• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    基于色譜指紋圖譜和含量測定相結合的青風藤質量控制方法研究

    2022-03-03 12:35:50任明軍胡云飛朱永波李文龍
    中草藥 2022年5期
    關鍵詞:青風藤木蘭花青藤

    任明軍,胡云飛,朱永波,仇 萍,李 正,李文龍*

    基于色譜指紋圖譜和含量測定相結合的青風藤質量控制方法研究

    任明軍1, 2,胡云飛1, 2,朱永波3,仇 萍3,李 正1, 2,李文龍1, 2*

    1.天津中醫(yī)藥大學中藥制藥工程學院,天津 300193 2.省部共建組分中藥國家重點實驗室,天津 301617 3.湖南正清制藥集團股份有限公司,湖南 懷化 418000

    建立青風藤的液相色譜指紋圖譜與含量測定方法,更全面、合理地控制青風藤藥材的質量。建立青風藤藥材的液相色譜指紋圖譜方法,對74批青風藤藥材進行分析,使用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2012版)》對74批青風藤藥材進行相似度評價,確定共有峰,使用SIMCA-P(V 14.1)軟件對74批青風藤藥材的指紋圖譜數(shù)據(jù)進行正交偏最小二乘判別分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA),從活性物質中選擇對青風藤產(chǎn)地及部位影響較大的共有成分作為青風藤的質量控制成分,對其進行含量測定,并分析測定結果。方法學驗證結果表明,所建方法適用于青風藤藥材指紋圖譜和含量測定;經(jīng)化學計量學分析與文獻調研,最終選擇木蘭花堿和青藤堿作為青風藤的質量控制成分含量測定。結果表明,不同藥用部位的青風藤中青藤堿含量差異較大,而不同產(chǎn)地的青風藤中木蘭花堿含量差異較大,青風藤根莖與根中的青藤堿含量較藤莖中青藤堿含量高,湖北產(chǎn)青風藤中木蘭花堿較其他產(chǎn)地高。所建立的青風藤指紋圖譜和含量測定方法色譜峰分離度、拖尾因子、準確度、線性、精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性等參數(shù)均符合《中國藥典》2020年版要求,可對青風藤進行準確的定性和定量分析,適用于青風藤藥材的質量控制。

    青風藤;青藤堿;木蘭花堿;正交偏最小二乘判別分析;指紋圖譜

    青風藤性平,味苦、辛;歸肝經(jīng)、脾經(jīng),具有通經(jīng)絡、祛風濕和利小便等功效,被用于治療風濕痹痛、麻痹瘙癢和關節(jié)腫脹等癥[1]。現(xiàn)代藥理研究表明,青風藤具有抗炎、抑制免疫應答、抗腫瘤、抑制血管生成、抗心律失常、鎮(zhèn)痛、抗溶血等藥理作用[2-5]。目前已從青風藤中分離并鑒定出137種生物堿類成分,以及揮發(fā)油、三萜等其他種類化學成分[6-14]。

    青風藤始載于宋代《圖經(jīng)本草》,于《本草綱目》《植物名實圖考》《本草品匯精要》也有記載[15]。《中國藥典》、《歐洲藥典》和《英國藥典》中均規(guī)定青風藤為防己科植物風藤(Thumb.) Rehd.et Wils.和毛青藤(Thumb.) Rehd.et Wils.var.Rehd.et Wils.的干燥藤莖,但在《日本藥典》和《韓國藥典》中,根莖和藤莖均可作為藥用部位[1, 16-19]。前期產(chǎn)地、市場調研發(fā)現(xiàn),青風藤根莖和根中主要藥效成分青藤堿含量較藤莖高,目前市場上青風藤根莖、藤莖和根混用問題嚴重。《中國藥典》2020年版中以青藤堿含量作為青風藤質量控制的標準,文獻中也多采用類似做法[20-22]。但中藥作為一種復雜體系,化學成分多樣,單一成分的含量測定難以全面控制青風藤藥材的質量。指紋圖譜信息豐富,能夠對藥材質量進行全面反映,被國內(nèi)外用作天然藥物質量控制的有效方法,化學模式識別是確定質量標志物的重要方法[23],因此本實驗使用化學模式識別方法分析了不同藥用部位和產(chǎn)地的青風藤指紋圖譜信息,結合藥理作用等確定了青風藤的質量標志物,并建立了青風藤的指紋圖譜和含量測定方法,以期更為全面地控制青風藤的質量,為區(qū)分和修正青風藤藥用部位提供參考。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器與軟件

    Waters 2695型高效液相色譜儀,配備2998型PDA檢測器(美國Waters公司),BGZ-140型電熱鼓風干燥箱(上海博訊醫(yī)療生物儀器股份有限公司),WB400US型超聲清洗機(上海望標儀器有限公司),ME55型電子天平(瑞士Metter-toledo公司),TG16-WS型離心機(湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司),JK-200DB型數(shù)控超聲波清洗器(安徽合肥金尼克機械制造有限公司),Milli-Q型超純水系統(tǒng)(美國Millipore公司)。

    采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2012版)》計算青風藤色譜指紋圖譜相似度;采用SIMCA-P(V 14.1)數(shù)據(jù)處理軟件對指紋圖譜進行數(shù)據(jù)處理。

    1.2 試劑及材料

    對照品青藤堿(批號110774-201808)購自中國食品藥品檢定研究院,木蘭花堿(批號P23J11L119379)購自上海源葉生物科技有限公司,質量分數(shù)大于98%。

    甲醇、乙醇,購自國藥集團化學試劑有限公司,乙腈購自美國天地有限公司,氨水購自阿拉丁科技(中國)有限公司,甲酸銨購自上海易恩化學技術有限公司,超純水由Milli-Q型超純水系統(tǒng)制備。

