復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞性能指標(biāo)的影響

白云飛， 張 蓉， 葉玉娥， 胡士明， 葉 明

（1.合肥工業(yè)大學(xué) 生物與食品工程學(xué)院，安徽 合肥 230009；2.安徽九牛飼料責(zé)任有限公司，安徽 合肥 231100）

益生菌以其無污染、無殘留、抗菌保健和促生長等特點(diǎn)，成為繼抗生素之后的新型添加劑［1］。益生菌被畜禽采食后能在腸道內(nèi)發(fā)育、繁殖并起有益作用，能促進(jìn)畜禽生長發(fā)育、提高飼料利用率、預(yù)防幼齡動物腹瀉、防止消化道疾病和提高機(jī)體免疫力［2］。芽孢桿菌在飼料制粒、貯存及胃酸環(huán)境中仍能保持較高的活性，在改善畜禽生產(chǎn)性能、維持腸道菌群平衡、提高消化率等方面均有較好的效果，成為目前在畜禽日糧中應(yīng)用最為廣泛的一種益生菌［3－9］。酵母菌體中含有非常豐富的蛋白質(zhì)、B族維生素、脂肪、糖和酶等多種營養(yǎng)成分，在提高動物免疫力、生產(chǎn)性能和減少應(yīng)激等方面均起作用［10］。

茶葉中含有較多的茶多酚，茶多酚是兒茶素、花青素、類黃酮和酚酸類等30多種化學(xué)物質(zhì)的混合物或復(fù)合物的總稱。茶葉經(jīng)超微粉碎技術(shù)處理后，可破壞細(xì)胞壁，使其中的茶多酚等活性物質(zhì)易于釋放，為動物所吸收［11］。茶多酚能夠提高動物機(jī)體的免疫力，改善肉品品質(zhì)［12－13］。

本文以青腳麻雞作為試驗(yàn)對象，選用2株不同的蠟樣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、啤酒酵母和黃山毛峰超細(xì)茶粉制備復(fù)配添加劑，研究不同組合的復(fù)配益生菌添加劑對肉仔雞胴體性能、免疫器官指數(shù)及腸道菌群的影響，為開發(fā)新型的家禽飼料添加劑提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 益生菌菌株制備

蠟樣芽胞桿菌BC1（高產(chǎn)蛋白酶Bacillus cereus 1）、蠟樣芽胞桿菌BC2（高產(chǎn)纖維素酶Bacillus cereus cereus 2）、枯草芽孢桿菌BS3（Bacillus subtilis）、地衣芽孢桿菌 BL4（Bacillus licheniformis），菌劑活菌數(shù)為2.0×107cfu／g。啤酒酵母SC5（Saccharomyces cerevisiae），菌劑活菌數(shù)為1.1×109cfu／g，由合肥工業(yè)大學(xué)微生物資源與應(yīng)用研究室制備。

1.2 復(fù)配益生菌組合、青腳麻雞及日糧組分

益生菌以滅菌麩皮制備成菌劑，復(fù)配益生菌按以下組合混合：

對照組：飼喂全價基礎(chǔ)日糧，未添加益生菌制劑和茶粉。

選擇7日齡的青腳麻雞150羽，隨機(jī)分為5組（分別為飼喂添加A、B、C、D復(fù)配益生菌添加劑日糧的4試驗(yàn)組及1組對照），每組3個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞，試驗(yàn)期28d。

超細(xì)茶粉添加量在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加200mg／kg混合日糧。各組的基礎(chǔ)日糧配方和營養(yǎng)水平完全相同，其中玉米62.3%、豆粕21.8%、棉粕5%、石粉8.3%、磷酸氫鈣1.2%、食鹽0.3%、礦物質(zhì)添加劑1%、蛋氨酸0.1%。試驗(yàn)飼糧營養(yǎng)水平為：代謝能11.04MJ／kg、粗蛋白16.5%、鈣 3.5%、賴氨酸0.76%、有效磷0.35%、蛋氨酸0.47%。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)于安徽九牛飼料責(zé)任有限公司養(yǎng)殖場進(jìn)行，試驗(yàn)期28d，采用地面平養(yǎng)，每天投飼3次（時間分別為8：00、15：00、21：00），自由飲水和采食，室溫24～30℃。光照每天16h。正式試驗(yàn)前進(jìn)行5d預(yù)飼期，按80／20、60／40、40／60、20／80、0／100將日糧逐步更換成試驗(yàn)日糧。

