青風(fēng)藤中揮發(fā)油成分的分析

陳 俊，周 瑾，何赟鑫，馮春華，張國慶(第二軍醫(yī)大學(xué)東方肝膽外科醫(yī)院藥材科，上海 200438)

陳 俊(1979-)，女，主管藥師.Tel:(021)81875582，E-mail:chenjuntcdj@126.com.

張國慶.Tel:(021)81875571，E-mail:guoqing_zhang91@126.com.

青風(fēng)藤中揮發(fā)油成分的分析

陳 俊，周 瑾，何赟鑫，馮春華，張國慶
(第二軍醫(yī)大學(xué)東方肝膽外科醫(yī)院藥材科，上海 200438)

目的建立氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)方法分析青風(fēng)藤中的揮發(fā)油成分。方法采用水蒸氣蒸餾法提取青風(fēng)藤揮發(fā)油，運(yùn)用GC-MS技術(shù)，結(jié)合數(shù)據(jù)庫檢索對其揮發(fā)油進(jìn)行分離鑒定。對青風(fēng)藤中的揮發(fā)油進(jìn)行分析。結(jié)果實驗共鑒定出80個化合物，通過與軟件中的質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)譜圖庫進(jìn)行比較，獲得匹配的有63個化合物，主要成分為脂肪酸、甾醇、烯烴以及少量的醛類等物質(zhì)，含量最多的為十八烷酸和十六烷酸。結(jié)論該實驗豐富了青風(fēng)藤的物質(zhì)基礎(chǔ)研究，為青風(fēng)藤質(zhì)量控制提供了更多的參考依據(jù)。

青風(fēng)藤；揮發(fā)油；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用

青風(fēng)藤為防己科植物青藤Sinormeniumactum(Thunb．)Rehd．et Wils，和毛青藤Sinomeniumcutum(Thunb．)Rehd．et Wils．var．cinereumRehd．et wils的干燥藤莖，其性溫、味苦、氣平、無毒，歸肝、脾經(jīng)；有祛風(fēng)濕，通經(jīng)絡(luò)，利小便的功能；用于風(fēng)濕痹痛，關(guān)節(jié)腫脹，麻痹瘙癢[1]。據(jù)目前藥用情況，主要為防己科的青藤，在陜西則用防己科植物青風(fēng)藤的變種毛青藤[2，3]，此外，據(jù)《中藥志》記載，四川所用者為防己科植物木防己的莖；福建所用者為茜草科植物雞矢藤的莖；浙江有用五加科植物常春藤的莖。植物來源頗為混亂，不同來源植物根莖在形態(tài)上較為相似，加工成飲片后更加難以辨認(rèn)[4]，目前，國內(nèi)對青風(fēng)藤種屬產(chǎn)地成分分析報道比較少，而且主要研究集中在中等極性成分上。本實驗采用 GC-MS方法對青風(fēng)藤中的揮發(fā)油進(jìn)行了分析，為青風(fēng)藤不同產(chǎn)地種屬的研究提供依據(jù)和參考。

1 儀器與試藥

1.1儀器 Thermo Trace GC Ultra氣相色譜儀(美國賽默飛世爾公司)，Thermo DSQⅡ質(zhì)譜儀，Xcalibur工作站。METTLER AE240型電子天平(德國梅特勒公司)； LX-02藥材粉碎機(jī)(上海利祥公司)。

1.2試藥 青風(fēng)藤(亳州市中藥飲片廠，產(chǎn)地：湖北，批號：110101、101001；上海雷允上中藥飲片廠，產(chǎn)地：河南，批號：100902；上海滬豐生物科技有限公司，產(chǎn)地：江蘇，批號：110102,110301)經(jīng)第二軍醫(yī)大學(xué)生藥教研室孫蓮娜副教授鑒定為防己科植物青風(fēng)藤的藤莖；乙醚(上?；瘜W(xué)試劑有限公司，分析純)；水為純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱TR-5 MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)，分流比10:1，進(jìn)樣口溫度260 ℃，程序升溫(起始溫度50 ℃，以2 ℃/min的速率升至180 ℃，然后以60 ℃/min升至300 ℃，并保持10 min)，傳輸線溫度260 ℃，載氣流速1.0 ml/min。

2.2質(zhì)譜條件 電離方式：EI源；電子能量70 ev；離子源溫度200 ℃；質(zhì)量范圍(m/z)：50～650；檢測器增益1.0×105；溶劑延遲時間5.5 min。

2.3青風(fēng)藤揮發(fā)油的提取 稱取粉碎后過 40 目篩的青風(fēng)藤粗粉 300 g，置 3 000 ml 量瓶中，加水 2 000 ml，用電熱套加熱回流，進(jìn)行水蒸氣蒸餾 7 h，得具有香味，淺黃色的餾出物，取10 μl以0.5 ml無水乙醚溶解 。

2.4分離與鑒別 按上述實驗條件進(jìn)樣1 μl，得到青風(fēng)藤揮發(fā)油的總離子流圖，如圖1所示，75 min內(nèi)共分離出80個峰，每個組分的質(zhì)譜圖由計算機(jī)檢索與NIST庫標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照，鑒定了其中63個化學(xué)成分的分子結(jié)構(gòu)，并以扣除溶劑峰的色譜圖的全部峰面積作為100%，利用歸一化法確定了各組分在揮發(fā)油中的相對含量，結(jié)果如表1所示。