    青風藤藥材均采集于青風藤主產(chǎn)區(qū),并經(jīng)天津中醫(yī)藥大學王春華副研究員鑒定青風藤樣品均為防己科植物青藤(Thunb.) Rehd.et Wils.或毛青藤(Thunb.) Rehd.et Wils.var.Rehd.et Wils,樣品信息見表1。

    表1 樣品信息

    2 方法與結果

    2.1 指紋圖譜的建立

    2.1.1 對照品溶液的制備 分別取對照品青藤堿5.70 mg與木蘭花堿5.92 mg置于5 mL量瓶中,加甲醇至刻度,即得青藤堿與木蘭花堿的混合對照品儲備液。

    2.1.2 供試品溶液的制備 精密稱取過50目藥篩的本品粉末約0.5 g,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇20 mL,密塞,超聲處理20 min(功率200 W,頻率40 kHz),濾過,并用70%乙醇20 mL沖洗濾渣,合并濾液與洗液,60 ℃下回收溶劑至干,殘渣加甲醇溶解,轉移至20 mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,離心取上清液,即得。

    2.1.3 色譜條件 Waters 2695液相色譜儀;色譜柱:Waters XBrige C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動相為水(10 mmol/L甲酸銨,用氨水調節(jié)pH至10.0,A)-乙腈(B),梯度洗脫,0~15 min,5%~15% B;15~30 min,15%~20% B;30~37 min,20%~21% B;37~45 min,21% B;45~50 min,21%~30% B;50~60 min,30%~95% B。體積流量1.0 mL/min;檢測波長262 nm;柱溫25 ℃;進樣量5 μL。

    2.1.4 精密度試驗 精密稱取過50目藥篩的本品粉末約0.5 g(樣品編號為S19),照“2.1.2”項下條件提取樣品,按“2.1.3”項下色譜條件連續(xù)進樣6次,以青藤堿為參照峰,計算3個共有峰相對保留時間RSD小于0.1%,相對峰面積RSD小于1%,表明儀器精密度良好。

    2.1.5 穩(wěn)定性試驗 精密稱取過50目藥篩的青風藤粉末約0.5 g(樣品編號為S19),按照“2.1.2”項下條件提取樣品,分別于制備后0、2、4、8、13、24 h按“2.1.3”項下色譜條件進樣,以青藤堿為參照峰,計算3個共有峰相對保留時間RSD小于0.1%,相對峰面積RSD小于1.5%。

    2.1.6 重復性試驗 精密稱取過50目藥篩的同一批青風藤藥材粉末6份(樣品編號為S19),每份約0.5 g,按照“2.1.2”項下條件提取樣品,按“2.1.3”項下色譜條件分別進樣,以青藤堿為參照峰,計算3個共有峰相對保留時間RSD小于0.1%,相對峰面積RSD小于3.0%。

    2.1.7 指紋圖譜的建立及相似度評價 精密稱取過50目藥篩的74批不同產(chǎn)地及部位的青風藤藥材粉末,每批約0.5 g,按照“2.1.2”項下方法制備供試液,按“2.1.3”項下色譜條件進樣,記錄74批青風藤藥材色譜圖,圖1為空白、青藤堿與木蘭花堿混標和編號為S19的青風藤樣品色譜圖。將實驗所得青風藤液相色譜數(shù)據(jù)導入《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)(2012版)》進行分析。將S19號樣品設置為青風藤指紋圖譜的參照圖譜,時間窗口設置為0.5,采用中位數(shù)生成對照圖譜,青風藤液相色譜指紋圖譜中5和20號色譜峰為共有峰,使用對照品對色譜圖中色譜峰進行指認,5號色譜峰為木蘭花堿,20號色譜峰為青藤堿,青風藤色譜指紋圖譜相對保留時間RSD小于2.59%,說明74批青風藤樣品色譜峰保留時間較穩(wěn)定,74批青風藤樣品色譜峰相對峰面積RSD差別較大,最高為135.46%,表明74批青風藤樣品質量相差較大。為方便觀察,分別以S19、S53和S71 3批次樣品為參照圖譜,生成青風藤藤莖、根莖和根的指紋圖譜,如圖2~4所示。

    圖1 空白、混合對照品、青風藤樣品的液相色譜圖

    圖2 30批青風藤藤莖的液相色譜指紋圖譜

    圖3 34批青風藤根莖的液相色譜指紋圖譜

    圖4 10批青風藤根的液相色譜指紋圖譜

    2.1.8 正交偏最小二乘判別分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA) OPLS-DA是在偏最小二乘判別分析(partial least squares discriminant analysis,PLS-DA)基礎上發(fā)展出的算法,相對于PLS-DA,OPLS-DA將變量中系統(tǒng)標量分為同線性相關和同正交的2部分,隨正交變異組分的增加,可增加解釋性、減少誤差[24-27]。

    為尋找青風藤不同部位的質量差異成分,將74批青風藤樣品指紋圖譜數(shù)據(jù)導入SIMCA-P(V 14.1)進行OPLS-DA。根據(jù)先驗知識將青風藤按部位分類,進行OPLS-DA,并對不同部位青風藤的OPLS-DA結果進行優(yōu)化,當使用3個主成分時所得OPLS-DA結果最好,如圖5所示,從圖中可知,藤莖與根莖聚類趨勢明顯,根的內(nèi)部質量差異較大,但也能聚為一類。不同部位青風藤OPLS-DA的分類變量的解釋程度參數(shù)(2)為0.884,模型預測參數(shù)(2)為0.597,表明模型的擬合效果和預測能力滿意。使用SIMCA-P(V 14.1)軟件得到青風藤不同部位OPLS-DA的VIP值條形圖,如圖6所示。

