā)現(xiàn)HGF及TGF均是多效因子，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中表現(xiàn)出多種生物學(xué)作用。HGF是一種在肝、腎組織受損后促進(jìn)再生的生長(zhǎng)因子，它具有刺激肝細(xì)胞再生的能力，并對(duì)上皮細(xì)胞集落有擴(kuò)散作用[8]。TGF-β是一類多肽類生長(zhǎng)因子超家族，具有多種生物學(xué)功能[9]。在多種腫瘤研究中均已證實(shí)HGF、TGF-β在腫瘤發(fā)生、發(fā)展中表現(xiàn)出多種生物學(xué)效應(yīng)，有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移的作用，有調(diào)節(jié)血管生長(zhǎng)因子的表達(dá)和促進(jìn)腫瘤血管生成的功能，有促進(jìn)細(xì)胞增殖和抗凋亡作[10-12]。此外，HGF刺激可促進(jìn)淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，促進(jìn)淋巴管形成的作用[13]。TGF-β還具有免疫抑制作用，可以使高免疫原性腫瘤細(xì)胞逃脫免疫監(jiān)視，從而形成腫瘤[14]。本研究結(jié)果顯示：NSCLC患者血清HGF和TGF-β水平顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。提示NSCLC患者血清存在HGF和TGF-β高表達(dá)。

本研究進(jìn)一步對(duì)血清HGF和TGF-β水平與NSCLC患者臨床病理指標(biāo)之間關(guān)系進(jìn)行研究，結(jié)果表明臨床分期Ⅳ期患者的血清HGF和TGF-β水平顯著高于Ⅲ期（P＜0.05），腫瘤低分化組血清HGF和TGF-β水平顯著高于高中分化組（P＜0.05）。表明HGF和TGF-β在NSCLC血清中高表達(dá)，并隨著腫瘤的惡性程度升高，其表達(dá)水平和強(qiáng)度增加。提示術(shù)前高水平的HGF和TGF-β意味著該患者可能處于腫瘤晚期，表明血清HGF和TGF-β水平作為監(jiān)測(cè)腫瘤惡性程度是一個(gè)可行的指標(biāo)。分析其原因可以在于：腫瘤進(jìn)行晚期后，肺癌細(xì)胞喪失了對(duì)HGF和TGF-β負(fù)性調(diào)控作用的反應(yīng)性，導(dǎo)致HGF和TGF-β無(wú)限增殖[15]。本研究結(jié)果顯示：發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移組血清HGF和TGF-β水平顯著高于腫瘤未轉(zhuǎn)移組，相比較差異有顯著性（P＜0.05）。表明術(shù)前高水平的HGF和TGF-β意味著該患者已發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，進(jìn)而提示研究者需要做進(jìn)一步的檢查，以避免進(jìn)行不必要的手術(shù)。本研究結(jié)果表明HGF和TGF-β水平在性別、年齡和腫瘤病理類型之間差異無(wú)顯著性（P＞0.05）。提示HGF和TGF-β水平與NSCLC患者的性別、年齡和腫瘤病理類型無(wú)顯著相關(guān)性。

綜上所述，HGF和TGF-β在NSCLC血清中呈高表達(dá)，NSCLC患者術(shù)前血清HGF和TGF-β水平與腫瘤臨床分期、腫瘤分化程度和腫瘤轉(zhuǎn)移有關(guān)，高水平的HGF和TGF-β表明NSCLC疾病的侵襲和進(jìn)展。因此，筆者認(rèn)為血清HGF和TGF-β可以作為預(yù)測(cè)NSCLC疾病的侵襲和進(jìn)展的一個(gè)新型指標(biāo)。

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