1.4 觀測指標(biāo)及試驗(yàn)方法

1.4.1 生產(chǎn)性能的測定

試驗(yàn)正式開始后第7、14、21、28天時，分別從每個重復(fù)組別中隨機(jī)抽取3只青腳麻雞，空腹12h后稱活體重，計(jì)算每組耗料量、每組雞的平均日增重和料重比。

平均日增重＝（試驗(yàn)?zāi)┢谄骄w重－試驗(yàn)初期平均體重）／飼養(yǎng)天數(shù)；

料肉比＝試驗(yàn)期內(nèi)總耗料量／試驗(yàn)期內(nèi)總增質(zhì)量。

1.4.2 胴體性能的測定

試驗(yàn)結(jié)束后，每組隨機(jī)選取4只（每重復(fù)2只，雌雄各1只）接近平均體重的試驗(yàn)雞進(jìn)行屠宰試驗(yàn)?？崭?2h后屠宰，屠宰前稱活重。刺殺放血，干拔毛，稱屠體重，屠體去除食道、嗦囊、氣管、腸道、脾臟、胰臟、膽囊及生殖器官后測定半凈膛重。半凈膛雞去除心、肝、肌胃、腺胃、腹脂、頭、腳（含脛）后測全凈膛重。取肉雞左右胸肌，其中左邊胸肌放于4℃冰箱，用于滴水損失和pH值的測定，其余的存于－20℃冰柜中。剝離左側(cè)胸肌、腿肌、測定胸肌重和腿肌重。計(jì)算屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率。

屠宰率＝屠體重／活重×100%；

半凈膛率＝半凈膛重／活重×100%；

全凈膛率＝全凈膛重／活重×100%；

胸肌率＝胸肌重／屠體重×100%；

腿肌率＝腿肌重／屠體重×100%。

1.4.3 內(nèi)臟器官指數(shù)的測定

測定屠宰性能指標(biāo)的同時，剝離心臟、肝臟、腎臟、肺臟，用吸水紙吸取表面液體稱重，計(jì)算器官指數(shù)。器官指數(shù)＝器官鮮重／活體重。

1.4.4 雞肉品質(zhì)測定

雞肉蒸煮損失測定：準(zhǔn)備稱取胸肌和腿肌各約30g，置沸水浴中擱板上蒸煮30min，然后取出置陰涼處吊掛30min后稱重，計(jì)算蒸煮損失。

雞肉失水率測定：宰后1h分別取相同部位胸肌和腿鮮樣各約5g，用改裝的壓力儀加壓25kg，持續(xù)10min，取出稱重。

肌肉pH值測定：肉雞宰殺45min后，用pH值計(jì)測定固定部位深層胸肌和腿肌的pH值。

1.4.5 腸道菌群的測定

試驗(yàn)結(jié)束時從每重復(fù)中取2只試驗(yàn)雞（雌雄各1只）解剖后結(jié)扎盲腸口，在無菌條件下剖開盲腸，取靠近腸黏膜部位的內(nèi)容物0.5g置于無菌試管內(nèi)用稀釋液逐級稀釋，使其濃度梯度依次為10－2、10－3、10－4、10－5、10－6。在37°C恒溫條件下，大腸桿菌和沙門氏菌分別用伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）培養(yǎng)基和沙門氏菌、志賀氏桿菌（SS）瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)。細(xì)菌數(shù)采用平板菌落計(jì)數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，根據(jù)菌落形狀、顏色和革蘭染色鏡檢結(jié)果進(jìn)行鑒別。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