    圖5 不同部位的青風藤樣品OPLS-DA得分圖

    圖6 不同部位的青風藤樣品OPLS-DA的VIP圖

    為尋找不同產(chǎn)地青風藤的質量差異成分,將74批青風藤樣品指紋圖譜數(shù)據(jù)導入SIMCA-P(V 14.1)進行OPLS-DA。首先根據(jù)先驗知識將青風藤按產(chǎn)地分為5類,進行OPLS-DA,并對不同產(chǎn)地青風藤OPLS-DA的參數(shù)進行優(yōu)化,當使用4個主成分時所得OPLS-DA結果最好,結果如圖7所示,從圖中可知陜西、貴州和湖南的青風藤樣品可以分別聚為一類,且組間差異較小,安徽與湖北的青風藤樣品與其他產(chǎn)地青風藤樣品分離趨勢明顯,但安徽與湖北的青風藤樣品不能分別聚為一類,而是安徽與湖北2個產(chǎn)地的青風藤樣品聚集為一類。經(jīng)調研發(fā)現(xiàn)安徽與湖北青風藤采集地的緯度接近,安徽青風藤采集地的緯度為北緯 30°~36°,湖北青風藤采集地的緯度為北緯 27°~30°,安徽與湖北兩地緯度相近可能是這2個產(chǎn)地青風藤品質較為相近的原因。不同產(chǎn)地青風藤OPLS-DA的分類變量的解釋程度參數(shù)(2)為0.678,模型預測參數(shù)(Q2)為0.531,表明模型的擬合效果和預測能力滿意。使用SIMCA-P(V 14.1)軟件得到不同產(chǎn)地青風藤OPLS-DA的VIP值條形圖,結果如圖8所示。

    圖7 不同產(chǎn)地的青風藤樣品OPLS-DA得分圖

    2.1.9 指標成分選擇 由圖6可知,青風藤不同部位判別分析的VIP值大于1的共有峰有1個,保留時間為44.41 min(20號色譜峰);由圖8可知,不同產(chǎn)地青風藤判別分析VIP值大于1的共有峰有2個,保留時間為44.41 min(20號峰)和9.73 min(5號峰),經(jīng)對照品比對保留時間為9.73 min(5號峰)的色譜峰為木蘭花堿,保留時間為44.41 min(20號峰)的色譜峰為青藤堿。查閱文獻可知青藤堿為青風藤的主要藥效成分,木蘭花堿具有抗炎,抗糖尿病等藥理作用[28],也是青風藤的主要藥效成分之一,綜上考慮,建議選擇青藤堿和木蘭花堿作為青風藤的質量標志物。

    圖8 不同產(chǎn)地的青風藤樣品OPLS-DA的VIP圖

    2.2 含量測定

    2.2.1 對照品溶液制備 同“2.1.1”項下方法。

    2.2.2 供試品溶液制備 同“2.1.2”項下方法。

    2.2.3 色譜條件 同“2.1.3”項下方法。

    2.2.4 線性關系考察 取“2.1.1”項下制備的對照品儲備液,以甲醇依次稀釋2、4、8、16、32、64倍,按“2.1.3”項下色譜方法進行測定,記錄數(shù)據(jù),以樣品濃度為橫坐標(),以峰面積為縱坐標(),進行線性回歸,得回歸方程與相關系數(shù),結果見表2。

    表2 青藤堿與木蘭花堿線性回歸方程及對應的相關系數(shù)

    2.2.5 精密度試驗 精密稱取過50目藥篩的青風藤粉末約0.5 g(樣品編號為S19),按照“2.1.2”項下方法提取樣品,按“2.1.3”項下色譜條件連續(xù)進樣6次,計算木蘭花堿和青藤堿峰面積RSD分別為0.25%和0.38%,表明儀器精密度良好。

    2.2.6 穩(wěn)定性試驗 精密稱取過50目藥篩的青風藤粉末約0.5 g(樣品編號為S19),按照“2.1.2”項下條件提取樣品,分別于制備后的0、2、4、8、12、24 h,按“2.1.3”項下色譜條件進樣,計算木蘭花堿和青藤堿峰面積RSD分別為1.19%和1.73%,表明供試液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.2.7 重復性試驗 精密稱取過50目藥篩的同一批青風藤藥材粉末6份(樣品編號為S19),每份約0.5 g,按照“2.1.2”項下條件提取樣品,按“2.1.3”項下色譜條件分別進樣,計算木蘭花堿和青藤堿峰質量分數(shù)RSD分別為0.70%和0.71%。

    2.2.8 加樣回收率試驗 精密稱取同一批已測定過含量的青風藤樣品粉末6份(樣品編號為S19),每份0.25 g,分別精密加入適量的對照品,按“2.1.2”項下方法提取樣品,按“2.1.3”項下色譜條件進樣,測定木蘭花堿和青藤堿的峰面積,木蘭花堿和青藤堿加樣回收率分別為92.54%和96.44%,RSD分別為1.09%和1.02%。

    2.2.9 樣品測定 精密稱取過50目藥篩的74批青風藤藥材粉末,每批約0.5 g,按照“2.1.2”項下條件制備供試品,按“2.1.3”項下色譜條件分別進樣,計算74批樣品中木蘭花堿和青藤堿的含量。根據(jù)含量測定結果將不同產(chǎn)地及藥用部位的青藤堿和木蘭花堿分別作圖,不同產(chǎn)地及藥用部位青風藤的青藤堿含量如圖10所示,不同產(chǎn)地及藥用部位青風藤的木蘭花堿含量如圖11所示。由圖10可知藥用部位對青藤堿含量影響較大,青風藤根莖與根中的青藤堿含量較藤莖中青藤堿含量高,青藤堿是青風藤的主要有效成分,因此建議將根莖也作為藥用部位,出于可持續(xù)發(fā)展考慮,不建議將根作為青風藤的藥用部位;由圖11可知產(chǎn)地對木蘭花堿含量影響較大,湖北生長的青風藤中木蘭花堿較其他產(chǎn)地高。

