• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    帕金森病患者血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平的檢測(cè)及臨床意義

    2012-09-20 08:03:48趙雪晴
    關(guān)鍵詞:多巴神經(jīng)元顯著性

    趙雪晴, 牛 平, 蘇 岑

    近年來,越來越多的證據(jù)表明免疫炎癥反應(yīng)與帕金森病(Parkinson’s disease,PD)的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是由不同類型細(xì)胞分泌和調(diào)節(jié)的促炎性細(xì)胞因子,其對(duì)多巴胺(dopamine,DA)能神經(jīng)元具有潛在的毒性作用。在慢性腺病毒表達(dá)的大鼠黑質(zhì)內(nèi),TNF-α可導(dǎo)致時(shí)間依賴性的 DA能神經(jīng)元死亡[1]。在免疫反應(yīng)中,TNF-α通過與高親和力細(xì)胞表面受體TNFR1(tumor necrosis factor-αreceptor-1,TNFR1)和 TNFR2(tumor necrosis factor-α receptor-2,TNFR2)結(jié)合,發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。

    TNFR1和TNFR2的胞外部分在TNF-α轉(zhuǎn)換酶作用下,從細(xì)胞膜脫落形成可溶性TNFR1(soluble tumor necrosis factor-α receptor-1,sTNFR1)和可溶性TNFR2(soluble tumor necrosis factor-α receptor-2,sTNFR2)至外周血循環(huán)中,形成雙反饋系統(tǒng),調(diào)節(jié)TNF-α的生物學(xué)活性,因此,同時(shí)測(cè)量?jī)蓚€(gè)sTNFRs水平對(duì)評(píng)估TNF-α的整體水平是必要的,被認(rèn)為是比 TNF-α 更可靠的標(biāo)記物[2]。

    本實(shí)驗(yàn)對(duì) PD患者血清 TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平同時(shí)進(jìn)行檢測(cè),以評(píng)估TNF-α整體水平的臨床意義,同時(shí)對(duì)PD的免疫炎癥反應(yīng)機(jī)制進(jìn)行更深入的探討,相關(guān)研究國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道。

    1 對(duì)象與方法

    1.1 對(duì)象 選擇我院2011年11月~2012年6月門診就診的原發(fā)性PD患者40例,診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)運(yùn)動(dòng)障礙學(xué)及帕金森病學(xué)組制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)。男23例,女17例,年齡47~87歲,平均67.28±9.36 歲,病程 1 ~20年,平均 4.68±3.74年。排除感染性疾病、免疫性疾病、肝、腎功能不全及應(yīng)用免疫抑制劑者。病情評(píng)估采用PD統(tǒng)一評(píng)分量表第3部分(The United Parkinson’s Disease Rate Scale Part III,UPDRS III)評(píng)分及改良Hoehn-Yahr分級(jí)量表,PD患者UPDRS III評(píng)分結(jié)果為7~44分,平均為16.5 ±9.74 分;改良 Hoehn-Yahr分級(jí)為1級(jí)10例,1.5級(jí)3例,2級(jí)8例,2.5級(jí)8例,3級(jí)6例,4級(jí)3例,5級(jí)1例。對(duì)照組30例,為同期健康體檢者,男17例,女13例,年齡47~81歲,平均62.07±10.42歲,兩組性別及年齡匹配。

    1.2 分組 PD組按治療情況不同分為3組,未用藥組(未服用任何抗PD藥物)、單藥組(僅服用多巴制劑)、聯(lián)合用藥組(服用多巴制劑、多巴受體激動(dòng)劑等2種以上藥物)。

    1.3 方法 空腹、肘正中靜脈采血3ml,不抗凝,1h內(nèi)離心,分離血清,分裝后保存于-80℃冰箱內(nèi)。采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-linked Immunolsorbent Assay,ELISA)定量檢測(cè)血清 TNF-α、sTNFR1、sTNFR2 水平 (TNF-α、sTNFR1、sTNFR2試劑盒,武漢博士德生物工程有限公司)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,兩獨(dú)立樣本組間比較采用t檢驗(yàn),多獨(dú)立樣本各組間差異顯著性比較采用單因素方差分析(ANOVA),計(jì)量資料兩組間相關(guān)性檢驗(yàn)采用Pearson直線相關(guān)分析,設(shè)定P<0.05為差異有顯著性。

