同時(shí)蒸餾萃取-氣質(zhì)聯(lián)用分析養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵械膿]發(fā)性成分*

吳容，陶寧萍，劉源，王錫昌

(上海海洋大學(xué)食品學(xué)院，上海，201306)

河豚魚(fugu)英文名pufferfish，與鰣魚、刀魚并稱“長(zhǎng)江三鮮”。長(zhǎng)期以來，我國(guó)沿海地區(qū)一直有吃河豚魚的習(xí)慣;日本人、韓國(guó)人也把河豚魚視為珍饈佳肴。近年來由于野生資源過度利用、控毒技術(shù)的日益完善、養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，養(yǎng)殖河豚魚越來越受到國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者的歡迎。人們對(duì)開放鮮河豚市場(chǎng)的呼聲也越來越高，養(yǎng)殖河豚魚巨大的市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)價(jià)值越來越突顯。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，目前國(guó)內(nèi)食用較多的品種為淡水養(yǎng)殖的暗紋東方鲀，多以熟食為主。而目前對(duì)暗紋東方鲀的研究報(bào)道主要集中在毒性及一些營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)，但對(duì)風(fēng)味物質(zhì)的研究國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道，因此探究河豚魚美味奧秘及不同養(yǎng)殖環(huán)境下風(fēng)味的差異能夠?yàn)楹与圄~的養(yǎng)殖和加工食用及改善河豚魚肉品質(zhì)提供指導(dǎo)，具有十分現(xiàn)實(shí)的意義。

近年來，關(guān)于魚肉中揮發(fā)性成分提取的方法有溶劑萃取法、固相微萃取、溶劑輔助蒸餾萃取技術(shù)和頂空吹掃捕集、同時(shí)蒸餾萃取法等，前4種前處理方法存在一定缺陷，如溶劑萃取法耗時(shí)、風(fēng)味物質(zhì)損失大;固相微萃取萃取頭對(duì)風(fēng)味物質(zhì)有較大選擇性;溶劑輔助蒸餾萃取技術(shù)裝置比較復(fù)雜，儀器的清洗比較費(fèi)時(shí);頂空吹掃捕集不利于揮發(fā)性低的化合物的捕集。而其中同時(shí)蒸餾萃取是近年來使用較多的一種提取、分離和富集試樣中揮發(fā)性、半揮發(fā)性成分的有效方法，能將水蒸氣蒸餾與溶劑萃取合二為一，從而減少了試驗(yàn)步驟，縮短了分析時(shí)間，節(jié)省了萃取溶劑［2］。而目前有關(guān)河豚魚風(fēng)味研究報(bào)道國(guó)內(nèi)僅有鄧捷春等［1］采用了頂空固相微萃取技術(shù)結(jié)合GC-MS對(duì)其揮發(fā)性成分進(jìn)行了研究。所以本實(shí)驗(yàn)分別以二氯甲烷和乙醚作溶劑，采用同時(shí)蒸餾萃取法(SDE)，提取養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵械膿]發(fā)性成分，結(jié)合感官評(píng)價(jià)和電子鼻技術(shù)對(duì)提取的揮發(fā)性成分進(jìn)行比較，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行定性和內(nèi)標(biāo)定量分析，并采用主成分分析(PCA)對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘。旨在為探究河豚魚美味奧秘及改善河豚魚肉品質(zhì)等方面提供有參考意義的基礎(chǔ)理論數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

暗紋東方鲀:采自江蘇省中洋集團(tuán)河豚魚養(yǎng)殖基地，2齡魚，平均體重350g左右(12條)，置于充水、充氧的聚乙烯袋中，運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室活殺。去眼、皮及內(nèi)臟等廢棄物后，魚肉于－18℃貯藏待用。

1.2 主要試劑

無(wú)水Na2SO4(將分析純Na2SO4在550℃下灼燒2 h，冷卻后置于干燥器內(nèi)備用);重蒸二氯甲烷、乙醚(將分析純二氯甲烷、乙醚蒸餾，去掉前30 mL以及后30 mL的餾分，取中間二氯甲烷、乙醚餾分備用，重蒸后的二氯甲烷、乙醚經(jīng)GC-MS檢測(cè)無(wú)雜質(zhì)峰出現(xiàn));氯化鈉(分析純)，以上試劑購(gòu)自上海國(guó)藥試劑公司。C7－C30飽和烷烴(1 000 μg/mL，溶于正己烷溶液中)購(gòu)自美國(guó) sigma公司，2，4，6-三甲基吡啶(純度，99%)(內(nèi)標(biāo))購(gòu)自上海安譜科學(xué)儀器有限公司。