    圖10 74批不同部位和產(chǎn)地青風藤中青藤堿含量

    圖11 74批不同部位及產(chǎn)地青風藤中木蘭花堿含量

    3 討論

    3.1 提取方法考察

    實驗考察了甲醇提取、70%乙醇提取、甲醇提取甲醇復溶、甲醇提取70%乙醇復溶、70%乙醇提取甲醇復溶、70%乙醇提取70%乙醇復溶共6種樣品提取方法,結果發(fā)現(xiàn)使用甲醇提取、70%乙醇提取、甲醇提取70%乙醇復溶和70%乙醇提取70%乙醇復溶時木蘭花堿前置拖尾均較嚴重,當使用70%乙醇提取甲醇復溶和甲醇提取甲醇復溶時,木蘭花堿對應的色譜峰峰形較好,但70%乙醇較甲醇更加安全且成本更低,因此最終選用70%乙醇提取甲醇復溶作為青風藤樣品的提取方法??疾炝?0%、70%、80%、90%和純乙醇共5種提取溶劑濃度,結果發(fā)現(xiàn)在考察的乙醇濃度中,乙醇濃度越低提取效果越好,但提取方法需要蒸干溶劑,溶劑中水比例越高蒸干越慢,因此選用70%乙醇作為提取溶劑濃度。最終確定青風藤樣品提取方法為精密稱取過50目藥典篩的本品粉末約0.5 g,置具塞錐形瓶中,精密加入70%乙醇20 mL,密塞,超聲處理20 min(功率200 W,頻率40 kHz),濾過,并用70%乙醇20 mL沖洗濾渣,合并濾液與洗液,60 ℃回收溶劑至干,殘渣加甲醇溶解,轉移至20 mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,離心取上清液,即得。

    3.2 色譜條件優(yōu)化

    實驗考察了甲酸水-甲醇、甲酸水-乙腈、乙酸水-甲醇、三乙胺水-甲醇、乙二胺水-甲醇、二乙胺水-乙醇、甲酸銨水-甲醇、甲酸銨水–乙腈等8種流動相體系,結果發(fā)現(xiàn)甲酸水體系青藤堿分離效果不好且拖尾嚴重,三乙胺水/乙二胺水/二乙胺水–甲醇體系色譜峰峰形好,但色譜峰的信息較少,且對色譜柱損傷大,甲酸銨水-乙腈體系色譜峰豐富、峰形好,故選用甲酸銨水-乙腈做流動現(xiàn)象;考察了262、267、277、283 nm 4個不同的檢測波長,其中262 nm和283 nm是通過閱讀文獻和藥典選擇的,267 nm和277 nm是通過全波長掃描選擇說的,實驗結果表明使用262 nm和267 nm作為檢測波長時色譜峰較多,但使用267 nm作為檢測波長時木蘭花堿色譜峰的分離度不穩(wěn)定,所以最后選擇262 nm作為青風藤的檢測波長;考察了pH=9.0、9.5、10.0 3種不同的流動相pH,結果表明pH=10.0時青藤堿色譜峰較pH=9.5和pH=9.0時青藤堿色譜峰分離更好,所以選用pH=10.0作為本實驗流動相水相的pH值;考察了20、25、30 ℃3種不同的色譜柱柱溫,溫度為25 ℃時青藤堿分離效果較好;考察了5、10、15 μL 3種不同進樣量,結果表明只有進樣量為5 μL時木蘭花堿色譜峰較好,增加進樣量時木蘭花堿色譜峰前置拖尾較嚴重,故選用5 μL作為進樣量;通過對比最終選擇檢測波長262 nm、10 mmol/L甲酸銨水溶液,氨水調節(jié)pH=10.0乙腈作為流動相體系、柱溫25 ℃、進樣量5 μL作為本實驗的色譜條件。

    4 小結

    本課題組建立了青風藤的液相色譜指紋圖譜和含量測定方法測定了74批青風藤藥材,使用化學計量學方法對不同產(chǎn)地和藥用部位的青風藤進行區(qū)分,根據(jù)差異成分選擇了青藤堿和木蘭花堿作為青風藤的質量標志成分對青風藤進行質量控制。但本實驗僅考慮了青藤堿和木蘭花堿2個藥效成分,未能全面考慮青風藤的藥效成分。因此今后將進一步建立基于質譜的青風藤分子指紋圖譜,獲得更全面的青風藤化學成分信息,并使用化學計量學方法和網(wǎng)絡藥理學方法進行分析,以判別不同產(chǎn)地、不同藥用部位和不同基原青風藤、篩選差異成分和潛在藥效成分,更合理地選擇青風藤的質量標志成分,為青風藤的質量控制和質量標準建立提供參考。

    利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

    [1] 中國藥典 [S].一部.2020: 253.

    [2] Zhu L H, Hao Y R, Guan H J,.Effect of sinomenine on vascular smooth muscle cell dedifferentiation and neointima formation after vascular injury in mice [J]., 2013, 373(1/2): 53-62.

    [3] 王璽, 張智勇, 仇萍, 等.青風藤、青藤堿及其相關制劑的研究進展 [J].中國藥學雜志, 2021, 56(2): 85-93.

    [4] 劉強, 周莉玲, 李銳.青藤堿的研究概況 [J].中草藥, 1997, 28(4): 247-249.

    [5] 程維明.青風藤化學成分及青藤堿大鼠體內(nèi)代謝研究[D].沈陽: 沈陽藥科大學, 2005.

