• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    周齡和激素水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵效果的影響

    2012-09-17 13:28:46朱祥宇陳振文杜小燕
    中國比較醫(yī)學雜志 2012年8期
    關(guān)鍵詞:沙鼠卵母細胞周齡

    路 靜,朱祥宇,王 超,王 迎,陳振文,杜小燕

    (1.首都醫(yī)科大學實驗動物部,北京 100069;2.北京大學醫(yī)學部實驗動物部,北京 100191)

    周齡和激素水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵效果的影響

    路 靜1,朱祥宇2,王 超1,王 迎1,陳振文1,杜小燕1

    (1.首都醫(yī)科大學實驗動物部,北京 100069;2.北京大學醫(yī)學部實驗動物部,北京 100191)

    目的 探討不同周齡和激素水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵效果的影響,以期確定長爪沙鼠最佳超排周齡和激素使用劑量。方法 腹腔注射10 IU PMSG/HCG對4~18周齡8個年齡段的雌性長爪沙鼠進行超數(shù)排卵,末次注射16~17 h內(nèi)對各組動物卵母細胞計數(shù),確定最佳超排周齡后,對該年齡動物以5、10、15 IU3個劑量水平腹腔注射PMSG/HCG,觀察各組動物的卵母細胞計數(shù)差異。結(jié)果 與其它周齡組相比,6周齡組長爪沙鼠超數(shù)排卵后的卵母細胞數(shù)最多,各組間有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而5、10、15IU等3個劑量組的超排效果也有一定的差異,10 IU組數(shù)量最高。結(jié)論 對長爪沙鼠而言,采用10 IU激素注射和6周齡的動物進行超數(shù)排卵,獲得的卵母細胞數(shù)量最多而且超排效果穩(wěn)定性。

    長爪沙鼠;周齡;劑量;超數(shù)排卵

    長爪沙鼠,又稱蒙古沙鼠(Meriones unguiculatus,Mongolian gerbil),屬于哺乳綱,嚙齒目,倉鼠科,沙鼠亞科,沙鼠屬。由于其具有一些獨特的解剖學、生理學和行為學特征,是一種正在開發(fā)的,具有廣泛應用前景的“多功能”實驗動物,目前已廣泛應用于腦缺血、營養(yǎng)代謝、寄生蟲、藥理學、胃癌等研究領(lǐng)域,甚至在聽覺、焦慮等研究領(lǐng)域也發(fā)揮了重要作用[1-5]。但遺憾的是,國內(nèi)外對其生殖以及胚胎發(fā)育的研究均鮮有報道,這極大地桎梏了長爪沙鼠的開發(fā)和利用。為了探討長爪沙鼠穩(wěn)定高效的超排方法,獲取數(shù)量較多及質(zhì)量較高的長爪沙鼠的成熟卵母細胞,本文從影響超數(shù)排卵最重要的兩種因素年齡和激素劑量入手,對長爪沙鼠的超數(shù)排卵效果進行研究,為開展相關(guān)的胚胎研究提供前期基礎(chǔ)。

    1 材料和方法

    1.1 實驗動物

    普通級長爪沙鼠40只,雌性,體重30~75 g,來自首都醫(yī)科大學實驗動物部,生產(chǎn)合格證號 SCXK(京)2000-0012,飼養(yǎng)于控制溫濕度的普通環(huán)境中。

    1.2 試劑

    PMSG(孕馬血清促性腺激素),HCG(人絨毛膜促性腺激素)均購西美杰公司;透明質(zhì)酸酶購自美國Sigma公司,生理鹽水,M2培養(yǎng)液,75%乙醇等。