1.3 主要儀器與裝置

同時(shí)蒸餾萃取裝置(安徽優(yōu)信玻璃儀器廠);Oldershow濃縮柱(浙江臺(tái)州玻璃儀器廠);5975B型質(zhì)譜和6890N型氣相色譜(美國(guó)Agilent公司);DHT型攪拌調(diào)溫電熱套(山東鄄城創(chuàng)新儀器有限公司);恒溫水浴鍋(上海申生科技有限公司);DL－2020節(jié)能型低溫冷卻循環(huán)泵(寧波新芝生物科技股份有限公司);FOX4000電子鼻(阿法莫斯公司)。

1.4 樣品處理

將貯于－18℃冰箱中的暗紋東方鲀?nèi)庠?℃冰箱中解凍12 h，然后將已解凍的魚置冰上用刀取其背肉。將取下的肉置玻璃皿中，蓋上玻璃皿蓋，放在蒸鍋中用電磁爐蒸20 min以保證魚肉全熟。蒸好后迅速置于冰上冷卻，再將冷卻后的魚肉絞碎備用。

1.5 同時(shí)蒸餾萃取(SDE)

取處理好的魚肉樣品150 g加250 mL去離子水，加入 50 μg 2，4，6-三甲基吡啶后，用勻漿機(jī)勻漿后置于1 000 mL圓底燒瓶中，加入沸石和磁力攪拌子，接SDE裝置的右端，用電熱套加熱至微沸;裝置的左端接100 mL圓底燒瓶，內(nèi)裝50 mL重蒸乙醚，恒溫50℃水浴加熱保持乙醚沸騰;用－5℃的乙醇作冷卻循環(huán)液，萃取3h后在萃取液中加入5 g無(wú)水硫酸鈉，放入－18℃冰箱內(nèi)冷凍過夜;過濾，濾液用Oldershow柱濃縮至1 mL時(shí)，停止加熱，靜置使柱內(nèi)的溶液滴下，總量約為3 mL，再轉(zhuǎn)入帶刻度試管中，用氮?dú)獯抵?.5 mL。由于乙醚的密度比水小，二氯甲烷的密度比水大，所以采用二氯甲烷為萃取溶劑時(shí)，SDE裝置左右兩端的搭建方式交換，將水浴溫度設(shè)為55℃。其它操作程序不變。

1.6 GC-MS分析

色譜條件:色譜柱HP-INnowax，60 m×0.25 mm×0.25 μm毛細(xì)管柱，載氣為He氣，流量1 mL/min，進(jìn)樣量為2 μL，不分流進(jìn)樣。程序升溫:柱初溫40℃，保持5 min，以4℃/min升溫至230℃，保持20 min;溶劑延遲3 min。

質(zhì)譜條件:傳輸線溫度 280℃，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，電子能量70 eV;質(zhì)量掃描范圍30～400 m/z。

1.7 定性、定量方法

定性:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理由Xcalibur軟件系統(tǒng)完成。揮發(fā)性成分通過NIST和Wiley譜庫(kù)確認(rèn)定性，僅報(bào)道匹配度大于80(最大值為100)的鑒定結(jié)果。采用相同的升溫程序，以C7～C30的飽和烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)，以保留時(shí)間計(jì)算樣品測(cè)試中的化合物Kovats保留指數(shù)(Kovats retention indices，RI)，并與文獻(xiàn)值相比較，與數(shù)據(jù)庫(kù)檢索結(jié)果共同定性。

其中:S為所測(cè)揮發(fā)物峰面積與內(nèi)標(biāo)物2，4，6-三甲基吡啶峰面積的比值。

1.8 數(shù)據(jù)分析與統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)

采用origin8.0、PAST1.79和R2.11.1軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，根據(jù)不同方法得到的色譜總離子圖中峰數(shù)量和相對(duì)含量判斷不同方法的優(yōu)劣。

其中:Rt(i)、Rt(n)、Rt(n+1)分別為待測(cè)揮發(fā)物、含n及n+1個(gè)碳原子的飽和烷烴保留時(shí)間。

定量:對(duì)于SDE提取的揮發(fā)性成分采用內(nèi)標(biāo)定量法計(jì)算相對(duì)含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵袚]發(fā)性成分主體分析

