顯微鏡與血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在血小板計(jì)數(shù)中的檢測(cè)作用與影響分析

何少雄 葉旭英

廣東省博羅縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東博羅 516100

顯微鏡與血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在血小板計(jì)數(shù)中的檢測(cè)作用與影響分析

何少雄 葉旭英

廣東省博羅縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東博羅 516100

目的觀察顯微鏡和血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在血小板計(jì)數(shù)檢測(cè)中的結(jié)果差異。方法使用血細(xì)胞分析儀和顯微鏡，嚴(yán)格按規(guī)定操作檢測(cè)標(biāo)本得出結(jié)果，并對(duì)結(jié)果差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)本用血涂片法驗(yàn)證對(duì)照。結(jié)果當(dāng)血小板正常時(shí)，兩種方法的檢測(cè)結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；當(dāng)血小板升高時(shí)，兩種方法的檢測(cè)結(jié)果比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)照血涂片法所測(cè)值與二者都無(wú)相關(guān)性，無(wú)法比較哪種方法更準(zhǔn)確。當(dāng)血小板降低時(shí)，兩種方法的檢測(cè)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；尤其是當(dāng)并發(fā)高脂血癥時(shí)，血涂片驗(yàn)證法與顯微鏡手工法相關(guān)性更高（P＜0.05），血細(xì)胞分析儀法的測(cè)量誤差比較明顯。結(jié)論在血小板計(jì)數(shù)在正常值范圍內(nèi)時(shí)，兩種檢測(cè)方法都很準(zhǔn)確，但前者更加簡(jiǎn)單、方便和迅速；當(dāng)在病理情況下時(shí)，尤其是血小板嚴(yán)重減少和出現(xiàn)形態(tài)改變時(shí)，兩者都會(huì)出現(xiàn)測(cè)量誤差，但顯微鏡手工法相對(duì)準(zhǔn)確些。在臨床檢查時(shí)，先使用細(xì)胞分析儀進(jìn)行定性檢查，若有異常應(yīng)用顯微鏡手工法做重復(fù)檢查，提高結(jié)果準(zhǔn)確性。

血小板計(jì)數(shù)；細(xì)胞分析儀；顯微鏡

血小板參與初期的凝血過程，能促進(jìn)止血和凝血，在止血、傷口愈合、炎癥反應(yīng)、血栓形成和術(shù)中出血等生理和病理過程中有重要作用；并且，血小板計(jì)數(shù)還與多種血液科疾病密切相關(guān)，對(duì)各種血液疾病和其相關(guān)疾病的診斷和鑒別診斷具有重要意義。輸注血小板價(jià)格昂貴，且可能誘發(fā)感染和免疫反應(yīng)，血液病和需要輸注血小板的患者，更需要準(zhǔn)確的血小板實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)來(lái)判斷輸注是否必要。因此，血小板的準(zhǔn)確檢測(cè)有相當(dāng)重要的臨床價(jià)值。筆者所在科室對(duì)自2011年2月～2012年2月期間，來(lái)院體檢的健康人群和有關(guān)疾病就診的患者共400例血液標(biāo)本，對(duì)其中血小板計(jì)數(shù)異常的152例進(jìn)行顯微鏡鏡檢和血細(xì)胞分析儀檢測(cè)[1]，并報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年2月～2012年2月，來(lái)筆者所在醫(yī)院體檢的健康人群和有關(guān)疾病就診治療的患者400例，對(duì)其中血小板計(jì)數(shù)結(jié)果異常的152例患者；其中男78例，女74例；年齡14～79歲，平均（34.2±3.5）歲。所有被檢測(cè)者血液均采用顯微鏡和全自動(dòng)細(xì)胞分析儀兩種方法檢測(cè)。

1.2 儀器和試劑

使用普朗醫(yī)療器械公司生產(chǎn)的XFA6000Intelligent智能化全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀和儀器原廠配套的試劑。顯微鏡（上海光學(xué)儀器廠，萬(wàn)能工具顯微鏡19JC）和草酸銨溶液（上海笛拍化學(xué)品技術(shù)有限公司，×100）[2]。

1.3 方法

血細(xì)胞分析儀法：采用XFA6000 Intelligent智能化全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀，嚴(yán)格按照操作規(guī)范操作，1 h內(nèi)完成待測(cè)標(biāo)本中的血小板、紅細(xì)胞、白細(xì)胞數(shù)測(cè)定。

顯微鏡手工法：取血細(xì)胞分析儀法的同一待測(cè)標(biāo)本20μL，加入0.38 mL草酸胺稀釋液，10 min后顯微鏡下計(jì)數(shù)并計(jì)算血小板數(shù)。

對(duì)兩者之間的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的再用血涂片法進(jìn)行驗(yàn)證對(duì)照。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩種方法檢測(cè)血小板計(jì)數(shù)結(jié)果比較

當(dāng)血小板正常時(shí)，兩種檢測(cè)方法的結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；當(dāng)血小板升高時(shí)，兩者存在較大差距，對(duì)照血涂片法所測(cè)值與二者都無(wú)相關(guān)性，無(wú)法比較哪種方法更準(zhǔn)確。當(dāng)血小板降低時(shí)，血涂片驗(yàn)證法、細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)法與顯微鏡手工法檢測(cè)結(jié)果的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。顯微鏡計(jì)數(shù)法的結(jié)果與血涂片驗(yàn)證值更接近。見表1。

2.2 組間血小板異常檢出率比較

組間兩種方法血小板異常檢出率比較，使用血細(xì)胞分析儀法檢出率高于顯微鏡法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表1 細(xì)胞分析儀法和顯微鏡法血小板計(jì)數(shù)結(jié)果比較（×109/L）

表2 組間計(jì)數(shù)結(jié)果檢出率比較[n（%）]