    2 結(jié)果

    2.1 PD 組和對(duì)照組血清 TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平比較 PD組及對(duì)照組血清sTNFR1水平分別為 793.55 ±192.21pg/ml、663.67 ±184.32pg/ml,PD組明顯高于對(duì)照組,差異極顯著(P<0.01)。PD組及對(duì)照組血清 TNF-α水平分別為21.49±9.23pg/ml、19.11 ±6.96pg/ml;sTNFR2 水平分別為1757.49 ±211.34pg/ml、1698.28 ±203.13pg/ml,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見表1)。

    2.2 PD 組和對(duì)照組血清 TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平相關(guān)性分析PD組血清TNF-α和sTNFR1水平呈低度正相關(guān)(rs=0.40,P <0.05),sTNFR1 與sTNFR2水平顯著正相關(guān)(rs=0.55,P < 0.01),TNF-α 與 sTNFR2 水平無相關(guān)性(rs=0.26,P >0.05)。對(duì)照組血清TNF-α與sTNFR1無相關(guān)性(rs=0.34,P >0.05),sTNFR1 與 sTNFR2 水平呈中度正相關(guān)(rs=0.42,P <0.05),TNF-α 與 sTNFR2 水平無相關(guān)性(rs=0.31,P >0.05)(見表2)。

    2.3 PD 組血清 TNF-α、sTNFR1、sTNFR2 水平與年齡、病程、UPDRS III評(píng)分及改良Hoehn-Yahr分級(jí)的相關(guān)性分析 PD組血清TNF-α水平與年齡、病程、UPDRS III評(píng)分及改良Hoehn-Yahr分級(jí)進(jìn)行相關(guān)性分析,結(jié)果表明均無相關(guān)性(均P>0.05);血清sTNFR1水平與年齡呈顯著正相關(guān)(rs=0.497,P<0.01),與病程、UPDRS III評(píng)分及改良 Hoehn-Yahr分級(jí)均無相關(guān)性(均 P>0.05);血清 sTNFR2水平與年齡呈低度正相關(guān)(rs=0.353,P <0.05),與病程、UPDRS III評(píng)分及改良Hoehn-Yahr分級(jí)均無相關(guān)性(均 P >0.05)(見表3)。

    2.4 不同治療 PD患者血清 TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平比較PD組按不同治療情況分為3組,未用藥組12例,未服用任何抗PD藥物;單藥組20例,僅服用多巴制劑或多巴受體激動(dòng)劑;聯(lián)合用藥組8例,服用多巴制劑、多巴受體激動(dòng)劑等兩種以上藥物。3組間比較均無顯著性差異(P>0.05)(見表4)。

    表1 PD組和對(duì)照組血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平比較(±s)

    表1 PD組和對(duì)照組血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平比較(±s)

    與對(duì)照組比較*P<0.01

    組別 例數(shù) TNF-α(pg/ml) sTNFR1(pg/ml) sTNFR2(pg/ml)PD組對(duì)照組40 30 21.49 ±9.23 19.11 ±6.96 793.55 ±192.21*663.67 ±184.32 1757.49 ±211.34 1698.28 ±203.13

    表2 PD組和對(duì)照組血清TNF-α、sTNFR1 sTNFR2水平相關(guān)性(rs)

    表3 PD組血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平與年齡病程、UDPRS評(píng)分、改良的Hoehn-Yahr分級(jí)相關(guān)性(rs)

    表4 PD組不同治療同情況血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平的比較(±s)

    表4 PD組不同治療同情況血清TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平的比較(±s)

    組別 例數(shù) TNF-α(pg/ml) sTNFR1(pg/ml) sTNFR2(pg/ml)未用藥組單藥組聯(lián)合用藥組F 12 20 8 19.62 ±5.93 20.37 ±6.40 27.70 ±14.68 2.65 745.03 ±218.41 782.81 ±179.13 881.98 ±189.22 1.34 1752.25 ±210.10 1718.90 ±180.15 1845.95 ±267.65 1.12

    3 討論

    近年研究表明小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的固有免疫反應(yīng),及T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫反應(yīng)均參與了PD的發(fā)病機(jī)制?;罨男∧z質(zhì)細(xì)胞啟動(dòng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)固有免疫反應(yīng)的同時(shí),加劇了炎癥損傷。其分泌的細(xì)胞因子、趨化因子等使血腦屏障破壞,招募外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)入CNS,所導(dǎo)致的適應(yīng)性免疫反應(yīng),不僅直接損傷DA能神經(jīng)元,還進(jìn)一步加劇了小膠質(zhì)細(xì)胞活化介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)[3]。

