昂丹司瓊對(duì)異氟烷催眠和鎮(zhèn)痛作用的影響

韓平平，蔡慧明，周美艷，劉亞君，張明陽(yáng)，戴體俊

(徐州醫(yī)學(xué)院1.藥學(xué)院，2.麻醉學(xué)院，3.麻醉藥理教研室，江蘇 徐州 221002)

全身麻醉的作用包括鎮(zhèn)痛、催眠、意識(shí)喪失、認(rèn)知障礙、肌松和抑制異常應(yīng)激反應(yīng)等諸多方面，其中催眠鎮(zhèn)痛最為重要，但到目前為止其作用機(jī)制仍不甚清楚。以往研究表明，GABA-A受體［1］、甘氨酸受體［2］、N-甲基-D-天冬氨酸受體［3］和煙堿受體［4］與全麻藥催眠和鎮(zhèn)痛有關(guān)。這些靶位主要是配體門(mén)控離子通道。5-羥色胺(血清素)3受體(serotonin 3 receptor，5-HT3)受體也是一種配體門(mén)控離子通道［5］。已有研究表明吸入麻醉藥對(duì)5-HT3受體有調(diào)控作用［6－7］?，F(xiàn)有研究表明5-HT3受體可能對(duì)乳化七氟烷的催眠、鎮(zhèn)痛有調(diào)制作用［8］。曾有研究表明5-HT3受體在睡眠中起到重要的調(diào)節(jié)作用［9］，大鼠ip給予5-HT3受體阻滯劑昂丹司瓊能夠減少覺(jué)醒、增加慢波睡眠和快眼動(dòng)相睡眠［10］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已證明全身應(yīng)用昂丹司瓊對(duì)慢性神經(jīng)病理性疼痛有很好的療效［11］，同時(shí)減輕丙泊酚注射引起的疼痛［12］，對(duì)炎癥刺激有效［13］等。異氟烷為臨床常用的吸入全麻藥，因其毒性低，代謝率低，理化性質(zhì)接近理想，有一定的鎮(zhèn)痛作用［14］，注射給藥也能達(dá)到麻醉作用［15］。昂丹司瓊常用于異氟烷麻醉手術(shù)后的止吐，但是昂丹司瓊能否影響異氟烷的催眠、鎮(zhèn)痛作用則未見(jiàn)報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)觀察兩藥合用時(shí)，對(duì)異氟烷的催眠和鎮(zhèn)痛作用的影響，并探討異氟烷的催眠、鎮(zhèn)痛作用與5-HT3受體的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 藥品及動(dòng)物

異氟烷購(gòu)自山東魯南貝特制藥有限公司，批號(hào)060902;昂丹司瓊購(gòu)自湖北賽博化工有限公司，批號(hào)100706。

昆明種小鼠雌雄兼用，體質(zhì)量18～22 g，清潔級(jí)，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)前2 d使小鼠熟悉實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，自由攝食飲水，為避免小鼠各時(shí)間段可能出現(xiàn)行為差異對(duì)研究結(jié)果的影響，實(shí)驗(yàn)于每日同一時(shí)間段進(jìn)行。

1.2 檢測(cè)昂丹司瓊對(duì)異氟烷催眠的作用

1.2.1 催醒實(shí)驗(yàn)

昆明種小鼠40只，♀♂兼用，分為正常對(duì)照(ip給生理鹽水)和昂丹司瓊 1，2和4 mg·kg－14組，15 min 后 ip 異氟烷1.0 ml·kg－1，記錄從翻正反射消失到翻正反射恢復(fù)翻正反射持續(xù)時(shí)間。

1.2.2 測(cè)定催眠ED50

采用序貫法［16］給藥進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。30只昆明小鼠分為2組，每組15只。小鼠分別ip給予生理鹽水或昂丹司瓊2 mg·kg－1，15 min 后 ip 異氟烷 1.12，0.90，0.72，0.58 和0.46 ml·kg－1(按1∶0.8等比劑量)。以小鼠翻正反射消失10 s為睡眠指標(biāo)。若小鼠翻正反射消失，下一只小鼠異氟烷減低一個(gè)劑量級(jí);若翻正反射未消失，下一只小鼠異氟烷增加一個(gè)劑量級(jí)。采用 Dixon-Mood 法［15］計(jì)算 ED50。

1.3 檢測(cè)昂丹司瓊對(duì)異氟烷鎮(zhèn)痛的作用

1.3.1 扭體法［17］

昆明種小鼠80只，♀♂各半，隨機(jī)分為正常對(duì)照組，昂丹司瓊 1，2 和 4 mg·kg－1，異 氟烷1.0 ml·kg－1，昂丹司瓊 1，2 和 4 mg·kg－1+ 異氟烷組。小鼠先ip給予生理鹽水或昂丹司瓊，10 min后，合用組 sc 給予異氟烷 1.0 ml·kg－1，5 min 后均再 ip 0.6%冰醋酸溶液0.01 ml·g－1，記錄 15 min 內(nèi)小鼠扭體次數(shù)。