    [6] Wang X L, Jin H Z, Li Z X,.8-Demethoxyrunanine from[J]., 2007, 78(7/8): 593-595.

    [7] 宋永彬, 程維明, 曲戈霞, 等.青風藤化學成分的分離與鑒定 [J].沈陽藥科大學學報, 2007, 24(2): 79-81.

    [8] Jin H Z, Wang X L, Wang H B,.Morphinane alkaloid dimers from[J]., 2008, 71(1): 127-129.

    [9] 李艷紅.四種藥用植物次生代謝物化學成分及生物活性研究 [D].昆明: 昆明理工大學, 2015.

    [10] 楊麗娟.青風藤和地不容的化學成分及生物活性研究 [D].昆明: 云南大學, 2019.

    [11] Wang L J, Jiang Z M, Xiao P T,.Identification of anti-inflammatory components inbased on spectrum-effect relationship and chemometric methods [J]., 2019, 167: 38-48.

    [12] 劉丙蕊.青風藤中生物堿的提取分離和活性研究 [D].楊凌: 西北農(nóng)林科技大學, 2011.

    [13] 曾秋初.青風藤及其混淆品稱鉤風的本草考證與鑒別 [J].中草藥, 1991, 22(1): 42-45.

    [14] European Pharmacopoeia Commission.European Pharmacopoeia [S].Strasbourg: European Directorate for the Quality of Medicines & Health Care, 2016.

    [15] British Pharmacopoeia Commission Office.European Pharmacopoeia [S].London: The Stationery Office, 2007.

    [16] Japanese Pharmacopoeia Committee.The Japanese Pharmacopoeia [S].Tokyo: 2016.

    [17] Korean Pharmacopoeia Committee.The Korean Pharmacopoeia [S].Chungcheongbuk-do: The Ministry of Food and Drug Safety, 2013.

    [18] Jiang Z M, Wang L J, Pang H Q,.Rapid profiling of alkaloid analogues inby an integrated characterization strategy and quantitative analysis [J]., 2019, 174: 376-385.

    [19] 沙振方, 孫文基.青風藤中青藤堿的HPLC法測定 [J].中藥材, 1989, 12(10): 36-37.

    [20] 王慧, 葉卿, 趙亮, 等.反相離子對色譜法測定青風藤中青藤堿的含量 [J].第二軍醫(yī)大學學報, 2010, 31(2): 193-195.

    [21] 孫立麗, 王萌, 任曉亮.化學模式識別方法在中藥質量控制研究中的應用進展 [J].中草藥, 2017, 48(20): 4339-4345.

    [22] Trygg J, Wold S.Orthogonal projections to latent structures (O-PLS) [J]., 2002, 16(3): 119-128.

    [23] 漆小泉、王玉蘭、陳曉亞.植物代謝組學:方法與應用[M].北京: 化學工業(yè)出版社, 2011: 154.

    [24] Trygg J.Prediction and spectral profile estimation in multivariate calibration [J]., 2004, 18(34): 166-172.

    [25] 王俊, 許多寬, 肖勇, 等.基于化學指標的煙葉產(chǎn)區(qū)正交偏最小二乘判別分析 [J].中國煙草科學, 2017, 38(1): 91-96.

    [26] Xu T, Kuang T T, Du H,.Magnoflorine: A review of its pharmacology, pharmacokinetics and toxicity [J]., 2020, 152(5): 1-16.

    Quality control ofbased on chromatographic fingerprints and content determination

    REN Ming-jun1, 2, HU Yun-fei1, 2, ZHU Yong-bo3, QIU Ping3, LI Zheng1, 2, LI Wen-long1, 2

    1.College of Pharmaceutical Engineering of TCM, Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193, China 2.State key Laboratory of Component-based Chinese Medicine, Tianjin 301617, China 3.Hunan Zhengqing Pharmaceutical Group Co., Ltd., Huaihua 418000, China

    To establish the HPLC fingerprints and content determination methods to control the quality of Qingfengteng () more comprehensively and reasonably.The HPLC fingerprints method ofwas established, and 74 batches ofwere analyzed.The similarities of 74 batches ofwere evaluated using the similarity evaluation software of traditional Chinese medicine chromatographic fingerprint (2012 Edition), and the common peaks were determined.SIMCA-P (V 14.1) was used to reduce the dimension of HPLC fingerprints of 74 batches of, and the orthogonal partial least squares discriminant analysis (OPLS-DA) was carried out.From the active substances, the common components which have a great influence on the origins and medicinal parts ofwere selected as the quality control components of, and their content was determined and the determination results were analyzed.The results of methodological verification showed that the method was suitable for fingerprint and content determination of.After chemometrics analysis and literature research, magnoflorine and sinomenine were selected as the quality markers of, and the contents of sinomenine and magnoflorine in 74 batches ofwere determined.The results showed that the medicinal parts had a great influence on the content of sinomenine, and the origins had a great influence on the content of magnoflorine in.The content of sinomenine in the rhizome and root ofwas higher than in the stem, and the content of magnoflorine in the samples from Hubei Province were higher than other origins.The chromatographic peak resolution, tailing factor, accuracy, linearity, precision, stability, reproducibility and other parameters of the established HPLC fingerprints and content determination methods meet the requirements of Chinese Pharmacopoeia (2020 edition), which can be used for accurate qualitative and quantitative analysis of, and are suitable for the quality control of.