    持續(xù)激活的小膠質(zhì)細(xì)胞釋放的促炎細(xì)胞因子是導(dǎo)致DA能神經(jīng)元損傷的主要物質(zhì),TNF-α是其中最重要的對(duì)DA能神經(jīng)元具有潛在毒性作用的細(xì)胞因子。TNF-α可促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞合成集落刺激因子(colony stimulating factors,CSF),后者作為白細(xì)胞趨化因子招募血液循環(huán)中的粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞到達(dá)CNS的炎癥部位,參與、放大了炎癥反應(yīng),并影響細(xì)胞內(nèi)鈣離子平衡,加重細(xì)胞損傷。TNF-α通過細(xì)胞表面的TNFR1和TNFR2兩種TNF受體(TNFR),激發(fā)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng),影響神經(jīng)元的發(fā)育,細(xì)胞的存活,突觸傳遞,離子平衡。所涉及的信號(hào)通路主要包括caspase家族介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑、轉(zhuǎn)錄核因子NF-κB激活的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和JNK蛋白激酶的活化途徑[4]。

    TNF-α在PD患者外周血及腦脊液中顯著升高的報(bào)道較多,但崔冬生等[5]報(bào)道 PD患者外周血TNF-α顯著減少。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與以往的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同,檢測(cè)的PD患者血清TNF-α與對(duì)照組相比無顯著性差異,這些存在爭(zhēng)議的結(jié)果進(jìn)一步說明整體評(píng)估TNF-α水平,檢測(cè)兩個(gè)sTNFRs的水平是必要的。血循環(huán)中脫落的sTNFRs一方面可與配體TNF-α結(jié)合,限制其觸發(fā)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng);另一方面降低了受體數(shù)目總量,脫落后仍粘附到細(xì)胞膜上[6]。此外,sTNFRs又可被TNF-α誘導(dǎo)產(chǎn)生。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明PD組血清sTNFR1水平顯著高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),sTNFR2水平與對(duì)照組相比無顯著性差異。提示在PD免疫炎性反應(yīng)中,TNF-α主要通過細(xì)胞表面TNFR1受體激發(fā)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)參與DA能神經(jīng)元的損傷。

    本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明PD組血清TNF-α和sTNFR1水平低度正相關(guān)(rs=0.33,P <0.05),sTNFR1 和sTNFR2 水平顯著正相關(guān)(rs=0.58,P <0.01),TNF-α 和 sTNFR2水平無相關(guān)性(rs=0.26,P >0.05)。我們推測(cè)TNF-α介導(dǎo)的TNFR1、TNFR2的生物學(xué)功能不是獨(dú)立的,TNFR2對(duì)TNF-α介導(dǎo)的TNFR1途徑有輔助作用,這一結(jié)果與 Petrus等[7]報(bào)道 TNF-α 激發(fā)TNFR1和TNFR2不同信號(hào)通路之間的交叉串?dāng)_相互影響相符。TNF-α的毒性作用可能通過TNFR1受體激活細(xì)胞凋亡途徑的關(guān)鍵酶半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶(caspase)引起DA能神經(jīng)元凋亡,在PD患者和MPTP或6-OHDA誘導(dǎo)的PD動(dòng)物模型中均發(fā)現(xiàn)caspase-3和caspase-8的激活,支持細(xì)胞凋亡參與DA能神經(jīng)元變性。不但有實(shí)驗(yàn)表明TNFR的缺乏能減弱MPTP誘導(dǎo)的紋狀體神經(jīng)毒性,而且Krishnan Sriram等[8]實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明了TNFR缺陷的小鼠能抑制小膠質(zhì)細(xì)胞活化和改變大腦區(qū)域?qū)PTP的易感性。TNF-α還可以通過TNFR1激活NF-κB,活化的 NF-κB調(diào)控各種基因的表達(dá)抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)炎癥反應(yīng)。在同一PD動(dòng)物模型中,TNF-α對(duì)海馬神經(jīng)元有保護(hù)作用,但卻可觸發(fā)DA能神經(jīng)元變性[9]。TNF-α誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性作用或神經(jīng)保護(hù)作用可能是激活了NF-κB下游的不同信號(hào),或特定大腦區(qū)域TNFR1和TNFR2表達(dá)差異所導(dǎo)致。TNFR1介導(dǎo)的信號(hào)通路主要功能是促炎癥和凋亡,而TNFR2是促生存的主要信號(hào),因此完全抑制TNF-α信號(hào)不一定能產(chǎn)生最佳的效果,對(duì)TNFR及下游信號(hào)的更深入了解,可以促進(jìn)建立新的針對(duì)TNF-α系統(tǒng)的療法,為許多免疫疾病帶來了可喜的前景。如新近有報(bào)道應(yīng)用sTNFR2激動(dòng)劑作為一個(gè)新的治療方法來治療自身免疫性脫髓鞘疾病[10]。因此,整體評(píng)估TNF-α、sTNFR1、sTNFR2之間的相互作用關(guān)系,可能為針對(duì)TNF-α途徑的PD藥物研制,開辟新思路。