采用GC-MS對(duì)兩種溶劑的萃取液進(jìn)行檢測(cè)分析，得到相應(yīng)的質(zhì)譜總離子流圖如圖1所示。根據(jù)譜庫(kù)檢索結(jié)果和人工質(zhì)譜解析等手段，鑒定出養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵械膿]發(fā)性成分見表1。從鑒定出的揮發(fā)性成分測(cè)定結(jié)果可以看出，養(yǎng)殖暗紋東方鲀肌肉的主要揮發(fā)性成分為醛類、酮類、醇類、含氮含硫及雜環(huán)類、酯類、酸類和烷烴類。

圖1 SDE法乙醚(1)、二氯甲烷(2)提取GC-MS總離子圖疊圖

表1 養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵袚]發(fā)性成分GC-MS分析結(jié)果

續(xù)表1

續(xù)表1

2種萃取液經(jīng)GC-MS檢測(cè)得到的揮發(fā)性成分種類數(shù)和相對(duì)含量見圖2。

功能訓(xùn)練帶捆綁技術(shù)是利用有彈性的訓(xùn)練帶纏繞于患者肢體不同部位，起到改善患者運(yùn)動(dòng)控制能力的一種康復(fù)治療方法[8]。本研究的功能性肌力訓(xùn)練帶后拉法對(duì)帕金森病患者的平衡功能訓(xùn)練療效的明顯改善，BBS評(píng)分觀察組的提升幅度明顯大于常規(guī)訓(xùn)練組，觀察組提升了約7分。TUGT測(cè)試觀察組訓(xùn)練后的成績(jī)提高業(yè)明顯優(yōu)于對(duì)照組，大大縮短了PD患者的步行時(shí)間，提高了約6s。從研究結(jié)果看單腿站立平衡測(cè)試觀察組的訓(xùn)練效果也比對(duì)照組要明顯，提升了2.4s的站立時(shí)間。

圖2 養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵袚]發(fā)性成分相對(duì)含量和種類數(shù)

從圖2可以看出，從種類上看，二氯甲烷萃取液中，檢測(cè)到的揮發(fā)性成分種類數(shù)(78種)多于乙醚萃取液(57種)。乙醚萃取液中除檢測(cè)到的烷烴較二氯甲烷萃取液多1種外，其它化合物種類數(shù)都比二氯甲烷萃取液的要少。尤其是二氯甲烷萃取液中檢測(cè)出的醛類物質(zhì)比乙醚萃取液多10種，在二氯甲烷萃取液中檢測(cè)出的可能對(duì)風(fēng)味有貢獻(xiàn)的物質(zhì)，如(E)-2-庚烯醛、庚醛、(Z)-4-庚烯醛、(E)-2-壬烯醛等物質(zhì)，在乙醚萃取液中均未檢出。出現(xiàn)差異性的原因可能與2種溶劑的揮發(fā)性有關(guān)，乙醚的揮發(fā)性比二氯甲烷要強(qiáng)，在SDE提取過程中損失較多，尤其是在用oldershow和氮吹濃縮的過程中損失較多。所以檢測(cè)出的化合物種類數(shù)少于二氯甲烷。從極性方面看，乙醚是弱極性溶劑，對(duì)非極性和弱極性微量成分萃取效果好;二氯甲烷是中等極性溶劑，萃取的極性成分更多［3］。另一方面，實(shí)驗(yàn)中采用的強(qiáng)極性毛細(xì)管柱(Wax)，也利于極性物質(zhì)的檢出，因此，單從定性方面，二氯甲烷為溶劑萃取的效果較好。

從含量上看，乙醚萃取液中主要是醛類(9 179.41 ng/g)、酸類(4 729.69 ng/g)和酮類(1 408.01 ng/g);二氯甲烷萃取液中主要是醛類(3 506.4 ng/g)、酮類(2 362.58 ng/g)和含氮含硫及雜環(huán)類(811.48 ng/g)。乙醚萃取液中物質(zhì)的相對(duì)含量明顯高于二氯甲烷萃取液中的物質(zhì)。可以看出，乙醚溶劑可能對(duì)某些低含量物質(zhì)的提取有更好的效果。其中乙醚萃取液中含量較高的有十四醛(4 963.71 ng/g)、十八醛(1 171.51 ng/g)、(Z)-13-十八醛(2 007.21 ng/g)、乙酸乙酯(1 148.44 ng/g)、十六酸(4 639.90 ng/g)等;二氯甲烷萃取液中，含量較高的有十六醛(2 381.77 ng/g)、2，3-丁二酮(1 267.40 ng/g)、十六酸(545.08 ng/g)等。2種溶劑中含量最多的都是醛類，但乙醚萃取液中的醛類物質(zhì)相對(duì)含量是二氯甲烷萃取液的近3倍，可以看出，醛類物質(zhì)可能對(duì)養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)怙L(fēng)味有很大貢獻(xiàn)。因此，單從定量方面乙醚溶劑萃取效果較好。