    1.3 器械

    35mm塑料培養(yǎng)皿,體視顯微鏡,倒置顯微鏡,CO2培養(yǎng)箱,超凈工作臺,滅菌手術(shù)器械(眼科剪、眼科鑷、顯微剪和顯微鑷等)。

    1.4 超數(shù)排卵實驗過程

    以年齡因素為變量的實驗,長爪沙鼠共分為8組,分別為 4、6、8、10、12、14、16、18 周齡,每組 4 只,注射劑量為10 IU PMSG/HCG。以劑量為變量的長爪沙鼠共分為 3個組,分別為 5、10和 15 IU的PMSG/HCG。給長爪沙鼠腹腔注射 PMSG后,46~48 h內(nèi)再腹腔注射HCG,此后在16~17 h內(nèi)將長爪沙鼠頸椎脫臼處死,仰臥噴灑75%酒精,打開腹腔,分別取出兩側(cè)輸卵管和卵巢置于盛有M2培養(yǎng)液液滴的培養(yǎng)皿中,在雙筒體視顯微鏡下,用顯微鑷撕開輸卵管膨大的壺腹部,釋出卵母細胞-卵丘細胞復合體。將卵母細胞-卵丘細胞復合體收集到含有0.1%透明質(zhì)酸酶的 M2液滴中,處理3~5 min,移入M2液滴中,洗滌1~2次,在體視顯微鏡和倒置顯微鏡下觀察,計算卵母細胞數(shù)。

    1.5 統(tǒng)計學分析

    對于不同周齡以及不同激素劑量各組間的比較采用方差分析進行統(tǒng)計學分析。

    2 結(jié)果

    2.1 不同周齡的長爪沙鼠超數(shù)排卵的效果

    在本試驗中,我們對 4、6、8、10、12、14、16、18 周齡的長爪沙鼠分別腹腔注射10 IU的PMSG/HCG后對其超數(shù)排卵的卵母細胞數(shù)進行了分析,結(jié)果見圖1。從圖1可以看出,與其他各年齡組相比,6周齡組的動物取卵總數(shù)最高,而且動物個體間的超排數(shù)量差異較小,超排效果比較穩(wěn)定。6周齡后隨著年齡的增加,取卵數(shù)呈下降趨勢。

    2.2 不同激素劑量水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵后的效果

    鑒于目前對長爪沙鼠超數(shù)排卵的激素劑量水平還不十分清楚,我們分別用 5、10和 15 IU的PMSG/HCG 3個劑量對其進行了超數(shù)排卵實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn),10 IU組的超數(shù)排卵后卵卵母細胞總數(shù)最高,5 IU的最低,15 IU劑量組的介于二者之間,經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)3個劑量組之間差異有顯著性(P<0.05)(表1)。

    圖1 不同周齡動物超排后的取卵數(shù)平均值Fig.1 The average number of eggs obtained in gerbils ofdifferent weeks-ages after superovulation

    表1 經(jīng)3個不同劑量腹腔注射PMSG/HCG于6周齡的長爪沙鼠后超數(shù)排卵的結(jié)果Tab.1 Results of superovulation after intraperitoneal injection of 5,10,15 IU PMSG/HCG in gerbils at the age of 6 weeks

    3 討論

    對小型嚙齒類動物而言,選擇適當年齡段的動物超數(shù)排卵是非常重要的。年齡太小,發(fā)育不成熟,無法完成排卵過程;年齡太大,激素對其發(fā)育過程的干預有限,也無法得到數(shù)量較多的卵母細胞。因此,有許多文獻對小鼠、金黃地鼠、布氏田鼠等實驗動物的超數(shù)排卵年齡進行了研究[7-9]。對長爪沙鼠而言,關(guān)于其超數(shù)排卵的文獻只有 Mochida KJ等[10]的報道,他們選用8~18周齡的動物進行了超數(shù)排卵和胚胎冷凍的研究。分析本實驗的結(jié)果可知,參照封閉群小鼠的經(jīng)驗[7],我們用4周齡剛離乳的沙鼠進行超數(shù)排卵,結(jié)果取卵數(shù)為0,4只動物均沒有收集到卵母細胞,且觀察到其卵巢較小,可能該年齡的動物還不具備產(chǎn)生卵子的能力。而隨著年齡的增加,超排數(shù)量減少,可見激素對其排卵的干預能力受限,如果要取得較好的超排效果,應該結(jié)合陰道涂片的結(jié)果和考慮其發(fā)情周期來確定超排注射激素的時間。本實驗的結(jié)果與Mochida KJ等的略有差異,其一可能是所用動物種群不同造成的差異,其二基于胚胎冷凍的目的,其文中并未詳細說明不同動物周齡收集胚胎數(shù)量的差異,但這種差異應該是存在的。