    我們按不同年齡、性別、病程分組進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果表明PD組血清TNF-α水平與年齡、病程、UPDRS評(píng)分及Hoehn-Yahr分級(jí)分期均無相關(guān)性;血清sTNFR1、sTNFR2水平與年齡分別呈顯著正相關(guān)、低度正相關(guān);血清sTNFR1、sTNFR2水平與病程、UPDRS評(píng)分及Hoehn-Yahr分級(jí)均無相關(guān)性。這一結(jié)果提示老化與免疫調(diào)節(jié)異常相關(guān),可能是PD的主要危險(xiǎn)因素。

    Bessler[11]等研究報(bào)道左旋多巴可使PD患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)分泌TNF-α和IL-6增加。但最近,Hofmann[12]等報(bào)道在左旋多巴治療和未用藥的PD患者中血清IL-6水平?jīng)]有顯著性差異,提示應(yīng)用左旋多巴治療可能影響PD患者的免疫狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)對(duì) PD組血清 TNF-α、sTNFR1、sTNFR2水平按未用藥組、單用多巴制劑組及聯(lián)合用藥組進(jìn)行組間比較,結(jié)果表明各組間無顯著性差異,提示左旋多巴并沒有改變PD的免疫狀態(tài)。因此,外源性多巴制劑對(duì)外周免疫反應(yīng)的影響仍有待進(jìn)一步的深入研究。

    [1]De Lella Ezcurra AL,Chertoff M,F(xiàn)errari C,etal.Chronic expression of low levels of tumor necrosis factor-alpha in the substantia nigra elicits progressiv neurodegeneration,delayed motor symptoms and microgliamacrophage activation[J].Neurobiol Dis,2010,37(3):630-640.

    [2]CoelhofM,Reis HJ,Nicolato,R,etal.Increased serum levels of inflammatory markers in chronicinstitutionalized patients with schizophrenia[J].Neuroimmunomodulation,2008,15(2):140-144.

    [3]Cao JJ,Li KS,Shen YQ.Activated Immune Cells in Parkinson's Disease[J].JNeuroimmune Pharmacol,2011,6:323-329.

    [4]McCoy MK,Tansey MG.TNF signaling inhibition in the CNS:implications for normal brain function and neurodegenerative disease[J].J Neuroinflamm,2008,5(1):1-13.

    [5]崔冬生,顧 平,耿 媛,等.帕金森病患者外周血腫瘤壞死因子水平變化[J].河北醫(yī)藥雜志,2009,(11):1285-1286.

    [6]Van Hauwermeiren F,Vandenbroucke R E,Libert C,etal.Treatment of TNF mediated diseases by selective inhibition of soluble TNF or TNFR1[J].Cytokine Growth Factor Rev,2011,22(5-6):311-319.

    [7]Naude PJ,den Boer JA,Luiten PG,etal,Tumor necrosis factor receptor cross-talk[J].FEBS J,2011,278(6):888-898.

    [8]Sriram Krishnan,Matheson Joanna M,Benkovic Stanley A,etal.Deficiency of TNF receptors suppressesmicroglial activation and alters the susceptibility of brain regions to MPTP-induced neurotoxicity:role of TNF-α[J].The FASEB J,2006,20(6):670-682.

    [9]Park KM,BowersW J.Tumor necrosis factor-alphamediated signaling in neuronal homeostasis and dysfunction[J].Cellular Signal,2010,22(7):977-983.

    [10]Fisher R.A Soluble TNF Receptor 2 Agonist as a New Therapeutic Approach to Treat Autoimmune and Demyelinating Diseases[D]Stuttgart,im Februar 2011.