從以上分析可以看出，將2種溶劑結(jié)合起來有利于對(duì)養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵袚]發(fā)性成分進(jìn)行綜合分析。

2.2 養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵袚]發(fā)性成分分析

2種溶劑萃取一共檢測(cè)出96種化合物，其中醛類29種、酮類11種、醇類16種、含氮含硫及雜環(huán)類化合物22種、酯類7種、酸類3種、烷烴類8種。

2.2.1 醛類

魚肉中的醛類物質(zhì)一般來源于不飽和脂肪酸中碳碳雙鍵氧化后產(chǎn)生的氫過氧化物和甘油三酯自動(dòng)氧化降解產(chǎn)物，閾值一般比較低，通常具有脂肪、奶油、草香以及清香等氣味［4－7］。其中飽和醛類物質(zhì)一般主要來自n-6或n-9的PUFA或MUFA的氧化降解［8］。尤其是C6～C12飽和醛類物質(zhì)閾值一般較低，對(duì)風(fēng)味貢獻(xiàn)較大。如本試驗(yàn)種檢測(cè)到的飽和醛有己醛、庚醛、辛醛、壬醛等，其中己醛被報(bào)道主要是來自于亞油酸的氧化，亞油酸在自動(dòng)氧化作用下產(chǎn)生了亞油酸的13-氫過氧化物，13-氫過氧化物斷裂生成己醛［9］。在適宜濃度下，己醛被感覺清香和草香味，濃度過大時(shí)，己醛具有不愉快的酸敗味和刺激性辛辣味，此外壬醛被認(rèn)為呈清香味，辛醛為生嫩的新香［10－11］，壬醛則在濃度過大時(shí)表現(xiàn)出明顯的動(dòng)物油脂味［12］。也有報(bào)道醛類物質(zhì)與 Maillard和 Strecker反應(yīng)有著重要聯(lián)系，在長(zhǎng)時(shí)間的加熱過程中，氨基酸的氨基與糖類物質(zhì)的羰基發(fā)生反應(yīng)生成了醛類物質(zhì)［13］。如本試驗(yàn)中檢測(cè)到的苯甲醛已經(jīng)被鑒定是由氨基酸的Strecker反應(yīng)生成的，被感覺具有令人愉快的杏仁香、堅(jiān)果香和水果香［14］。本實(shí)驗(yàn)中除了檢測(cè)到了大量閾值比較低的醛類物質(zhì)外，還檢測(cè)出了含量比較高的醛類物質(zhì)，如十四醛(4 963.71 ng/g)、十六醛(2 381.77 ng/g)、十八醛(1 171.51 ng/g)、(Z)-13-十八醛(2 007.21 ng/g)等，這幾種醛屬于長(zhǎng)鏈飽和醛類物質(zhì)，一般具有較高的閾值，可能對(duì)風(fēng)味的貢獻(xiàn)較小。