    超數(shù)排卵的劑量選擇一直是該實驗成功與否的關(guān)鍵,有多個報道對小鼠、家兔、金黃地鼠、布氏田鼠、豬等等動物實施超數(shù)排卵的激素劑量進行了研究[8,9,11-13]。本文僅僅設(shè)定了 5、10 和 15 IU 3 個劑量組對長爪沙鼠進行了超排實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn),10 IU組和15 IU組收集的卵母細胞數(shù)量有一定的差別,但沒有統(tǒng)計學差異。因此,在實際工作中可以考慮采用10 IU PMSG/HCG對長爪沙鼠進行超數(shù)排卵。

    [1]Arguello GarciaR,OrtegaPierres MG. Giardia duodenalis:Analysis of humoral immune response in experimentally infected gerbils(Meriones unguiculatus)[J].Arch Med Res,1997,28:171-178.

    [2]Cruz YR,Tamos YM,Cernuda AM,et al.Treatment with nasal neuro-EPO improves the neurological,cognitive,and histological state in a gerbil model of focal ischemia[J].Sci World J,2010,10:2288-2300.

    [3]Segatelli TM,F(xiàn)ranca LR,Pinheiro PF,et al.Spermatogenic cycle length and spermatogenic efficiency in the gerbil(Meriones unguiculatus)[J].J Androl,2004,25(6):872-880.

    [4]Lee CH,Yoo KY,Choi JH,et al.Cyclin D1 immunoreactivity changes in CA1 pyramidal neurons and dentate granule cells in the gerbil hippocampus after transient forebrain ischemia[J].Neurol Res,2011,33(1):93-100.

    [5]Gleich O,Weiss M,Strutz J.Age-dependent changes in the lateral superior olive of the gerbil(Meriones unguiculatus)[J].Hear Res,2004,194(1-2):47-59.

    [6]Matsubara S,Shibata H,Takahashi M,et al.Cloning of Mongolian gerbil cDNAs encoding inflammatory proteins,and their expression in glandular stomach during H.pylori infection[J].Cancer Sci,2004,95(10):798-802.

    [7]薛亮亮,雷小春,司蘇晉,等.近交系C57小鼠與封閉群昆明小鼠超排卵數(shù)的比較[J].山西醫(yī)科大學學報,2010,41(3):225-226.

    [8]包華瓊 孫嵐,任彬林,等.金黃地鼠超數(shù)排卵模型的建立[J].動物醫(yī)學進展,2010,31(7):52-54.

    [9]潘思丹,施海霞,宋銘晶.SPF級布氏田鼠的繁殖及生長發(fā)育性能測定[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2011,21(1):92-94.

    [10]Mochida KJ,Wakayama T,Takano K,et al.Birth of offspring after transfer of Mongolian gerbil(Meriones Unguiculatus)embryos cryopreserved by vitrification[J].Molec Reprod Dev,2005,70:464-470.

    [11]王田娟,章志國,邢瓊,等.不同超排方法對家兔超數(shù)排卵效果的影響[J].安徽醫(yī)科大學學報,2011,46(4):355-357.

    [12]郭慶勇,況玲,蔣國英,等.激素的不同劑量對小鼠超數(shù)排卵的影響[J].新疆農(nóng)業(yè)科學,2010,47(7):1466-1469.

    [13]鄧凱偉,王峰,王志剛,等.豬超數(shù)排卵影響因素的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)(科技版),2011,4:39-41.

    Effect of Week-Age and Hormonal Level on Superovulation in Mongolian Gerbils

    LU Jing1,ZHU Xiang-yu2,WANG Chao1,WANG Ying1,CHEN Zhen-wen1,DU Xiao-yan1
    (1.Department of Laboratory Animals,Capital Medical University,Beijing 100069,China;2.Department of Laboratory Animals,Peking University Health Science Center,Beijing 100191)

    Objective To investigate the influence of different week-age and the hormonal level on superovulation in Mongolian gerbils.Methods Eight groups of Mongolian gerbils at different age of 4-18 weeks were induced to superovulate by intraperitoneal injection of 10 IU PMSG/HCG,respectively.At 16-17 h after the last injection,the amounts of eggs of animals in different groups were counted and analyzed to determine the best week-age of superovulation.Superovulation was induced in the animals of best week-age by intraperitoneal injection of 5,10,15 IU PMSG/HCG to analyze the different amounts of eggs.Results Compared with other groups,the amount of eggs obtained in gerbils at age of 6 weeks is highest and there were significant differences among all groups(P<0.05).The amounts of eggs obtained in groups of different PMSG/HCG doses were significantly different and that of the 10 IU group was highest.Conclusion

    The age of 6 weeks and the dose of 10 IU PMSG/HCG are the best ages and effective dose to induce superovulation in Mongolian gerbils.