    [11]Bessler H,Djaldetti R,Salman H,etal.IL-1β,IL-2,IL-6 and TNF-a production by peripheral blood mononuclear cells from patients with Parkinson’s disease[J].Biomed Pharmacother,1999,5(2):141-145.

    [12]Hofmann KW,Schuh AF,Saute J,etal.Interleukin-6 serum levels in patients with Parkinson's disease[J].Neurochem Res,2009,34(8):1401-1404.

    猜你喜歡
    多巴神經(jīng)元顯著性
    《從光子到神經(jīng)元》書評(píng)
    自然雜志(2021年6期)2021-12-23 08:24:46
    觀察多巴胺聯(lián)合多巴酚丁胺治療新生兒肺炎的臨床療效
    基于顯著性權(quán)重融合的圖像拼接算法
    電子制作(2019年24期)2019-02-23 13:22:26
    基于視覺顯著性的視頻差錯(cuò)掩蓋算法
    躍動(dòng)的神經(jīng)元——波蘭Brain Embassy聯(lián)合辦公
    楊仲鴻《摩些文多巴字及哥巴字漢譯字典》審查經(jīng)過補(bǔ)說
    一種基于顯著性邊緣的運(yùn)動(dòng)模糊圖像復(fù)原方法
    論商標(biāo)固有顯著性的認(rèn)定
    基于二次型單神經(jīng)元PID的MPPT控制
    毫米波導(dǎo)引頭預(yù)定回路改進(jìn)單神經(jīng)元控制
    久久人人精品亚洲av| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 日本黄大片高清| 国产激情欧美一区二区| 久久性视频一级片| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 一进一出抽搐动态| 午夜福利欧美成人| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产精品久久久久久久电影 | 一区福利在线观看| 成年女人看的毛片在线观看| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 国产高潮美女av| 亚洲七黄色美女视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 天堂网av新在线| 老司机午夜福利在线观看视频| 成年免费大片在线观看| 免费看十八禁软件| av女优亚洲男人天堂| 麻豆成人午夜福利视频| 十八禁人妻一区二区| 51午夜福利影视在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 嫩草影院入口| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲国产欧美人成| 露出奶头的视频| 欧美午夜高清在线| 男女床上黄色一级片免费看| 2021天堂中文幕一二区在线观| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 韩国av一区二区三区四区| 香蕉久久夜色| 国产精品1区2区在线观看.| 国产精品98久久久久久宅男小说| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲av电影不卡..在线观看| 很黄的视频免费| 色综合欧美亚洲国产小说| 性欧美人与动物交配| 很黄的视频免费| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 色综合欧美亚洲国产小说| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 午夜福利在线在线| 全区人妻精品视频| 午夜视频国产福利| 成人欧美大片| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 一级毛片高清免费大全| 人人妻人人看人人澡| netflix在线观看网站| 国产伦在线观看视频一区| 黄色成人免费大全| 特级一级黄色大片| 成人永久免费在线观看视频| 国产黄片美女视频| 日本熟妇午夜| 欧美+日韩+精品| 天天一区二区日本电影三级| 亚洲专区国产一区二区| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲精品一区av在线观看| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 欧美一区二区亚洲| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产真实乱freesex| 久久久国产成人精品二区| www国产在线视频色| 最近最新中文字幕大全电影3| 可以在线观看毛片的网站| 国产精品国产高清国产av| 免费av不卡在线播放| 男人舔奶头视频| 午夜福利18| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲国产精品sss在线观看| 一a级毛片在线观看| 长腿黑丝高跟| 国产三级黄色录像| 午夜福利免费观看在线| 国产一区二区在线av高清观看| 国产av不卡久久| 国产精品日韩av在线免费观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产成人福利小说| 岛国视频午夜一区免费看| 天堂动漫精品| or卡值多少钱| 亚洲av熟女| 久久九九热精品免费| 日韩有码中文字幕| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 好男人在线观看高清免费视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 欧美国产日韩亚洲一区| 一级毛片女人18水好多| 日本熟妇午夜| 熟女电影av网| 国产男靠女视频免费网站| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 天堂√8在线中文| 黄色视频,在线免费观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲av电影不卡..