2.2.2 酮類

酮類的閾值一般遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其同分異構(gòu)體的醛類［15］，對(duì)于魚肉風(fēng)味的貢獻(xiàn)相對(duì)較小。酮類可能是由于不飽和脂肪酸的熱氧化或降解產(chǎn)生［16－17］。也有文獻(xiàn)報(bào)道，氨基酸的降解、Maillard反應(yīng)和微生物氧化也是形成酮類物質(zhì)的重要來源［18］。酮類一般被認(rèn)為呈桉葉味、脂肪味和焦燃味，并且隨著碳鏈的增長(zhǎng)給出更強(qiáng)的花香特征。二酮類一般是Maillard反應(yīng)最初階段的產(chǎn)物，被感覺具有肉香和黃油香，在本次試驗(yàn)中檢測(cè)到的有 2，3-丁二酮、2，3-戊二酮、2，3-辛二酮，其中檢測(cè)到的2，3-丁二酮相對(duì)含量高達(dá)1 267.40 ng/g，曾被報(bào)道對(duì)奶油香氣有貢獻(xiàn)。烯酮類如3-戊烯-2-酮、3-甲基-2-丁酮等則被認(rèn)為是在加熱期間生成的脂質(zhì)氧化產(chǎn)物且有一種青葉芳香［11］。另外酮類被報(bào)道對(duì)腥味物質(zhì)有增強(qiáng)作用，可使腥味物質(zhì)增強(qiáng)或改變。在本實(shí)驗(yàn)中酮類物質(zhì)在總的揮發(fā)性物質(zhì)中所占相對(duì)含量雖然不高，但可能對(duì)2種河豚魚的特征風(fēng)味有貢獻(xiàn)。

醇類物質(zhì)可能是由n-3和n-6不飽和脂肪酸二級(jí)氫過氧化物的降解產(chǎn)物［19］。飽和醇類一般是在加熱過程中脂肪經(jīng)氧化分解生成的或是有羰基化合物還原而生成，一般閾值較高，在濃度較高時(shí)可能對(duì)魚肉的風(fēng)味有貢獻(xiàn)［20］。本次試驗(yàn)中檢測(cè)的飽和醇有丙醇(24.50 ng/g)、丁醇(33.98 ng/g)、辛醇(11.55 ng/g)等，相對(duì)含量較低，此外檢測(cè)到的2-乙基-1-己醇被報(bào)道具有蘑菇香氣［21］，可能對(duì)暗紋東方鲀的風(fēng)味有貢獻(xiàn)。不飽和醇類化合物的閾值通常比飽和醇類化合物高，它們對(duì)魚類制品風(fēng)味貢獻(xiàn)一般較大［22］。如檢測(cè)到的1-戊烯-3-醇具有魚腥味，是構(gòu)成美國(guó)紅魚肉的主要腥味成分［23］。1-辛烯-3-醇是亞油酸的氫過氧化物降解的產(chǎn)物，它呈類似于蘑菇和泥土的氣味，普遍存在于淡水魚和海水魚的揮發(fā)性氣味物質(zhì)中［24］。

2.2.4 含氮、含硫及雜環(huán)化合物

含硫化合物主要來自于含硫的氨基酸如甲硫氨酸、半胱氨酸和胱氨酸，它們通過Strecker降解形成硫醇［25］，如 2-乙基-1-己硫醇，能貢獻(xiàn)給產(chǎn)品理想的芳香和不良的氣味。含氮、含硫及雜環(huán)化合物的閾值一般很低，對(duì)魚肉的整體風(fēng)味貢獻(xiàn)很大。據(jù)報(bào)道，三甲胺是一種強(qiáng)風(fēng)味化合物，與魚組織中的脂肪反應(yīng)產(chǎn)生了魚的特殊氣味。呋喃類有一種強(qiáng)烈的、香脂的、甜的風(fēng)味和似煙草的氣味，如檢測(cè)到了被報(bào)道有火腿香味的2-乙基呋喃主要是由亞油酸氧化而來［26］。2-戊基呋喃可能會(huì)對(duì)魚腥味有一些影響。幾種含苯化合物如1-甲基萘、2-甲基萘等會(huì)造成魚肉中令人不愉快的風(fēng)味，可能是從環(huán)境中轉(zhuǎn)移到魚體內(nèi)的，說明魚肉的風(fēng)味也可能會(huì)受到環(huán)境污染物質(zhì)的影響［27］。吡嗪類化合物是美拉德反應(yīng)的產(chǎn)物，它們一般形成于食品的烹飪過程［28］，因?yàn)镾DE法控制的溫度為微沸狀態(tài)，所以本實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)到的吡嗪類物質(zhì)很少，如2-甲基吡嗪通常是堅(jiān)果香、烘烤香的特征物質(zhì)［29］。含硫化合物通常對(duì)魚肉的整體風(fēng)味影響很大。本試驗(yàn)中檢測(cè)到的2-乙?；量┚哂锌鞠愫徒固饸猓粓?bào)道是構(gòu)成霉干菜的主體香氣成分［30］。

