寶華玉蘭種子揮發(fā)性化學(xué)成分的GC-MS分析

宋曉凱，李 靖，李志華

寶華玉蘭(Magnolia zenii Cheng.)是木蘭科木蘭屬的落葉小喬木，為中國特有植物。在2004年《中國植物紅色名錄》中被列為國家級極危種。有關(guān)寶華玉蘭的研究相對較少，僅見對其外部形態(tài)、花粉特征、自然分布狀況和群落學(xué)調(diào)查的簡要記錄［1-3］。而有關(guān)寶華玉蘭的化學(xué)成分及生理活性研究，除本實驗室近期對寶華玉蘭樹皮揮發(fā)性成分的GC-MS分析研究報道外［4］，尚未見有關(guān)寶華玉蘭種子的化學(xué)成分及生理活性的報道。為系統(tǒng)研究其化學(xué)成分，探討其藥用物質(zhì)基礎(chǔ)，便于更好地開發(fā)利用，本文采用揮發(fā)油提取器提取寶華玉蘭種子的化學(xué)成分，并用氣—質(zhì)聯(lián)用儀對其成分進行分析研究。本文報道共鑒定出19種成分，用峰面積歸一化法測定了其相對含量，為進一步開發(fā)利用其藥用價值提供了科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

Trace DSQⅡ氣—質(zhì)聯(lián)用儀(美國Finnigan質(zhì)譜公司);揮發(fā)油提取器。寶華玉蘭全株植物于2010年6月采自江蘇省句容市茅山鎮(zhèn)永興苗木場(系人工種植)，經(jīng)淮海工學(xué)院宋曉凱教授鑒定為木蘭科木蘭屬植物寶華玉蘭(Magnolia zenii Cheng.)。試劑均為分析純(中國醫(yī)藥集團上?；瘜W(xué)試劑公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 實驗方法

2.1.1 揮發(fā)油的提取 取寶華玉蘭種子1.15 kg，自然晾干后，剪碎，過20目篩，分批于揮發(fā)油提取器中，于1 L圓底燒瓶中，加入500 mL蒸餾水和沸石，用揮發(fā)油提取器提取7 h。冷卻至室溫后，餾出液的水相用乙醚萃取3次，合并萃取液與餾出液的油狀物，無水硫酸鈉干燥，過濾，自然揮干乙醚，得到淡黃色油狀液體，供分析用。

2.1.2 色譜條件 色譜柱為TR-5 MS石英毛細(xì)管柱(30 mm ×0.25 mm，0.25 μm);載氣為高純氦氣(＞99.99%)，體積流量1.0 mL/min;分流進樣，分流比20∶1;程序升溫初始柱溫為50℃，保持2 min，以5℃/min升至280℃，保持15 min;進樣口溫度250℃，接口溫度280℃;進樣量:1.0 μL。質(zhì)譜條件:EI離子源，電子能量70 eV，電子倍增器電壓1 140 V，離子源溫度230℃;質(zhì)量數(shù)范圍50～500 u。質(zhì)譜檢索標(biāo)準(zhǔn)庫為NIST 02譜庫。

2.2 結(jié)果 計算其出油率為1.78%，取0.5 μL淡黃色油狀液體，按照上述色譜—質(zhì)譜條件進行分析，獲得寶華玉蘭種子揮發(fā)性成分的總離子流色譜圖。見圖1。

圖1 寶華玉蘭種子的揮發(fā)性成分的總離子流色譜圖

由圖1可知，在所采用的GC條件下共分離25個組分，通過對總離子流圖進行質(zhì)譜掃描，并在NIST 02譜庫中自動檢索，對基峰、質(zhì)荷比、相對豐度等方面進行直觀比較，用色譜峰面積歸一化法計算各組分的相對百分含量，初步鑒定出19個化合物(各組分的分子式、名稱、保留時間和相對百分含量見表1)。

由表1可見，19個化合物中，含量最高的是tomentosin。

表1 寶華玉蘭種子揮發(fā)油中的主要化學(xué)成分

3 討論

已鑒定成分占寶華玉蘭種子揮發(fā)油總量的99.60%。其中，含量最高的是tomentosin。有研究表明，tomentosin在1 mg/mL濃度時即可對犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌、須癬毛癬菌產(chǎn)生抑制作用［5］。此外，有報道，tomentosin能夠下調(diào)人類黑色素瘤細(xì)胞中NF-κB亞單位p65的表達，顯示其作為抗炎劑的良好應(yīng)用前景［6］。

致謝:GC-MS分析由江蘇揚州大學(xué)測試中心陸春良老師幫助測定。

［1］王劍偉，張光富，陳會艷.特有珍稀植物寶華玉蘭種群分布格局和群落特征［J］.廣西植物，2008，28(4):489-494.

［2］張光富.中國特有珍稀植物—寶華玉蘭［J］.大自然，2007，(6):47-49.

［3］郝日明，黃致遠，劉興劍，等.中國珍稀瀕危保護植物在江蘇省的自然分布及其特點［J］.生物多樣性，2000，8(2):153-162.

［4］宋曉凱，李靖.寶華玉蘭樹皮揮發(fā)性化學(xué)成分的GC-MS分析［J］.實用藥物與臨床，2012，15(3):151-153.

［5］Cafarchia C，De Laurentis N，Milillo MA，et al.Fungistatic activity of a sesquiterpene lactone(tomentosin)isolated from fresh Inula viscosa(Asteraceae)flowers from the Puglia region［J］.Parassitologia，2001，43(3):117-121.

［6］Galya A，Sarad，Hanna B，et al.Inhibition of inflammatory cytokine secretion by plant-derived compounds inuviscolide and tomentosin:the role of NFκB and STAT1［J］.The Open Pharmacology Journal，2010，4:36-44.