在线观看| 成年女人看的毛片在线观看| av在线天堂中文字幕| 91麻豆av在线| 亚洲精品在线美女| 男女下面进入的视频免费午夜| 日本 欧美在线| 国产色爽女视频免费观看| 国产精品亚洲一级av第二区| a级毛片a级免费在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产色婷婷99| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 国产麻豆成人av免费视频| 中文字幕久久专区| 日本五十路高清| 亚洲七黄色美女视频| 日本三级黄在线观看| 老司机在亚洲福利影院| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲人成电影免费在线| 国产伦在线观看视频一区| 欧美中文综合在线视频| 美女被艹到高潮喷水动态| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 露出奶头的视频| 国产视频内射| 激情在线观看视频在线高清| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 黄色视频,在线免费观看| 久久性视频一级片| 国产精品电影一区二区三区| 久久精品国产自在天天线| 欧美黑人巨大hd| 亚洲久久久久久中文字幕| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲无线在线观看| 成人18禁在线播放| 一进一出抽搐gif免费好疼| 成年女人永久免费观看视频| 亚洲av不卡在线观看| 国产免费男女视频| 五月玫瑰六月丁香| 国内精品久久久久久久电影| 少妇高潮的动态图| 亚洲美女视频黄频| 成人av在线播放网站| 亚洲成av人片在线播放无| 午夜福利在线在线| 免费观看的影片在线观看| 久久久精品大字幕| 美女免费视频网站| 国产精品三级大全| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 嫩草影视91久久| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 色av中文字幕| 午夜两性在线视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 国产单亲对白刺激| 国产高潮美女av| 久久中文看片网| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久99久视频精品免费| 欧美丝袜亚洲另类 | 亚洲人成网站高清观看| 日本三级黄在线观看| 亚洲无线观看免费| 国产精品久久久久久久电影 | 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 欧美激情在线99| 嫩草影院精品99| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲av不卡在线观看| 丁香六月欧美| 国产精品98久久久久久宅男小说| 美女黄网站色视频| 国产日本99.免费观看| 欧美+日韩+精品| 国产精品,欧美在线| 99在线视频只有这里精品首页| 成人永久免费在线观看视频| 国产91精品成人一区二区三区| 美女 人体艺术 gogo| 搡老熟女国产l中国老女人| 99久久精品热视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产伦在线观看视频一区| 欧美在线黄色| 亚洲欧美激情综合另类| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 叶爱在线成人免费视频播放| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 97碰自拍视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美乱码精品一区二区三区| 精品乱码久久久久久99久播| 特大巨黑吊av在线直播| 亚洲电影在线观看av| 免费观看人在逋| 久久人妻av系列| 日本免费一区二区三区高清不卡| 日本 欧美在线| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 人人妻人人澡欧美一区二区| 国产亚洲av嫩草精品影院| 精品国内亚洲2022精品成人| 午夜免费观看网址| 91麻豆av在线| ponron亚洲| 天天躁日日操中文字幕| av专区在线播放| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲一区高清亚洲精品| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲黑人精品在线| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 色av中文字幕| 男人舔奶头视频| 午夜福利在线观看吧| 久久国产精品人妻蜜桃| 成人三级黄色视频| 精品一区二区三区视频在线 | 国模一区二区三区四区视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 97超视频在线观看视频| 熟女人妻精品中文字幕| 在线a可以看的网站| 中文字幕熟女人妻在线| 一本精品99久久精品77| 国产主播在线观看一区二区| 夜夜爽天天搞| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 99精品久久久久人妻精品| 国产精品99久久久久久久久| 哪里可以看免费的av片| 99热这里只有精品一区| 91字幕亚洲| 90打野战视频偷拍视频| www.熟女人妻精品国产| 婷婷精品国产亚洲av在线| 露出奶头的视频| 人妻久久中文字幕网| 国产精品综合久久久久久久免费| 我要搜黄色片| 9191精品国产免费久久| 少妇的逼好多水| 又爽又黄无遮挡网站| 成人av一区二区三区在线看| 老鸭窝网址在线观看| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 欧美午夜高清在线| 欧美一级a爱片免费观看看| 精品人妻1区二区| 国产亚洲精品久久久com| 高清在线国产一区| 3wmmmm亚洲av在线观看| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 在线观看66精品国产| 变态另类丝袜制服| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 精品久久久久久,| 在线观看免费午夜福利视频| 成人永久免费在线观看视频| 午夜福利免费观看在线| 一级毛片女人18水好多| www.