無公害藥劑防治五味子白粉病及對葉片主要生理指標(biāo)的影響

鄧 勛 宋小雙 馬曉乾

(黑龍江省林科院森林保護研究所，哈爾濱 150040)

北五味子(Schisandrachinensis(Turcz.)Baill)是天然分布于我國東北長白山和小興安嶺地區(qū)的重要野生果樹資源[1]，含有多種化學(xué)成分，具有抗疲勞、抗衰老等藥理作用[2]，是東北地區(qū)主要的藥用植物栽培品種。近年來，隨著五味子人工栽培的面積的逐年擴大，緩解了中藥市場對北五味子生藥材的需求，但是北五味子白粉病和黑斑病的大面積發(fā)生對栽培生產(chǎn)造成了重要的影響，其中白粉病最嚴(yán)重，由于白粉病病菌在北五味子葉片表面的生長，嚴(yán)重影響了葉片的正常生理活動，最后會導(dǎo)致整個葉片枯萎脫落[3]。目前生產(chǎn)上主要采用三唑酮、甲基托布津等傳統(tǒng)農(nóng)藥進行防治，效果不甚理想，同時病原菌的抗藥性問題日益突出，因此篩選高效低毒的無公害農(nóng)藥實現(xiàn)對白粉病的有效控制迫在眉睫。農(nóng)藥使用后對非靶標(biāo)植物的影響已引起人們的關(guān)注，研究表明葉面噴霧、樹干注藥防治后，農(nóng)藥對植物生理生化指標(biāo)均有影響[4]。吳進才等研究發(fā)現(xiàn)，藥劑處理后可導(dǎo)致水稻體內(nèi)葉綠素含量下降，光合速率受抑制，使水稻抗逆性下降[5]；而唐光輝等研究表明，樹干注藥后，可導(dǎo)致可溶性蛋白、葉綠素等主要生理指標(biāo)的下降，對樹體的正常生理代謝影響顯著[6]。筆者選擇6種無公害農(nóng)藥對五味子白粉病的防治進行篩選，研究了高效農(nóng)藥防治后對五味子葉片內(nèi)可溶性蛋白、葉綠素等生理指標(biāo)含量和POD酶、CAT酶活性的影響，為理想藥劑的選擇及使用安全性評價提供依據(jù)。

1 試驗材料和方法

1.1 供試藥劑

選擇6種農(nóng)藥進行田間試驗。農(nóng)藥名稱、主要成分、生產(chǎn)廠家如下：多抗霉素(WP)13%水劑(有效成分：多抗霉素，臺灣興農(nóng)生物有限公司)；阿米西達(SC)250g/L懸浮劑(有效成分：醚菌酯，瑞士先正達作物保護有限公司)；世高(WG)10%水分散顆粒劑(主要成分：苯醚甲環(huán)唑，瑞士先正達作物保護有限公司)；井岡核苷(AS)3%水劑(主要成分：井岡霉素+核苷素，浙江匯豐生化有限公司)；凱潤(EC)250g/L乳油(主要成分：吡唑醚菌酯，德國巴斯夫上海有限公司)。

1.2 田間試驗及調(diào)查方法

試驗地位于黑龍江省牡丹江林副特產(chǎn)研究所北五味子栽培基地，五味子為3年生植株。

防治方法：將6種藥劑分別設(shè)定3個濃度梯度(表1)，以清水作為對照，共19個處理，每處理兩株，兩次重復(fù)，各處理隨機區(qū)組排列，在2011年6月20日-7月10日期間，連續(xù)防治3次，每次間隔10d。

調(diào)查方法：在第3次施藥后第10d、20d分別進行病情調(diào)查，每株隨機選取100片葉進行病葉統(tǒng)計和分級，計算病情指數(shù)和相對防效，病葉分級標(biāo)準(zhǔn)如下：0級：葉上無病斑；Ⅰ級:病斑面積占整個葉面積的1/4以下；Ⅱ級:病斑面積占整個葉面積的1/4～1/2；Ⅲ級：病斑面積占整個葉面積的1/2～3/4；Ⅳ級：病斑面積占整個葉面積的3/4以上。病情指數(shù)及相對防效計算方法如下：

1.3 主要生理指標(biāo)測定

樣品采集：在防治后的第10d、20d和30d采樣。葉片采集方法：分別在植株的上、中、下三部分采樣,然后將所采集的每一處理的樣品混合(葉片總數(shù)不少于100片)。用毛刷刷去葉片表面的污物,并用蒸餾水洗凈、擦干。

指標(biāo)測定：將葉片用濾紙吸干水分，稱量試驗材料0.5g，放入預(yù)冷的研缽中，加入石英砂，研磨成勻漿，8 000r/min，離心10min，取上清液進行主要生理指標(biāo)測定，采用考馬斯亮藍G-250法測定總蛋白含量，采用愈創(chuàng)木酚法測定過氧化物酶(POD)活性，采用NBT光照化學(xué)還原法測定超氧化物岐化酶(SOD)活性，采用丙酮浸提法測定葉綠素含量[7]。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)采用SPSS軟件、Duncan法進行差異顯著性分析[8]。

