蕓香科柑橘屬薄層色譜研究

史 銳 (遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧沈陽 110032)

中藥是祖國(guó)醫(yī)藥寶庫的重要組成部分，是祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)賴以防病治病的主要物質(zhì)基礎(chǔ)，中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣直接關(guān)系到人民用藥的安全和有效。在檢驗(yàn)中藥真?zhèn)畏矫?，通常采用的檢測(cè)手段有形態(tài)鑒別、理化鑒別和光譜分析等，而作為色譜技術(shù)一個(gè)分支的薄層色譜［1］，由于其獨(dú)具的長(zhǎng)處已成為考察藥品真實(shí)性的一種有效、簡(jiǎn)便的手段而被廣泛應(yīng)用于中藥分析。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)10種橘屬［2］生藥的化學(xué)品質(zhì)進(jìn)行了比較研究，采用薄層色譜法建立了10批市售藥材樣品中生物橙皮苷、柚皮苷等黃酮類成分［3］和生物堿成分［4］的薄層色譜圖，為有效、簡(jiǎn)便鑒別蕓香科柑橘屬(Cirtrus sp.)生藥藥材的種類提供研究依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 供試藥材

收集市售商品蕓香科橘屬(Citrus sp.)中藥藥材樣品共計(jì)11種，由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院王冰教授鑒定。

1.2 儀器與試劑

KQ2200型超聲波清洗器，KQ-B玻璃儀器氣流烘干器，YB電子天平，101型電熱鼓風(fēng)干燥箱，烘箱，定量毛細(xì)管，單槽展開缸，ZF-2型三用紫外儀，電動(dòng)噴霧器，Canon數(shù)碼照相機(jī)。

甲醇(AR級(jí))、乙酸乙酯(AR級(jí))、氯仿(AR級(jí))、濃氨水(AR級(jí))、乙醇(AR級(jí))、水為蒸餾水。

硅膠G自制板(取硅膠 G，按1∶3比例加入0.3%羧甲基纖維素鈉溶液，鋪成0.3 mm厚的薄層板，晾干105℃活化30 min，干燥箱內(nèi)保存)。

1.3 供試溶液及對(duì)照溶液制備

供試品溶液制備:取本品粉末約0.4 g，精密稱定，置150 mL具塞錐形瓶中，精密加甲醇25 mL，稱定重量，超聲處理(功率250 W，頻率42 kHz)30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，即得。

對(duì)照溶液制備:精密稱取對(duì)照品辛弗林5.66 mg，置于25 mL量瓶中，加甲醇溶解、定容，搖勻，得對(duì)照品貯備溶液。

取對(duì)照品橙皮苷2.71 mg、柚皮苷2.69 mg，精密稱定，分別置于25 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2 方法與結(jié)果

這些藥材薄層研究的方法都基本上采用了藥典各藥材薄層鑒別的方法，對(duì)于一些用藥典方法不能達(dá)到圖譜要求的，對(duì)藥典的薄層鑒別方法稍作了修改變動(dòng)，力求做到圖譜的實(shí)用性、藝術(shù)性和美觀性，并盡可能的體現(xiàn)圖譜信息的最大化。

2.1 生物堿成分辛弗林的薄層分析

吸取上述供試液與對(duì)照液各2 μL，分別點(diǎn)在同一含0.5%氫氧化鈉制備的硅膠G薄層板上，以氯仿-乙醇-濃氨水(10∶10∶2)為展開劑，上行展開，展距15 cm，取出，噴1%茚三酮乙醇溶液，105℃烘5 min，在紫外光下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)。注意事項(xiàng):顯色劑不宜噴的過多，辛弗林極易分解，顯色后立即照相。圖譜見圖1。

2.2 黃酮類成分薄層分析

吸取上述供試液與對(duì)照液各2 μL，分別點(diǎn)在同一自制的硅膠 G薄層板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13)為展開劑，上行展開，展距9 cm，取出，噴1%AlCl3試液，在365 nm紫外光下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色斑點(diǎn)，圖譜見圖2。

圖1 生物堿成分辛弗林的薄層分析

圖2 黃酮類成分薄層分析

3 結(jié)論

常規(guī)薄層色譜由于同板同時(shí)可以檢測(cè)多個(gè)樣品，分析時(shí)間短，固定相(吸附劑)廉價(jià)，即用即去，不必?fù)?dān)心樣品中雜質(zhì)的污染，檢測(cè)不受溶劑的干擾，色譜的直觀性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而在中藥分析方面被廣泛應(yīng)用。本試驗(yàn)通過對(duì)蕓香科柑橘屬薄層色譜研究，直觀分析其有效成分，為簡(jiǎn)便快捷確定有效成分提供充分的分析依據(jù)和研究方法。

通過對(duì)照品和樣品斑點(diǎn)比對(duì)，可以定性判斷柑橘屬生藥有效成分。柑橘屬生藥中部分含有生物堿成分辛弗林，其中枳實(shí)、枳殼、陳皮、青皮、橘絡(luò)有斑點(diǎn)，有辛弗林成分;化橘紅、香櫞、橘葉、橘核、佛手沒有斑點(diǎn)，無辛弗林成分。柑橘屬生藥中大部分黃酮類成分，枳實(shí)、枳殼、陳皮、青皮、橘葉、橘絡(luò)、橘核、化橘紅、香櫞存在斑點(diǎn);佛手無斑點(diǎn)，基本無黃酮類成分。

橙皮苷和柚皮苷性質(zhì)相近，很難一起分離，故通過薄層色譜圖無法確定準(zhǔn)確成分，只能確定是否存在黃酮類成分，準(zhǔn)確成分需要進(jìn)行HPLC法進(jìn)行分析。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)蕓香科柑橘屬薄層色譜研究，建立了簡(jiǎn)便快捷確定有效成分提供充分的分析依據(jù)和研究方法。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典Ⅰ部［S］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:附錄34.

［2］國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草:第四卷［M］.上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2006:874，880.

［3］彭 燕，盛雪飛，吳 丹，等.柑橘屬中黃酮類化合物的研究與應(yīng)用進(jìn)展［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2009，35(7):113.

［4］黃 偉，劉友平，趙祎姍，等.枳實(shí)、枳殼中辛弗林含量比較分析［J］.中藥與臨床，2011，2(3):21.