丁香揮發(fā)油β－環(huán)糊精包合物制備工藝

高詠，王志劍

1．遼寧省沈陽市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧沈陽110013;2．遼寧省沈陽市和平區(qū)西塔社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，遼寧沈陽110002

丁香揮發(fā)油β－環(huán)糊精包合物制備工藝

高詠1，王志劍2

1．遼寧省沈陽市食品藥品檢驗(yàn)所，遼寧沈陽110013;2．遼寧省沈陽市和平區(qū)西塔社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，遼寧沈陽110002

目的:優(yōu)選丁香揮發(fā)油β－環(huán)糊精包合物的最佳制備工藝。方法:采用正交設(shè)計(jì)方法，考察丁香揮發(fā)油(g)與β－環(huán)糊精(g)的比例、包合溫度及時(shí)間對(duì)丁香酚包合率及包合物收得率的影響，采用氣相色譜法測定丁香酚的含量。結(jié)果:確定最佳工藝為丁香揮發(fā)油(g)與β－環(huán)糊精(g)的比例是1∶8，溫度40℃，時(shí)間2.5h。結(jié)論:此法準(zhǔn)確、可靠，為丁香制備工藝和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了一定的科學(xué)依據(jù)。

丁香揮發(fā)油;丁香酚;正交試驗(yàn)

丁香為桃金娘科植物丁香(Eugenia caryophyllata Thunb．)的干燥花蕾。味辛、性溫，歸脾、胃、肺、腎經(jīng)。具有溫中降逆，補(bǔ)腎助陽的功效，用于治療脾胃虛寒，呃逆嘔吐，食少吐瀉，腎虛陽痿［1］。研究表明，丁香的主要化學(xué)成分為揮發(fā)油，其揮發(fā)油中主要含丁香酚(80%～87%)，β－丁香烯(9.12%)，乙酰丁香酚(7.33%)。丁香酚有較強(qiáng)的藥理活性，具有抑菌、麻醉、解熱、抗氧化、抗腫瘤、促進(jìn)透皮吸收、祛蚊等多種藥理活性［2，3］。但丁香酚的穩(wěn)定性較差，易在制劑生產(chǎn)和貯藏過程中散失，影響藥效。為提高其穩(wěn)定性，減少散失，可以采用β－環(huán)糊精進(jìn)行包合。本實(shí)驗(yàn)采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法考察了不同因素對(duì)丁香酚包合率及包合物收得率的影響，優(yōu)選出丁香揮發(fā)油β－環(huán)糊精包合物的制備工藝。

1 儀器與材料

GC－2014C型氣相色譜儀(日本島津公司)，磁力攪拌器(上海雷磁新涇儀器有限公司)、DRP－9082型電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)、ER－182A全自動(dòng)電子天平(十萬分之一，日本A＆D公司)、丁香酚(中國藥品生物制品檢定所)，丁香揮發(fā)油(自制)，其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 正交試驗(yàn)采用L9(3)4正交設(shè)計(jì)法進(jìn)行試驗(yàn)獲得最佳的包合工藝。分別對(duì)丁香揮發(fā)油(g)與β－環(huán)糊精(g)的比例、包合溫度及包合時(shí)間3個(gè)因素進(jìn)行考察，每個(gè)影響因素選取3個(gè)水平，因素水平表見表1;按L9(3)4正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，見表2。

表1 因素水平表

按上述比例取β－環(huán)糊精，加水制成濃度為4%β－環(huán)糊精溶液，置于磁力攪拌器上(300r/min)，緩慢滴加揮發(fā)油(2倍無水乙醇稀釋)，在不同溫度下攪拌至規(guī)定時(shí)間，4℃冷藏24h，減壓過濾，分別用蒸餾水和無水乙醇洗滌濾層，分別洗滌3次，每次10mL，將濾層和濾紙一同取出，60℃干燥至恒重，即得白色粉末狀β－環(huán)糊精包合物。