2 結(jié)果與分析

2.1 6種藥劑防治五味子白粉病的藥效對比

本文選用了6種無公害農(nóng)藥進行五味子白粉病的田間防治試驗，不同藥劑間防治效果差異顯著(見表1)，施藥后7d調(diào)查，阿米西達800倍液防治效果可以達到87.82%，防治效果最好，而阿米西達1 000倍液、2 000倍液、凱潤800倍液、多抗霉素800倍液和世高1 000倍液的防治效果均在80%以上，可有效控制病害的發(fā)生，不同藥劑防治效果從高到低依次為：阿米西達>凱潤>多抗霉素>世高>402>井岡核苷。其中多抗霉素屬于生物農(nóng)藥，800倍液的防治效果可以達到80.08%，與化學(xué)藥劑凱潤和世高的效果相當(dāng)。施藥后14d調(diào)查，6種藥劑的防治效果均有下降，其中阿米西達800倍液、1 000倍液防治達到80%以上，其他各藥劑的不同處理防治效果均在60%以上，不同藥劑防治效果從高到低依次為：阿米西達>凱潤>多抗霉素>世高>402>井岡核苷。

表1 無公害農(nóng)藥對五味子白粉病的防治效果

2.2 對葉片主要生理指標(biāo)的影響

2.2.1 對可溶性蛋白含量的影響

從圖1可以看出，各藥劑處理均可在一定程度上降低葉片中可溶性蛋白的含量，同生物農(nóng)藥多抗霉素相比，阿米西達處理對葉片效果更顯著，800倍液處理10d后降低了7.64%，隨著施藥時間的延長，葉片對藥物處理逐漸適應(yīng)，可溶性蛋白含量在逐步回升，30d后恢復(fù)到正常水平。而生物農(nóng)藥多抗霉素對葉片可溶性蛋白的影響較小，其中在1 000倍和2 000倍處理后20d，可溶性蛋白含量超過對照，1 000倍液處理30d后比對照提高了1.95%，起到了促進的作用。

2.2.2 對葉綠素含量的影響

葉面噴施殺菌劑對葉片的葉綠素含量影響顯著，從圖2可以看出，兩種藥物的不同處理方式均可導(dǎo)致葉片葉綠素含量的下降，影響光合作用和葉片正常的生理代謝，其中阿米西達800倍液處理，葉綠素含量降低最多，達到9.15%，多抗霉素處理對葉片影響較小，處理30d后，葉片葉綠素含量基本恢復(fù)到正常水平。

2.2.3 對POD酶和CAT酶的影響

CAT酶是一種以鐵卟啉為輔基的酶，能清除SOD的歧化產(chǎn)物H2O2為O2和H2O，避免某些具有生理功能的蛋白質(zhì)和巰基酶被氧化，喪失活性，對生物膜造成損傷。POD是清除H2O2與許多有機氫過氧化物的抗氧化酶之一，它對H2O2非常專一，POD和CAT均是植物重要的保護酶。葉片噴施殺菌劑后，葉片的CAT酶和POD酶活性菌明顯下降(圖3、圖4)，影響效果同可溶性蛋白和葉綠素含量，阿米西達作用大于多抗霉素，其中多抗霉素在低濃度處理后30d后，增加了兩種保護酶的活性，對植物生長起到了促進作用。

通過分析施藥后，對葉片的主要生理指標(biāo)影響可以看出，生物農(nóng)藥對植物的影響較小，在防治效果相差不多的情況下，推薦使用生物農(nóng)藥進行五味子白粉病的防治，可以在有效控制白粉病發(fā)生的同時，最大限度地減少對植物的影響，保持其正常生長。

3 結(jié)論

經(jīng)過藥劑種類、濃度篩選，從6月中旬開始，使用阿米西達800倍液或1 000倍液、多抗霉素800倍液，每隔7d防治1次，連續(xù)防治3次，可以有效控制五味子白粉病的發(fā)生和蔓

延，防治效果可以達到80%以上。

不同藥劑對五味子葉片主要生理指標(biāo)的影響不同，防治10d后，阿米西達和多抗霉素菌降低了葉片可溶性蛋白、葉綠素含量以及CAT酶和POD酶的活性，30d后可以恢復(fù)到正常水平，其中多抗霉素可以提高葉片可溶性蛋白、葉綠素含量以及CAT酶和POD酶的活性，在一定程度上對五味子的生理活動起到了促進作用，在防治效果相差不多情況下，推薦使用多抗霉素對五味子白粉病進行防治。

參考文獻:

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[6]唐光輝，田鵬鵬，馮俊濤.樹干注藥對柳樹葉片幾種生理指標(biāo)的影響[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報,2006,8(4):383～386.

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[8]蔡建瓊.SPSS統(tǒng)計分析實例精選[M].北京:清華大學(xué)出版社,2006:123～148.