    ; sinomenine; magnoflorine; OPLS-DA; HPLC fingerprints

    R286.2

    A

    0253 - 2670(2022)05 - 1338 - 07

    10.7501/j.issn.0253-2670.2022.05.007

    2021-08-09

    天津市科技計劃項目(20ZYJDJC00090);國家重點研發(fā)計劃資助項目(2018YFC1707904,2018YFC1707000);正清風痛寧(青風藤)全產(chǎn)業(yè)鏈關鍵技術研究項目(2020SK1020)

    任明軍,男,碩士研究生,主要從事中藥質量控制技術研究。

    通信作者:李文龍,男,副研究員,博士生導師,主要從事中藥制藥過程分析技術研究。E-mail: wshliwenlong@126.com

    [責任編輯 時圣明]

    猜你喜歡
    青風藤木蘭花青藤
    減字木蘭花·乙亥清秋
    木蘭花開 香飄四海
    華人時刊(2020年13期)2020-09-25 08:21:54
    知是荷香慢墨香 從「青藤白陽」到海上畫派
    紫禁城(2020年6期)2020-07-24 09:24:24
    三葉青藤正丁醇部位化學成分的研究
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:08
    減字木蘭花·詠犬
    減宇木蘭花·立春
    復方青風藤巴布劑基質處方的優(yōu)化
    中成藥(2017年9期)2017-12-19 13:34:51
    青風藤水煎液對蟾蜍坐骨神經(jīng)干電生理的影響*
    青藤歡笑
    學生天地(2017年10期)2017-05-17 05:50:32
    青風藤功效與常用驗方
    午夜福利在线观看免费完整高清在| 女人久久www免费人成看片| 自线自在国产av| 亚洲欧美一区二区三区国产| 91精品伊人久久大香线蕉| 午夜福利视频精品| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲国产最新在线播放| 热99国产精品久久久久久7| 一二三四在线观看免费中文在| 水蜜桃什么品种好| 亚洲三区欧美一区| 最近2019中文字幕mv第一页| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 欧美精品国产亚洲| 精品午夜福利在线看| 五月伊人婷婷丁香| 国产成人精品久久久久久| 香蕉丝袜av| 满18在线观看网站| 久久免费观看电影| 2022亚洲国产成人精品| 2022亚洲国产成人精品| 美女主播在线视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 久久这里只有精品19| 欧美bdsm另类| 少妇人妻久久综合中文| 精品国产一区二区久久| 亚洲国产av影院在线观看| 女人精品久久久久毛片| 中国三级夫妇交换| 精品久久蜜臀av无| 高清av免费在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 最新中文字幕久久久久| 亚洲欧洲国产日韩| 日韩三级伦理在线观看| 丰满乱子伦码专区| 日本爱情动作片www.在线观看| 看免费av毛片| 国产免费视频播放在线视频| 亚洲成人手机| 亚洲四区av| 最近手机中文字幕大全| 美国免费a级毛片| 日韩 亚洲 欧美在线| 性色avwww在线观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| 99九九在线精品视频| 老司机影院成人| 韩国av在线不卡| 乱人伦中国视频| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 欧美激情 高清一区二区三区| 久久精品国产亚洲av涩爱| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 熟女电影av网| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲人成电影观看| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲成国产人片在线观看| 亚洲内射少妇av| 日韩成人av中文字幕在线观看| 91精品国产国语对白视频| 嫩草影院入口| 五月天丁香电影| 亚洲三区欧美一区| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产毛片在线视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产成人精品久久二区二区91 | 久久亚洲国产成人精品v| 精品酒店卫生间| 免费观看av网站的网址| freevideosex欧美| 精品国产乱码久久久久久小说| 男女边吃奶边做爰视频| av在线播放精品| 日韩 亚洲 欧美在线| 午夜影院在线不卡| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲欧美精品自产自拍| 中文欧美无线码| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 夫妻午夜视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产成人aa在线观看| 老熟女久久久| 久久久欧美国产精品| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲av成人精品一二三区| 成人影院久久| 久久午夜福利片| 国产精品久久久久久精品电影小说| 久久久久久人妻| 免费看不卡的av| 丝袜美腿诱惑在线| 日本-黄色视频高清免费观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲 欧美一区二区三区| 下体分泌物呈黄色| 国产爽快片一区二区三区| 国产精品不卡视频一区二区| 色网站视频免费| 亚洲精品,欧美精品| 一级毛片 在线播放| 久久久久久久精品精品| 亚洲国产精品成人久久小说| 韩国精品一区二区三区| 宅男免费午夜| 满18在线观看网站| 精品国产乱码久久久久久小说| av一本久久久久| 亚洲一区中文字幕在线| 飞空精品影院首页| 男女无遮挡免费网站观看| 国产一区二区激情短视频 | 丝袜美腿诱惑在线| 街头女战士在线观看网站| 国产成人免费观看mmmm| 9色porny在线观看| 老司机影院成人| 自线自在国产av| 黄片小视频在线播放| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产精品国产三级专区第一集| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲成人手机| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 尾随美女入室| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 亚洲精品一二三| 成年美女黄网站色视频大全免费| 少妇人妻 视频| 日本av手机在线免费观看| av不卡在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 丝袜美腿诱惑在线| 观看av在线不卡| 精品少妇久久久久久888优播| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美精品高潮呻吟av久久| 午夜福利在线免费观看网站| 国产精品成人在线| 国产亚洲欧美精品永久| 亚洲国产最新在线播放| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 欧美日韩综合久久久久久| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产黄色免费在线视频| 国产成人精品婷婷| 亚洲精品久久午夜乱码| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲av国产av综合av卡| 色哟哟·www| 亚洲欧美清纯卡通| 久久久久久久大尺度免费视频| a级片在线免费高清观看视频| 免费大片黄手机在线观看| 成人毛片60女人毛片免费| 母亲3免费完整高清在线观看 | 嫩草影院入口| 另类精品久久| 亚洲男人天堂网一区| 高清黄色对白视频在线免费看| 成人国产av品久久久| 午夜福利网站1000一区二区三区| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲,一卡二卡三卡| 