2.2 樣品測定方法按因素水平表安排的正交試驗(yàn)稱取干燥包合物0.1g，精密稱定，精密加入正己烷20ml，稱定重量，超聲處理15min，放置至室溫，再稱定重量，用正己烷補(bǔ)足減少的重量，搖勻，慮過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，采用上述條件注入氣相色譜儀進(jìn)行分析。

2.3 丁香酚測定方法采用氣相色譜法。色譜條件:色譜柱(2m×2mm)，以聚乙二醇20000(PEG－20M)為固定相，涂布濃度為10%;檢測器:F1D;柱溫:190℃;檢測器溫度:230℃;進(jìn)樣口溫度:230℃;N2流速40ml/min，H2流速40.0ml/min，Air流速:400ml/min;進(jìn)樣量:1μL。

2.4 計(jì)算方法由于丁香酚包合率、包合物收率對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果都有顯著的影響，故采用加權(quán)綜合評(píng)分法進(jìn)行比較。對(duì)各指標(biāo)的數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化，其中丁香酚包合率、包合物產(chǎn)率的權(quán)重系數(shù)根據(jù)重要性程度分別確定為0.7和0.3。按下面兩個(gè)公式計(jì)算，考察結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。

表2 L9(34)正交試驗(yàn)表

表3 方差分析表

從表2、表3結(jié)果分析可以看出，三因素的影響大小依次為A＞B＞C，A因素影響具有顯著性。綜合分析各個(gè)因素，確定最佳工藝為丁香揮發(fā)油(g)與β－環(huán)糊精(g)的比例是1∶8，溫度40℃，時(shí)間2.5h。

2.5 驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)取丁香揮發(fā)油，按最佳工藝A2B3C2方法進(jìn)行驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，丁香酚包合率為88.5%，包合物收率為88.6%。結(jié)果表明，優(yōu)選出的工藝方法重現(xiàn)性較好，工藝條件穩(wěn)定。

3 討論

方差分析顯示，丁香揮發(fā)油與β－環(huán)糊精比例對(duì)包合工藝影響較大，具有顯著性差異，而包合溫度、包合時(shí)間對(duì)包合工藝影響較小。在最佳工藝條件下，丁香揮發(fā)油被β－環(huán)糊精包合后形成白色粉末狀包合物，與外界環(huán)境隔離，有效防止了丁香揮發(fā)油的揮發(fā)或氧化變性，增加了其穩(wěn)定性，同時(shí)可以改善藥物的溶解性，提高生物利用度，液體藥物固體粉末化，便于制劑制備。

目前在中藥揮發(fā)油或脂肪油包合物制備工藝研究中，對(duì)包合率的考察大多以包合物中提取的總油量為考察指標(biāo)［4，5］，缺乏對(duì)油中有效成分包合率的考察。本實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜法測定丁香揮發(fā)油β－環(huán)糊精包合物中丁香酚的含量，并以丁香酚的包合率為主要考察指標(biāo)確定最佳包合工藝，方法科學(xué)、快速，測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

［1］中華人民共和國藥典(一部)［S］．北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:4－4．

［2］常新全，丁麗霞．中藥活性成分分析手冊(上)［M］．北京:北京學(xué)苑出版社，2002．

［3］彭宅彪，張瓊光，代虹健，等．丁香酚的藥理學(xué)研究進(jìn)展［J］．時(shí)珍國醫(yī)國藥，2006，17(10)．

［4］葛亮，王昕宇，姚藍(lán)．丁香揮發(fā)油β－環(huán)糊精包合工藝研究［J］．西北藥學(xué)雜志，2010，25(3):210－211．

［5］邱嬌英，周文蘭．丁香揮發(fā)油的提取與β－環(huán)糊精包合工藝研究［J］．中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2008，14(12):67－69．

R284.2

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1007－8517(2012)11－0023－02

2012.04.11)