色视频.com| 国产单亲对白刺激| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 最近最新中文字幕大全免费视频| 国产亚洲精品av在线| 天堂√8在线中文| 成熟少妇高潮喷水视频| 精华霜和精华液先用哪个| www.www免费av| 亚洲国产精品合色在线| 一个人免费在线观看电影| 免费在线观看日本一区| 深夜精品福利| 日本黄色片子视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 精品欧美国产一区二区三| 国产免费男女视频| 欧美日韩乱码在线| 国产亚洲精品综合一区在线观看| av欧美777| 性欧美人与动物交配| 全区人妻精品视频| 高清毛片免费观看视频网站| 又紧又爽又黄一区二区| 免费观看人在逋| 人人妻人人看人人澡| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美成人免费av一区二区三区| 97碰自拍视频| 欧美成狂野欧美在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 欧美zozozo另类| 看黄色毛片网站| 88av欧美| 美女高潮的动态| ponron亚洲| 一本一本综合久久| 婷婷精品国产亚洲av| 精品免费久久久久久久清纯| 看黄色毛片网站| 国产91精品成人一区二区三区| 亚洲人成网站在线播| 91字幕亚洲| 午夜精品久久久久久毛片777| 网址你懂的国产日韩在线| 宅男免费午夜| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 免费一级毛片在线播放高清视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产精品精品国产色婷婷| 精品欧美国产一区二区三| 国产 一区 欧美 日韩| 成年女人看的毛片在线观看| 国产一区二区在线av高清观看| 国产麻豆成人av免费视频| 国产免费男女视频| 国产精品久久久久久精品电影| 99riav亚洲国产免费| 日韩欧美在线乱码| 啦啦啦免费观看视频1| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 51国产日韩欧美| 白带黄色成豆腐渣| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 无限看片的www在线观看| 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产免费av片在线观看野外av| 夜夜夜夜夜久久久久| 亚洲专区中文字幕在线| 欧美色视频一区免费| 国产99白浆流出| 免费观看的影片在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 久久精品影院6| 精品久久久久久久久久久久久| 午夜a级毛片| x7x7x7水蜜桃| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产日本99.免费观看| 免费在线观看影片大全网站| 在线观看免费午夜福利视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产精华一区二区三区| 国产免费一级a男人的天堂| 一本一本综合久久| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲欧美日韩高清专用| 91久久精品电影网| 国模一区二区三区四区视频| 成年女人看的毛片在线观看| 一本一本综合久久| 精品国产亚洲在线| av女优亚洲男人天堂| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久九九热精品免费| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 免费观看的影片在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 日韩av在线大香蕉| 国产毛片a区久久久久| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 欧美日韩乱码在线| 一本综合久久免费| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国内精品一区二区在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美乱码精品一区二区三区| 91在线精品国自产拍蜜月 | 精品国产三级普通话版| 亚洲天堂国产精品一区在线| 美女黄网站色视频| 国产精品永久免费网站| 99精品欧美一区二区三区四区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 最新中文字幕久久久久| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产成人欧美在线观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 欧美极品一区二区三区四区| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产av一区在线观看免费| 亚洲激情在线av| 精品一区二区三区av网在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 日本三级黄在线观看| 午夜免费观看网址| 两个人看的免费小视频| 欧美午夜高清在线| 免费人成在线观看视频色| 国产一区二区激情短视频| a级一级毛片免费在线观看| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 中文字幕av在线有码专区| 90打野战视频偷拍视频| 在线国产一区二区在线| 亚洲七黄色美女视频| 精品福利观看| 最后的刺客免费高清国语| 在线a可以看的网站| 国产精华一区二区三区| 日韩人妻高清精品专区| 国产精品 国内视频| 91九色精品人成在线观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲色图av天堂| 色播亚洲综合网| 99视频精品全部免费 在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 变态另类成人亚洲欧美熟女| av女优亚洲男人天堂| 午夜福利在线在线| av片东京热男人的天堂| 精品国产三级普通话版| 精品一区二区三区av网在线观看| 波多野结衣高清作品| av专区在线播放| 18禁在线播放成人免费| 99久久99久久久精品蜜桃| 一夜夜www| 手机成人av网站| 亚洲精品色激情综合| 亚洲av成人精品一区久久| 国产亚洲欧美在线一区二区| 