1.3.2 熱板法［17］

雌性昆明小鼠置于恒溫?zé)岚?(55±0.5)℃，記錄從其足部接觸熱板到開(kāi)始添后足的時(shí)間(s)作為熱板法痛閾值(pain threshold in hot plate test，HPPT)。給藥前每只小鼠測(cè)2次HPPT，間隔5 min，選基礎(chǔ)痛閾在5～30 s小鼠。給藥后，限定停留時(shí)間不超過(guò)60 s，超過(guò)者，其HPPT記為60 s。實(shí)驗(yàn)分組同扭體法。8組小鼠先ip給予生理鹽水或昂丹司瓊，昂丹司瓊+異氟烷組10 min后ip給予異氟烷0.4 ml·kg－1。觀察各組小鼠末次給藥后 5，10，15，20和25 min的HPPT變化。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 昂丹司瓊對(duì)異氟烷催眠作用的影響

2.1.1 催醒實(shí)驗(yàn)

表1結(jié)果顯示，昂丹司瓊對(duì)異氟烷的催眠作用無(wú)影響，翻正反射持續(xù)時(shí)間無(wú)顯著差異。

Tab.1 Effect of ondansetron on righting reflex disappearance time in isoflurane given mice

2.1.2 昂丹司瓊對(duì)異氟烷催眠ED50的影響

昂丹司瓊+異氟烷組和單獨(dú)異氟烷組催眠ED50分別為 0.84(0.69 ～ 1.02)ml·kg－1和 0.64(0.48 ～0.86)ml·kg－1，兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2.2 昂丹司瓊對(duì)異氟烷鎮(zhèn)痛作用的影響

2.2.1 扭體法

表2結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組比較，昂丹司瓊4 mg·kg－1和異氟烷 1.0 ml·kg－1顯著降低正常清醒小鼠的扭體次數(shù)(P＜0.01)。給予昂丹司瓊后再給予異氟烷1.0 ml·kg－1，小鼠扭體次數(shù)進(jìn)一步減少，但與異氟烷 1.0 ml·kg－1麻醉組無(wú)顯著差異。

Tab.2 Effect of ondansetron on writhing times in conscious and isoflurance given mice

2.2.2 熱板法

表3結(jié)果顯示，昂丹司瓊對(duì)正常清醒小鼠HPPT無(wú)明顯影響。小鼠ip給予異氟烷后，引起HPPT增加(P＜0.01);與異氟烷麻醉組比，昂丹司瓊+異氟烷兩藥合用組HPPT差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

Tab.3 Effect of ondansetron on hot-plate pain threshold(HPPT)in conscious and isoflurane given mice

3 討論

本實(shí)驗(yàn)表明，昂丹司瓊對(duì)異氟烷催眠小鼠翻正反射消失的持續(xù)時(shí)間、異氟烷催眠ED50、扭體次數(shù)和熱板法HTTP均無(wú)明顯影響。催醒和催眠ED50實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，昂丹司瓊對(duì)異氟烷的催眠作用無(wú)明顯影響，提示5-HT3受體可能不是異氟烷的催眠作用靶點(diǎn)。

為了避免動(dòng)物出現(xiàn)明顯的中樞抑制而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，本實(shí)驗(yàn)選擇了異氟烷的亞麻醉劑量建立鎮(zhèn)痛模型。此模型異氟烷的鎮(zhèn)痛作用明顯，對(duì)小鼠正?；顒?dòng)影響輕微，小鼠的翻正反射并不消失。扭體實(shí)驗(yàn)中，為了避免腹腔同時(shí)注射異氟烷和醋酸溶液可能發(fā)生理化相互作用，因此采用sc給予異氟烷。

在熱板實(shí)驗(yàn)中，昂丹司瓊對(duì)異氟烷小鼠HPPT無(wú)明顯影響，提示5-HT3受體可能不是異氟烷抗熱刺激傷害作用的靶位。馬濤等［18］曾采用鞘內(nèi)注射另一種5-HT3受體阻斷劑托烷司瓊，發(fā)現(xiàn)其不能拮抗異氟烷的抗熱刺激傷害作用。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其一致。醋酸注入小鼠腹腔內(nèi)，會(huì)刺激臟層和壁層腹膜，引起較大面積較長(zhǎng)的炎性疼痛。昂丹司瓊能夠減少小鼠的扭體次數(shù)，這可能是由于昂丹司瓊拮抗了受化學(xué)刺激的組織釋放的致痛物質(zhì)5-HT對(duì)5-HT3受體的激活作用。

綜上所述，昂丹司瓊用于異氟烷麻醉后止吐時(shí)，對(duì)異氟烷的催眠、鎮(zhèn)痛作用無(wú)顯著影響;由于昂丹司瓊是5-HT3受體阻滯劑，提示5-HT3受體可能不是異氟烷催眠和鎮(zhèn)痛作用的靶位。

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