老年糖尿病病人PAF表達(dá)、TXB2及6-K-PGF1α活性改變的臨床研究

王德忠 王剛 陳艷

（1. 滕州市中心人民醫(yī)院 滕州 277500； 2.滕州市洪緒衛(wèi)生院 滕州 277500）

老年糖尿病已成為影響健康的常見(jiàn)病，其并發(fā)癥如冠心病、腦血管病及肢端壞疽等也成為老年人致死、致殘的主要原因之一。本研究從分子水平，結(jié)合臨床觀察，探討老年糖尿病人血中血小板活化因子（PAF）表達(dá)、血栓素 B2(TXB2)、6-酮 -前列腺素 F1α(6-K-PGF1α)等指標(biāo)的改變，旨在探討血栓前狀態(tài)分子標(biāo)志物改變與老年糖尿病人血栓性疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系，為臨床有效地防治提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

PAF測(cè)定采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），試劑盒購(gòu)自上海麥莎生物技術(shù)公司（美國(guó)），試劑盒批內(nèi)CV為5.69%，批間CV為9.37%，儀器為意大利產(chǎn)Alisei酶標(biāo)儀。所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)，并進(jìn)行質(zhì)量控制。

TXB2和6-酮-PGF1α測(cè)定采用放射免疫分析法，試劑購(gòu)自北京北方免疫研究所，批內(nèi)CV分別為6.47%和9.28%，批間CV分別為5.79%和9.12%，用西安凱普公司產(chǎn)10探頭γ-免疫計(jì)數(shù)器測(cè)定，探頭間的誤差小于1%。

1.2 研究對(duì)象

老年糖尿病病人為本院住院和門(mén)診病人，均符合1999年WHO糖尿病標(biāo)準(zhǔn)，共98例，根據(jù)有無(wú)并發(fā)癥將病人分成無(wú)慢性血管性并發(fā)癥組[A組n=49,男性25例、女性24例，年齡65～80歲，平均年齡（69.7±4.9）歲]。有慢性血管性并發(fā)癥組[B組n=49,男性23例、女性26例，年齡65～80歲，平均年齡（71.3±6.2）歲]。

健康對(duì)照組（C組）選取體檢中心體檢健康者，均無(wú)高血壓病、糖尿病、高血脂及心、腦、肝、腎和肺等臟器疾病，無(wú)出血性和血栓性疾病史，共50名，男、女各25名，年齡65～80歲，平均年齡（70.2±5.6）歲。

1.3 研究方法

入選條件：98例病人在抽血前均繼續(xù)維持原降糖治療（包括胰島素、磺脲類(lèi)藥物或α糖苷酶抑制劑），凡在試驗(yàn)前服用阿斯匹林、潘生丁、消炎痛等抗凝抗纖溶藥物及雙胍類(lèi)降糖藥、ACEI類(lèi)藥物者均不可入選。

觀察指標(biāo)：血糖、血脂、肝功、腎功、血常規(guī)、尿常規(guī)、PAF、血漿 TXB2和 6-酮 -PGF1α。

取血時(shí)間及方法：1）PAF測(cè)定 于清晨空腹時(shí)用一次性自動(dòng)定量抽血器（武漢智源現(xiàn)代醫(yī)療用品有限公司生產(chǎn)），由同一實(shí)驗(yàn)員從肘靜脈采血，取2 ml血注入肝素鈉抗凝管中，抽血后顛倒混勻2次，立即分離血漿（4℃離心，半徑18 cm，3 500 rpm，離心8～10 min）取血漿放入-30 ℃保存，集中檢測(cè)，保存時(shí)間不超過(guò)3個(gè)月。2）血漿TXB2和6-酮-PGF1α測(cè)定 空腹血1.8 ml放入0.2 ml EDTA-Na2的試管中混勻，立即分離血漿（4 ℃離心，半徑18 cm，3 500 rpm，離心8～10 min）取血漿放入-30 ℃保存，集中檢測(cè)，保存時(shí)間不超過(guò)3個(gè)月。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果

2.1 入選病人情況

入選病例人口學(xué)及相關(guān)資料見(jiàn)表1，病人在性別、年齡、體重、BMI、血壓等方面，三組之間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p >0.05）。A組與B組在血糖、血脂、HbA1c方面無(wú)明顯差異（p >0.05）。