2.2.5 酯類、酸類、烷烴類

酯類化合物是由羧酸和醇經(jīng)酯化而成。一般而言，短鏈酸形成的酯如乙酸乙酯具有水果香味，本試驗(yàn)中檢測(cè)到的乙酸乙酯含量高達(dá)1 148.44 ng/g。而長(zhǎng)鏈酸形成的酯具有輕微的油脂味［11］，檢測(cè)到的有十六酸甲酯、鄰苯二甲酸二異丁酯、鄰苯二甲酸二丁酯等，故酯類對(duì)整體風(fēng)味也做出了貢獻(xiàn)。短鏈的揮發(fā)性酸如乙酸會(huì)產(chǎn)生非常強(qiáng)烈的令人不愉快的汗味，被認(rèn)為是魚油風(fēng)味品質(zhì)的重要標(biāo)志［31］。各種烷烴(C6～C19)已經(jīng)被鑒定存在于某些魚肉的揮發(fā)物中，由于它們的閾值較高，因此烷烴對(duì)于食品整體的風(fēng)味貢獻(xiàn)很?。?2］。本試驗(yàn)中檢測(cè)到的酯類、酸類、烷烴類的化合物種類都較少，但乙醚溶劑中檢測(cè)出的酸類含量很高，這可能是樣品中的油脂被乙醚溶解導(dǎo)致的，也可能是在高溫蒸煮過程中相應(yīng)的醇、醛等化合物氧化而來的。

2.3 揮發(fā)性成分的PCA分析

以4個(gè)樣本的面積百分含量和它們的平均值為特征值，數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化后用PAST軟件進(jìn)行PCA分析，得到圖3。從圖3中可以看出，二氯甲烷萃取液和乙醚萃取液各2個(gè)樣本檢測(cè)結(jié)果較分散，說明SDE法的重現(xiàn)性差，但二氯甲烷溶劑與總物質(zhì)的距離近，比較接近總物質(zhì)。

圖3 養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵袚]發(fā)性成分面積百分含量PCA分析圖譜

以4個(gè)樣本的峰面積為特征值，將數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化后用R軟件進(jìn)行PCA分析，得到載荷圖4(a)和圖4(b)。從圖4(a)中可以看出，SDE法中二氯甲烷萃取液之間的距離較近，乙醚萃取液之間距離較遠(yuǎn)，說明二氯甲烷溶劑的重復(fù)性較好。圖4(b)表示了96種揮發(fā)性成分的主成分分析結(jié)果:每個(gè)箭頭對(duì)應(yīng)某一種揮發(fā)物(不同顏色對(duì)應(yīng)不同類揮發(fā)物)。將圖4(a)和圖4(b)比對(duì)后發(fā)現(xiàn)，若圖4(b)中“箭頭”和圖4(a)中“樣品點(diǎn)”在各自圖中所處位置相近，則兩者相關(guān)性較高。從將圖4(b)中部分具有分類意義的組分可劃分為2個(gè)區(qū)域。第一象限中對(duì)應(yīng)的物質(zhì)可能是乙醚萃取液中的主要揮發(fā)性成分;第二象限中對(duì)應(yīng)的物質(zhì)可能是二氯甲烷萃取液中的主要揮發(fā)性成分。從圖4也可以看出2種溶劑檢測(cè)到的揮發(fā)性成分，在組分和含量上具有一定差異，與GC-MS分析的結(jié)果基本相吻合。

圖4 養(yǎng)殖暗紋東方鲀?nèi)庵?6種揮發(fā)性成分PCA分析圖譜

3 結(jié)論

本研究對(duì)SDE法中的萃取溶劑進(jìn)行了選擇，通過GC-MS分析，乙醚為溶劑時(shí)，總共鑒定到了57種成分，以二氯甲烷為溶劑時(shí)，總共鑒定到了78種成分。比較得出，二氯甲烷溶劑在定性方面有優(yōu)勢(shì)，乙醚溶劑在定量方面效果較好。2種溶劑萃取一共檢測(cè)出96種化合物，其中醛類29種、酮類11種、醇類16種、含氮含硫及雜環(huán)類化合物22種、酯類7種、酸類3種、烷烴類8種。從PCA分析雖然可以初步確定暗紋東方鲀熟肉中的揮發(fā)性主體成分，但是還需要與感官分析結(jié)合進(jìn)行分析，同時(shí)為了能更好的檢測(cè)出養(yǎng)殖暗紋東方鲀中的揮發(fā)性成分，希望能與其它前處理方法結(jié)合起來共同鑒定。

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