如何舔出高潮| 大香蕉久久网| 街头女战士在线观看网站| 丰满迷人的少妇在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 美女午夜性视频免费| 成年美女黄网站色视频大全免费| 日本wwww免费看| 啦啦啦在线免费观看视频4| 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美少妇被猛烈插入视频| 国产成人精品婷婷| 午夜91福利影院| 国产精品久久久久久久久免| 人妻一区二区av| 交换朋友夫妻互换小说| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 91午夜精品亚洲一区二区三区| 高清av免费在线| a 毛片基地| 美女中出高潮动态图| 制服丝袜香蕉在线| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲综合精品二区| 成年动漫av网址| 久久久亚洲精品成人影院| 国产97色在线日韩免费| 精品卡一卡二卡四卡免费| 18禁动态无遮挡网站| 另类亚洲欧美激情| 永久免费av网站大全| 少妇的丰满在线观看| 国产在视频线精品| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产成人精品在线电影| 亚洲伊人久久精品综合| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 97精品久久久久久久久久精品| 日韩一区二区视频免费看| 欧美精品一区二区大全| 亚洲国产欧美在线一区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 国产色婷婷99| 久久99一区二区三区| 少妇的丰满在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 亚洲av在线观看美女高潮| 丝袜脚勾引网站| 日韩精品免费视频一区二区三区| 中文字幕人妻丝袜制服| 色吧在线观看| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 欧美成人精品欧美一级黄| 在线精品无人区一区二区三| 国产黄频视频在线观看| 国产精品欧美亚洲77777| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲图色成人| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产精品一国产av| 亚洲 欧美一区二区三区| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 大香蕉久久网| 亚洲欧洲国产日韩| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 美女国产高潮福利片在线看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 天天操日日干夜夜撸| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 欧美国产精品va在线观看不卡| 青春草视频在线免费观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 色哟哟·www| 青春草国产在线视频| 欧美+日韩+精品| 26uuu在线亚洲综合色| 国产成人a∨麻豆精品| 久久人人97超碰香蕉20202| 成人免费观看视频高清| 26uuu在线亚洲综合色| 毛片一级片免费看久久久久| 国产成人精品一,二区| 久久精品国产亚洲av高清一级| www.精华液| 99热全是精品| 老汉色av国产亚洲站长工具| 制服诱惑二区| 国产免费一区二区三区四区乱码| 91成人精品电影| 久久99一区二区三区| 伦理电影免费视频| 97精品久久久久久久久久精品| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 亚洲av男天堂| 久久久久精品性色| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 成人手机av| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美日韩亚洲高清精品| 99国产综合亚洲精品| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 少妇的逼水好多| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 综合色丁香网| www.自偷自拍.com| 久久国产精品大桥未久av| 2018国产大陆天天弄谢| 97精品久久久久久久久久精品| 国产精品二区激情视频| 日本vs欧美在线观看视频| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲精品一二三| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久久久网色| 另类亚洲欧美激情| av免费观看日本| 亚洲国产精品一区三区| 国产成人欧美| 久久女婷五月综合色啪小说| av网站在线播放免费| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产毛片在线视频| 亚洲av成人精品一二三区| 一区二区三区乱码不卡18| 国产在线一区二区三区精| 伊人亚洲综合成人网| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲精品在线美女| videosex国产| 午夜激情久久久久久久| 日韩 亚洲 欧美在线| 免费大片黄手机在线观看| 美女国产视频在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲天堂av无毛| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 少妇精品久久久久久久| 中文天堂在线官网| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲精品第二区| 尾随美女入室| 五月伊人婷婷丁香| av电影中文网址| 国产av一区二区精品久久| 日本色播在线视频| 中文字幕av电影在线播放| 波多野结衣av一区二区av| 国产福利在线免费观看视频| 搡老乐熟女国产| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 久久人妻熟女aⅴ| 伦理电影免费视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 精品国产乱码久久久久久男人| 777米奇影视久久| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲视频免费观看视频| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲精品av麻豆狂野| 999久久久国产精品视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 美女xxoo啪啪120秒动态图| av线在线观看网站| 国产福利在线免费观看视频| 有码 亚洲区| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 岛国毛片在线播放| 大片电影免费在线观看免费| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 日韩免费高清中文字幕av| 日韩电影二区| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久精品国产综合久久久| 精品人妻在线不人妻| 成人国产麻豆网| 欧美日韩av久久| 女性生殖器流出的白浆| 国产亚洲欧美精品永久| 蜜桃国产av成人99| 国产熟女欧美一区二区| 久久ye,这里只有精品| 99久久人妻综合| 在线看a的网站| 一区二区三区四区激情视频| 国产又爽黄色视频| 日韩一本色道免费dvd| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲精品视频女| 精品少妇内射三级| 少妇被粗大的猛进出69影院| 精品国产一区二区久久| 国产 精品1| 亚洲精品美女久久av网站| 午夜久久久在线观看| 涩涩av久久男人的天堂| 国产一区二区三区av在线| 五月天丁香电影| 久久久久精品人妻al黑| av网站在线播放免费| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 成人毛片60女人毛片免费| 成人漫画全彩无遮挡| 久久精品国产a三级三级三级| 国产探花极品一区二区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 亚洲四区av| 美女中出高潮动态图| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产精品熟女久久久久浪| 免费大片黄手机在线观看| 欧美少妇被猛烈插入视频| 新久久久久国产一级毛片| 一区二区三区精品91| 免费日韩欧美在线观看| 黄色配什么色好看| 成人国产av品久久久| 极品人妻少妇av视频| 性色av一级| 寂寞人妻少妇视频99o| 日日爽夜夜爽网站| 欧美变态另类bdsm刘玥| 青草久久国产| 亚洲综合精品二区| 成年人免费黄色播放视频| 97在线视频观看| 日日啪夜夜爽| 亚洲精品,欧美精品| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲,欧美精品.