利用Excel 2003統(tǒng)計(jì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)，用DPS統(tǒng)計(jì)軟件V6.55進(jìn)行方差分析，并進(jìn)行差異顯著性比較，試驗(yàn)結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)偏差”表示。

2 結(jié)果和分析

2.1 復(fù)配添加劑對青腳麻雞生長性能的影響

復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞日增重、料重比的影響，見表1所列。

表1 復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞日增重、料重比的影響

由表1可知，各試驗(yàn)組與對照組相比較，平均日增重均有提高，B、C、D組與對照組差異較為顯著（P＜0.05），分別比對照組提高了2.85%、6.05%、6.02%、6.84%，料重比與對照組相比均有降低，且各組比對照組分別降低了3.08%、7.18%、4.62%、5.64%，D 菌劑的平均日增重高于其他4個試驗(yàn)組，達(dá)到27.35g／d，比B菌劑的增加0.74%，差異較顯著（P＜0.05），B菌劑的料重比最小，相比對照組降低了7.18%，且B菌劑比D菌劑料重比降低了1.63%，差異顯著，說明酵母菌可以協(xié)同芽孢桿菌提高青腳麻雞的生長性能。B菌劑比A菌劑的平均日增重高3.11%，料重比下降4.23%，D菌劑與C菌劑相比平均日增重提高1.14%，料重比下降1.08%，由此看出超細(xì)茶粉對提高青腳麻雞的平均日增重、降低料重比有一定作用。

2.2 復(fù)配添加劑對青腳麻雞胴體性能的影響

復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞屠宰指標(biāo)的影響見表2所列。

表2 復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞屠宰指標(biāo)的影響

由表2可知，A、B、C、D菌劑的半凈膛率、全凈膛率基本高于對照組，差異顯著，胸肌率C組有明顯差異（P＜0.01）。D菌劑的屠宰率最大為83.3%，B菌劑的半凈膛率、全凈膛率明顯高于其他組，分別為71.55%和58.39%。

2.3 復(fù)配添加劑對青腳麻雞器官指數(shù)影響

復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞器官指數(shù)的影響，見表3所列。

表3 復(fù)配添加劑對青腳麻雞器官指數(shù)的影響

由表3可知，各試驗(yàn)組的心臟指數(shù)均高于對照組，A、B、C組差異顯著，肝臟和腎臟指數(shù)試驗(yàn)組與對照組相比無顯著差異；A、B、C菌劑的肝臟指數(shù)均優(yōu)于對照組，分別提高了5.9%、4.37%、7.6%，D菌劑則略低于對照組，但無顯著性差異。

2.4 復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞品質(zhì)影響

復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞胸肌和腿肌pH值的影響見表4所列。由表4可知，胸肌和腿肌的pH值均為正常肉質(zhì)的pH值，D菌劑的pH值較對照組有增高的趨勢，但各組別無顯著差異。益生菌和茶粉對雞肉pH值無明顯影響。

表4 復(fù)配添加劑對青腳麻雞胸肌和腿肌pH值的影響

各組別的胸、腿肌肌肉品質(zhì)比較見表5所列。由表5可知，各試驗(yàn)組的胸肌和腿肌的失水率、蒸煮損失、滴水損失均比對照組小，說明益生菌和茶粉對提高雞肉的品質(zhì)有較大影響，A菌劑和B菌劑相比，C菌劑和D菌劑相比，后者多添加了茶粉，其胸肌滴水損失分別降低了5.77%和9.51%，腿肌的滴水損失分別降低了2.98%和16.80%，但是胸肌蒸煮損失分別提高了23.98%和6.20%；A菌劑與B菌劑相比，腿肌蒸煮損失提高了13.03%，C菌劑與D菌劑相比，腿肌蒸煮損失提高了2.33%。