久久亚洲精品不卡| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| netflix在线观看网站| 日日干狠狠操夜夜爽| 国内精品一区二区在线观看| 淫秽高清视频在线观看| 成人永久免费在线观看视频| 午夜福利视频1000在线观看| 丁香六月欧美| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 亚洲av二区三区四区| 久久精品综合一区二区三区| 国产在线精品亚洲第一网站| 久久精品国产自在天天线| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产91精品成人一区二区三区| 国内精品久久久久久久电影| 国产黄片美女视频| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 国产精品亚洲一级av第二区| 综合色av麻豆| 免费看光身美女| 色精品久久人妻99蜜桃| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 好男人在线观看高清免费视频| 男人舔奶头视频| e午夜精品久久久久久久| 精品国产三级普通话版| 一级毛片女人18水好多| 欧美一区二区国产精品久久精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产精华一区二区三区| 欧美日韩黄片免| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品国产三级普通话版| 精品国内亚洲2022精品成人| 午夜福利免费观看在线| 成年版毛片免费区| 午夜精品久久久久久毛片777| 人妻夜夜爽99麻豆av| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲一区二区三区色噜噜| 日韩av在线大香蕉| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 哪里可以看免费的av片| 亚洲男人的天堂狠狠| 村上凉子中文字幕在线| 一本一本综合久久| 丁香六月欧美| 18禁国产床啪视频网站| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 精品一区二区三区人妻视频| 最后的刺客免费高清国语| 波野结衣二区三区在线 | 国产精品美女特级片免费视频播放器| 又黄又爽又免费观看的视频| 香蕉丝袜av| 中文字幕高清在线视频| 午夜福利免费观看在线| 国产欧美日韩精品一区二区| 色吧在线观看| 国产综合懂色| 在线视频色国产色| 51国产日韩欧美| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 无遮挡黄片免费观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产成年人精品一区二区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国内精品美女久久久久久| 国产成人欧美在线观看| 日本精品一区二区三区蜜桃| 欧美乱码精品一区二区三区| 日韩av在线大香蕉| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲人成网站在线播| 美女黄网站色视频| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 免费观看的影片在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久香蕉国产精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 男插女下体视频免费在线播放| 国产三级在线视频| 久久久久久久亚洲中文字幕 | 日韩亚洲欧美综合| 国产99白浆流出| 国产单亲对白刺激| 亚洲av成人av| 亚洲国产精品合色在线| 午夜福利视频1000在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| xxx96com| 久久久久久国产a免费观看| 精品福利观看| 51国产日韩欧美| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 国产成人av激情在线播放| 午夜福利免费观看在线| 一个人看视频在线观看www免费 | 脱女人内裤的视频| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 中亚洲国语对白在线视频| 中文字幕av成人在线电影| 99久国产av精品| 九色成人免费人妻av| 色老头精品视频在线观看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 国产野战对白在线观看| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲av第一区精品v没综合| 午夜两性在线视频| 国产单亲对白刺激| 99在线人妻在线中文字幕| 91在线观看av| 欧美成狂野欧美在线观看| 欧美在线黄色| 窝窝影院91人妻| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲无线在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 黄色片一级片一级黄色片| 一进一出好大好爽视频| 波多野结衣巨乳人妻| 性色avwww在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 日本免费a在线| 老熟妇仑乱视频hdxx| 亚洲第一电影网av| 极品教师在线免费播放| 久久国产精品影院| 少妇人妻精品综合一区二区 | 97超视频在线观看视频| 欧美+日韩+精品| 国产真实乱freesex| 国产免费av片在线观看野外av| 美女被艹到高潮喷水动态| 成人无遮挡网站| 精品久久久久久,| 成人欧美大片| 岛国在线免费视频观看| 波多野结衣高清无吗| 九色国产91popny在线| 免费高清视频大片| 国产精品99久久久久久久久| 欧美日韩福利视频一区二区| 丰满的人妻完整版| 美女被艹到高潮喷水动态| 在线观看午夜福利视频| 美女免费视频网站| 久久久久久久久中文| 男女视频在线观看网站免费| 欧美日本亚洲视频在线播放| 免费人成在线观看视频色| 在线观看午夜福利视频| 波多野结衣高清无吗| 国产成人av激情在线播放| 国产一区二区在线av高清观看| 一个人看的www免费观看视频| 可以在线观看的亚洲视频| 高清日韩中文字幕在线| 日韩国内少妇激情av| 在线免费观看不下载黄p国产 | 此物有八面人人有两片|