| 亚洲精品乱久久久久久| 国产精品蜜桃在线观看| 永久免费av网站大全| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久精品aⅴ一区二区三区四区 | 一本大道久久a久久精品| 午夜福利视频在线观看免费| 免费高清在线观看日韩| 亚洲天堂av无毛| 综合色丁香网| 五月天丁香电影| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 久久久久久人人人人人| 国产成人午夜福利电影在线观看| 五月开心婷婷网| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 一区在线观看完整版| 久久精品久久久久久久性| 两个人免费观看高清视频| 五月伊人婷婷丁香| 99热全是精品| 中文天堂在线官网| 亚洲四区av| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 黄色毛片三级朝国网站| 国产探花极品一区二区| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产精品免费视频内射| 黄色配什么色好看| 久久午夜综合久久蜜桃| 在线观看免费视频网站a站| 国产国语露脸激情在线看| 婷婷色av中文字幕| 久久99精品国语久久久| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产成人精品久久二区二区91 | 精品久久蜜臀av无| 男人舔女人的私密视频| 欧美xxⅹ黑人| www.熟女人妻精品国产| 在线观看人妻少妇| freevideosex欧美| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲在久久综合| 搡老乐熟女国产| 一级爰片在线观看| 香蕉国产在线看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 一级,二级,三级黄色视频| a级毛片黄视频| 国产成人精品久久久久久| 性色avwww在线观看| 亚洲中文av在线| 色视频在线一区二区三区| 日韩在线高清观看一区二区三区| 午夜久久久在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲,一卡二卡三卡| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 啦啦啦在线观看免费高清www| 伊人久久国产一区二区| 久久精品亚洲av国产电影网| 一边摸一边做爽爽视频免费| 母亲3免费完整高清在线观看 | 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 成人国产麻豆网| 韩国精品一区二区三区| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 另类精品久久| 大香蕉久久成人网| 亚洲欧美精品综合一区二区三区 | 中文字幕最新亚洲高清| 久久婷婷青草| 国产亚洲欧美精品永久| av在线老鸭窝| 国产精品亚洲av一区麻豆 | 成年动漫av网址| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 乱人伦中国视频| 久久久久精品久久久久真实原创| 黄色 视频免费看| 国产 一区精品| 亚洲精品第二区| 国产黄色免费在线视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产精品 国内视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 人成视频在线观看免费观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 在线天堂最新版资源| 一本久久精品| 欧美最新免费一区二区三区| 国产1区2区3区精品| 国产在线免费精品| 日日爽夜夜爽网站| 欧美激情极品国产一区二区三区| 亚洲色图综合在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 中文字幕av电影在线播放| 岛国毛片在线播放| 久久97久久精品| 久久久久精品人妻al黑| 综合色丁香网| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产激情久久老熟女| 一级爰片在线观看| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 成年女人在线观看亚洲视频| 欧美精品国产亚洲| 精品视频人人做人人爽| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产av一区二区精品久久| 男女高潮啪啪啪动态图| 18+在线观看网站| 亚洲情色 制服丝袜| 国产探花极品一区二区| 日本av手机在线免费观看| 在线精品无人区一区二区三| 精品少妇久久久久久888优播| 99re6热这里在线精品视频| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美激情极品国产一区二区三区| 国产成人免费无遮挡视频| 国产精品av久久久久免费| 欧美人与性动交α欧美软件| 国产成人精品久久久久久| 在线 av 中文字幕| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲精品第二区| 两性夫妻黄色片| 成年av动漫网址| 桃花免费在线播放| av在线老鸭窝| 亚洲综合色网址| 国产av一区二区精品久久| 制服人妻中文乱码| 十八禁网站网址无遮挡| 高清不卡的av网站| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 亚洲欧美清纯卡通| 美女大奶头黄色视频| 国产日韩欧美视频二区| 青草久久国产| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 国产一区二区在线观看av| 午夜福利视频在线观看免费| 午夜久久久在线观看| 熟女av电影| 日日爽夜夜爽网站| 丝袜美腿诱惑在线| 国产 精品1| 久久99精品国语久久久| 超碰97精品在线观看| 搡女人真爽免费视频火全软件| 欧美av亚洲av综合av国产av | 青春草亚洲视频在线观看| 看免费成人av毛片| 久久午夜福利片| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 久久人人97超碰香蕉20202| 一级毛片 在线播放| 男人添女人高潮全过程视频| 国产片内射在线| 久久久久国产网址| 人妻人人澡人人爽人人| 精品人妻偷拍中文字幕| 黄色 视频免费看| 国产97色在线日韩免费| 国产av一区二区精品久久| 精品少妇久久久久久888优播| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 亚洲四区av| 一级,二级,三级黄色视频| 999精品在线视频| 亚洲综合色惰| 日韩一区二区视频免费看| 色视频在线一区二区三区| 色网站视频免费| 欧美精品亚洲一区二区| 国产黄色免费在线视频| 中文字幕制服av| 爱豆传媒免费全集在线观看| 1024香蕉在线观看| 久久 成人 亚洲| 久久精品国产亚洲av高清一级| 亚洲五月色婷婷综合| 少妇被粗大猛烈的视频| 免费少妇av软件| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产av精品麻豆| 狂野欧美激情性bbbbbb| 日韩精品有码人妻一区| 日本91视频免费播放| 欧美另类一区| 美女高潮到喷水免费观看| 高清欧美精品videossex| 亚洲精品自拍成人|