表5 各組別的胸、腿肌肌肉品質(zhì)比較 %

2.5 復(fù)配添加劑對青腳麻雞腸道菌群的影響

青腳麻雞空腸內(nèi)有益微生物和有害微生物的檢測結(jié)果，見表6所列。

由表6可知，攝食添加有復(fù)配益生菌添加劑日糧的青腳麻雞空腸的益生菌乳酸桿菌數(shù)均顯著多于對照組，而有害微生物沙門氏菌和大腸桿菌數(shù)則小于對照組，尤其是空腸內(nèi)沙門氏菌數(shù)目顯著少于對照組。其中C菌劑在促進(jìn)益生菌生長、抑制有害病菌生長方面效果最好。

青腳麻雞空腸內(nèi)定殖的有益菌乳酸菌數(shù)量益生菌添加劑組明顯高于對照組，有害菌沙門氏菌和大腸桿菌數(shù)量明顯低于對照組，且益生菌添加劑組的呼吸道疾病和腹瀉發(fā)病率也低于對照組，由此看出飼喂益生菌飼料添加劑能夠提高青腳麻雞免疫力。

表6 青腳麻雞空腸內(nèi)微生物的檢測結(jié)果

3 討 論

微生物制劑作為飼料添加劑應(yīng)用于家禽家畜等的飼養(yǎng)已越來越普遍，微生物制劑能夠?yàn)閯游锾峁└叩鞍踪|(zhì)、維生素、氨基酸和促生長因子，改善機(jī)體代謝水平，補(bǔ)充機(jī)體營養(yǎng)成分，加速機(jī)體生長，縮短養(yǎng)殖周期［14］。

本試驗(yàn)復(fù)配益生菌添加劑選用芽孢桿菌和酵母菌2類益生菌，并輔以黃山毛峰超細(xì)茶粉，結(jié)果顯示，飼喂添加有復(fù)配益生菌添加劑的青腳麻雞，其平均日增重都有一定程度提高，相應(yīng)料重比降低，與文獻(xiàn)［14－15］研究結(jié)果一致，且飼喂添加茶粉的添加劑的青腳麻雞平均日增重都高于飼喂不含茶粉的添加劑的組別。

復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞的胴體性能和器官指數(shù)均有一定促進(jìn)作用，其中屠宰率、半凈膛率、全凈膛率基本都高于對照組，腿肌率和胸肌率都比對照組有所提高，但是效果不顯著。胴體性能的提高有利于青腳麻雞整體利用率的提高。

益生菌對動物機(jī)體的腸道菌群的微生物平衡有著協(xié)調(diào)和維持的作用［16］。文獻(xiàn)［17］發(fā)現(xiàn)向白羽肉雞基礎(chǔ)日糧中添加芽孢桿菌可顯著提高白羽肉雞回腸中乳酸菌數(shù)，降低大腸桿菌數(shù)，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，復(fù)配益生菌添加劑極大地提升了青腳麻雞的乳酸桿菌數(shù)，降低了沙門氏菌和大腸桿菌有害菌的數(shù)量，其中D菌劑乳酸桿菌數(shù)為對照組16倍，C菌劑沙門氏菌數(shù)為對照組1%。

綜合A、B、C、D 4類菌劑對青腳麻雞的生長性能、器官指數(shù)和腸道菌群的作用結(jié)果，適于青腳麻雞的最優(yōu)復(fù)配益生菌添加劑為B菌劑，其配比為1%BS3＋2%（BC2＋BC1）＋3%SC5＋1%BL4＋0.2%超細(xì)茶粉。飼喂此菌劑的青腳麻雞，其平均日增重比對照組提高6.05%，料重比降低7.18%，肝臟指數(shù)提高了4.37%，腸道乳酸菌總菌數(shù)比對照組提高了5倍。

本研究主要考察了復(fù)配益生菌添加劑對青腳麻雞飼喂效果的影響，然而對其他類家禽的作用有待進(jìn)一步研究。

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