表1 病人一般情況比較（ ±s）

表1 病人一般情況比較（ ±s）

病人一般情況 A組（49例） B組（49例） C組（50例）性別比（男/女） 25/24 25/24 25/25年齡（歲） 69.7±4.9 71.3±6.2 70.2±5.6體重（kg） 70.8±7.8 71.6±8.1 72.2±7.9 BMI（kg/m2） 27.4±1.4 26.7±1.6 25.9±1.3收縮壓(mm-Hg) 138.8±11.7 136.9±10.8 137.6±9.6舒張壓(mm-Hg) 71.2±6.8 69.6±8.2 70.1±7.8空腹血糖 11.70±1.12 11.92±0.99 5.53±0.81早餐后2 h血糖 15.55±1.87 15.86±1.51 7.21±0.33午餐后2 h血糖 15.22±1.71 15.49±1.12 7.33±0.54晚餐后2 h血糖 15.46±1.74 15.91±1.13 7.20±0.58 HbA1c 12.67±1.75 12.89±1.87 5.34±0.61甘油三酯 3.27±1.01 3.52±1.23 1.68±0.34總膽固醇 5.96±1.89 5.87±1.68 4.98±0.46

2.2 各組臨床指標(biāo)觀察

與對(duì)照組相比，老年糖尿病病人的血漿PAF、TXB2及6-K-PGF1α活性明顯升高。有慢性血管性并發(fā)癥老年糖尿病病人較無(wú)并發(fā)癥病人升高更明顯（見(jiàn)表2）。

3 討論

老年糖尿病是最常見(jiàn)的疾病之一，易并發(fā)心、腦血管等血栓性疾病，如急性冠脈綜合征、腦梗死等，一旦發(fā)生，治療效果不佳，給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重的負(fù)擔(dān)，故對(duì)其有效預(yù)防成為近年來(lái)醫(yī)學(xué)界的研究熱點(diǎn)，并傾向于用血栓前狀態(tài)（PTS）對(duì)是否發(fā)生血栓作出預(yù)測(cè)[1]。PTS是指機(jī)體可能發(fā)生血栓形成的狀態(tài)，即纖維蛋白產(chǎn)生前的狀態(tài)。血栓形成是在血管內(nèi)皮細(xì)胞、血小板凝血、抗凝、纖溶系統(tǒng)以及血液流變學(xué)等多種因素改變的綜合作用下發(fā)生的，這些因素在血栓形成之前，可產(chǎn)生不同程度的變化[2]。研究表明，只有多種因素同時(shí)改變或某一種因素有嚴(yán)重改變時(shí)，才能形成血栓前狀態(tài)[3]。如血中PAF表達(dá)、TXB2及 6-K-PGF1α等指標(biāo)的改變。通過(guò)監(jiān)測(cè)識(shí)別血栓前狀態(tài)，并及時(shí)給予有效的藥物治療，對(duì)防止老年糖尿病病人的血栓性并發(fā)癥發(fā)生，無(wú)疑具有重要的臨床意義。TXA2具有極強(qiáng)的促使血小板聚集和收縮血管作用，而前列環(huán)素I2（PGI2）具有很強(qiáng)的抑制血小板聚集和擴(kuò)張血管的作用。但TXA2和PGI2很不穩(wěn)定，測(cè)定TXB2和6-K-PGF1α可間接反映TXA2和PGI2的水平。近年來(lái)研究證實(shí)，絕大多數(shù)PTS病人，可檢出血小板聚集性增強(qiáng)[4]，由血小板主要代謝產(chǎn)物TXA2而介導(dǎo)的血小板聚集，在血栓形成中起著重要作用[5]。

表2 三組間PAF、TXB2及6-K-PGF1α活性及結(jié)果比較

血小板活化在血栓形成中起著重要的作用。PAF是目前所知反映血小板活化和釋放的最特異性標(biāo)志物，且在激活和擴(kuò)大血栓形成中具有重要意義[6]。目前研究已表明，血小板的激活在冠狀動(dòng)脈事件發(fā)生時(shí)的血栓形成中起重要作用。血栓前狀態(tài)病人體內(nèi)的血小板已經(jīng)處于活化狀態(tài)，而活化的血小板是血栓的主要成分，也是引起血栓的主要原因。

綜上所述，老年糖尿病病人體內(nèi)存在血小板活化因子（PAF）、TXB2及6-K-PGF1α活性含量明顯升高，其中有慢性血管性并發(fā)癥的病人升高更明顯。及早發(fā)現(xiàn)老年糖尿病病人的血栓前狀態(tài)為預(yù)防血栓性疾病的出現(xiàn)提供了可能。

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