圖1 空白溶劑與青風(fēng)藤揮發(fā)油的GC-MS總離子流圖

表1 青風(fēng)藤提取物中揮發(fā)油成分

NO．RT．CompoundMol．MW．SI．RelativeContent(%)6064．39Labda?8(20)，12，14?trieneC20H322728260．636166．54n?HexadecanoicacidC16H32O225666923．236267．30(Z，Z)?9，12?OctadecadienoicacidC18H32O228071433．786367．90IsomenthoneC22H42O335473911．28

3 討論

3.1本次實驗共從數(shù)據(jù)庫匹配得到63個峰，主要成分為：脂肪酸、甾醇、烯烴以及少量的醛類。與青風(fēng)藤化學(xué)成分研究文獻(xiàn)報道相一致。其中相對含量較高的成分為：(z,z)-9,12-十八烷酸((Z,Z)-9,12-Octadecadienoic acid)、n-十六烷酸(n-Hexadecanoic acid)，含量分別為33.78%和23.23%，其次為Isomenthone，含量為11.28%，三者含量總和超過揮發(fā)油總含量的60%，可作為后期研究的主要依據(jù)。

3.2對于青風(fēng)藤的GC-MS分析，有文獻(xiàn)報道[5]，共鑒別出101中化合物，在組分和含量上和本實驗存在差異。這種差異可能與藥材的來源、種屬、生長環(huán)境不同有關(guān)，青風(fēng)藤來源頗多，分布廣泛，在河南、安徽、江蘇、浙江、福建、廣東、廣西、湖北、四川、貴州、陜西[6]等地都有產(chǎn)出，而且據(jù)文獻(xiàn)報道，不同產(chǎn)地青風(fēng)藤成分有差異，特別是指標(biāo)性成分青藤堿差異明顯[7]，所以推測揮發(fā)油成分差異受地域種屬等因素的影響也較大，本實驗為青風(fēng)藤種屬差異及偽品的鑒別提供了依據(jù)。另外，使用的儀器不同，實驗條件的不同也會對結(jié)果造成一定的影響。

3.3綜上所述，本文運(yùn)用GC-MS技術(shù)對青風(fēng)藤揮發(fā)油成分進(jìn)行分析，利用數(shù)據(jù)庫自動檢索和匹配功能，對其進(jìn)行定性鑒別，并通過色譜峰面積歸一化法計算得出各化學(xué)成分的相對百分含量，本研究為青風(fēng)藤藥材的種屬鑒別及質(zhì)量控制提供了重要依據(jù)，為其的進(jìn)一步合理應(yīng)用提供了理論參考。

[1] 中國藥典2010版.一部[S]. 2010：181.

[2] 霍海如，車錫平.青藤堿對離體兔頸上交感神經(jīng)節(jié)的作用[J].中國藥理學(xué)通報，1988：4(3):168.

[3] 張 欣.毛清藤治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎1524例臨床分析[J].甘肅中醫(yī)，1996：9(3):22.

[4] 王 巖,周莉玲，李 銳.青風(fēng)藤的研究進(jìn)展[J].中藥材, 2002, 25(3):209.

[5] 任 潔，薛興亞，章飛芳，等.氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析青風(fēng)藤揮發(fā)油中化學(xué)成分[J].世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2006,8(3)：21.

[6] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊) [M]. 1997：1234.

[7] 瞿發(fā)林，董文燊，劉 蓉，楊 婷，等.不同產(chǎn)地青風(fēng)藤中青藤堿的含量比較[J].藥物研究，2010,19(18)：32.

AnalysisofvolatileconstituentsinCaulisSinomeniibyGC-MS

CHEN Jun，ZHOU Jin，HE Yun-xin，F(xiàn)ENG Chun-hua，ZHANG Guo-qing
(Department of Pharmacy，Eastern Hepatobilliary Hospital，Second Military Medical University，Shanghai 200438，China)

ObjectiveTo establish the determination method for chemical constituents of the volatile oil inSinorneniumactum(Thunb.)Rehd.et Wils by gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS).MethodThe volatile oil was extracted fromSinorneniumactum(Thunb.)Rehd.et Wils by steam distillation.The constituents of volatile oil were identified by GC-MS technology,which were identified through database index.ResultThe results showed that after comparing of the gained mass spectrum with the standard, 63 kinds of chemical constituents in all were identified, the major constituents were the fatty acids, sterols, alkenes and a few kind of aldehyde . The most contents were octadecylic acid and hexadecanoic acid , whose relative percentages were 33.78% and 23.23% respectively.ConclusionThe experiment improved the basic components study onCaulisSinomenii, which could provide more reference quality control ofCaulisSinomenii.

Sinorneniumactum(Thunb.)；Rehd.et wils.;volatile oil; GC-MS

R284.1

A

1006-0111(2012)02-0115-03

10.3969/j.issn.1006-0111.2012.02.010

2011-08-29

[修回日期]2011-12-28