3 討論

血小板的檢測(cè)是血液分析的重要組成部分，本資料研究中使用的細(xì)胞分析儀使用的是光學(xué)法和阻抗法聯(lián)合對(duì)血小板的數(shù)目及體積進(jìn)行計(jì)數(shù)，并根據(jù)信號(hào)的不同繪出血小板體積分布直方圖。以低角度前向光散射和高角度散射兩個(gè)測(cè)量系統(tǒng)同時(shí)測(cè)量1個(gè)血小板，根據(jù)低角度光轉(zhuǎn)換能量的大小測(cè)量單個(gè)血小板體積與總數(shù)。雖然紅細(xì)胞和血小板的體積差異明顯，按由于兩者所使用的仍然是同一種分析系統(tǒng)，通過設(shè)定閾值將兩者的光電信號(hào)分開，這就不可避免的造成了體積較大的血小板的脈沖信號(hào)進(jìn)入紅細(xì)胞區(qū)，小體積的紅細(xì)胞的脈沖信號(hào)進(jìn)入血小板區(qū)；造成了不可避免的測(cè)量的隨機(jī)誤差?，F(xiàn)在，各大儀器生產(chǎn)商也在積極提升技術(shù)，提高測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。如：掃流技術(shù)、鞘流技術(shù)、浮動(dòng)界標(biāo)技術(shù)、延時(shí)計(jì)數(shù)和擬合曲線等技術(shù)，然而仍然會(huì)有各種隨機(jī)因素影響測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性[3]。

血小板是骨髓中巨核細(xì)胞脫落下的直徑1～8μm的圓盤形的細(xì)胞碎片，成群分布于紅細(xì)胞之間，與紅細(xì)胞體積差異很大，自動(dòng)細(xì)胞分析儀法依據(jù)此來(lái)區(qū)分紅細(xì)胞和血小板。血小板計(jì)數(shù)在正常值為（100～300）×109/L之內(nèi)時(shí)，細(xì)胞分析儀法和顯微鏡法的測(cè)量結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；細(xì)胞分析儀相比于顯微鏡法不僅操作簡(jiǎn)便，快速，相對(duì)準(zhǔn)確，而且不會(huì)由于操作者不同產(chǎn)生較大系統(tǒng)誤差。此時(shí)，全自動(dòng)細(xì)胞分析儀法優(yōu)于顯微鏡手工法。

當(dāng)血小板計(jì)數(shù)＜100×109/L低于正常值時(shí)，可出現(xiàn)出血時(shí)間延長(zhǎng)，皮膚黏膜紫癜，手術(shù)后出血；當(dāng)其數(shù)值低于20×109/L時(shí)，可引起自發(fā)性出血。引起血小板減少的常見原因有：家族遺傳性疾病，血小板生成障礙如再生性障礙性貧血、急性白血病、急性放射疾病等，此時(shí)血小板計(jì)數(shù)明顯降低，剩余的少量血小板也存在情況不等的形態(tài)異常，此外病理狀態(tài)下生成的一些與血小板體積形態(tài)相當(dāng)?shù)念w粒，導(dǎo)致了細(xì)胞分析儀檢測(cè)準(zhǔn)確率的下降。此時(shí)顯微鏡手工法檢測(cè)的準(zhǔn)確率高于細(xì)胞分析儀[4]。

而血小板增多可分為原發(fā)性和特發(fā)性增多，前者主要見于骨髓增生性疾病和家族遺傳性疾病。根據(jù)調(diào)查結(jié)果，此時(shí)顯微鏡法與細(xì)胞分析儀法二者雖存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異但無(wú)法確定哪一個(gè)更可靠，因?yàn)轱@微鏡手工法也可能由于計(jì)數(shù)板面積太小，凝血系數(shù)增加使血小板分布不均都可能導(dǎo)致其結(jié)果的不準(zhǔn)確。

綜上所述，血細(xì)胞分析儀檢測(cè)法和顯微鏡手工檢測(cè)法都存在其局限性和優(yōu)點(diǎn)。在血小板計(jì)數(shù)在正常值范圍內(nèi)時(shí)，兩種檢測(cè)方法都很準(zhǔn)確，但前者更加簡(jiǎn)單、方便和迅速；當(dāng)在病理情況下時(shí)，尤其是血小板嚴(yán)重減少和出現(xiàn)形態(tài)改變時(shí)，兩者都會(huì)出現(xiàn)測(cè)量誤差，但顯微鏡手工計(jì)數(shù)法相對(duì)準(zhǔn)確些[5]。在臨床檢查時(shí)，先使用細(xì)胞分析儀進(jìn)行定性檢查，若有異常應(yīng)用顯微鏡手工法做重復(fù)檢查，提高結(jié)果準(zhǔn)確性。

[1]李永軍.顯微鏡與血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在血小板計(jì)數(shù)中的檢測(cè)作用與影響[J].中外醫(yī)療，2011，30（33）：82.

[2]范欣，張忠亮.血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀血小板計(jì)數(shù)假性降低的原因分析[J].職業(yè)與健康，2005，21（12）：1958-1959.

[3]榮愛國(guó)，馮素萍.自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀與顯微鏡的關(guān)系探討[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，32（1）：86-87.

[4]傅立強(qiáng)，桑列勇，童海明，等.不同血液分析儀測(cè)定機(jī)采血小板計(jì)數(shù)結(jié)果的比較分析 [J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2010，25（10）：794-796.

[5]鞏惠蕓，顧曉菁.相差顯微鏡血小板計(jì)數(shù)法對(duì)血液分析儀測(cè)定“血小板計(jì)數(shù)減少”結(jié)果的復(fù)核作用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2004，19（6）：524，527.

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2095-0616（2012）12-112-02

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