    Mongolian gerbil;Week age;Pregnant mare's serum gonadotrophin,PMSG;Human chorionic gonadotropin,HCG;Doses;Superovuliation.

    R33

    A

    1671-7856(2012)08-0015-03

    10.3969.j.issn.1671.7856.2012.008.003

    2012-05-10

    國家自然基金面上項目(No.31071988)和國家“十二五”科技支撐項目(No.2011BAI15B01)。

    路靜,助理實驗師,主要從事實驗動物技術(shù)工作。

    杜小燕,E-mail:duduyan@ccmu.edu.cn。

    猜你喜歡
    沙鼠卵母細胞周齡
    渝州白鵝剩余采食量測定及其與飼料利用效率相關(guān)性狀的相關(guān)分析
    申鴻七彩雉血液生化指標和肌內(nèi)脂肪含量的測定及其相關(guān)性分析
    你越追,它越遠
    寧都黃公雞睪丸質(zhì)量與不同周齡第二性征的回歸與主成分分析
    長爪沙鼠全腦缺血再灌注損傷后半胱氨酰白三烯受體表達變化的研究
    牛卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)研究
    凋亡抑制劑Z-VAD-FMK在豬卵母細胞冷凍保存中的應用
    褐殼蛋雞
    長爪沙鼠高脂血癥的初步研究
    蜂膠對幽門螺桿菌感染長爪沙鼠胃黏膜影響的初步觀察
    一级黄片播放器| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产真实乱freesex| 欧美成人一区二区免费高清观看| videossex国产| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产91av在线免费观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 亚洲av中文av极速乱| 高清av免费在线| 国产精华一区二区三区| 国产91av在线免费观看| 亚洲成人av在线免费| 日本与韩国留学比较| 国产成人精品婷婷| 日本一二三区视频观看| 又爽又黄a免费视频| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产精品福利在线免费观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 国产精品综合久久久久久久免费| 男人舔女人下体高潮全视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 乱人视频在线观看| 精品国产三级普通话版| 美女大奶头视频| 国产三级中文精品| 1000部很黄的大片| 黄片无遮挡物在线观看| 久久久久精品久久久久真实原创| 亚洲国产欧美在线一区| 中国国产av一级| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 精品久久久噜噜| 精品久久久噜噜| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 日韩av在线大香蕉| 欧美成人一区二区免费高清观看| 69av精品久久久久久| 亚洲精品影视一区二区三区av| av卡一久久| 亚洲人与动物交配视频| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产精品电影一区二区三区| 久久久久国产网址| 看十八女毛片水多多多| 在线观看66精品国产| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| av天堂中文字幕网| 在线天堂最新版资源| 三级国产精品欧美在线观看| 日本黄大片高清| 久久欧美精品欧美久久欧美| 3wmmmm亚洲av在线观看| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 日本wwww免费看| 亚洲精品日韩av片在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 岛国毛片在线播放| 一个人看视频在线观看www免费| 99久久九九国产精品国产免费| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品福利在线免费观看| 国产av在哪里看| 小说图片视频综合网站| 乱码一卡2卡4卡精品| 成人午夜精彩视频在线观看| 亚洲欧美日韩东京热| 国产老妇女一区| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 精品久久久久久久久亚洲| 国产精品,欧美在线| 床上黄色一级片| 一区二区三区乱码不卡18| 久久草成人影院| 午夜免费男女啪啪视频观看| 在线天堂最新版资源| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲av免费高清在线观看| 在线免费观看的www视频| 老司机影院毛片| 国产爱豆传媒在线观看| 成人特级av手机在线观看| 午夜激情欧美在线| 色5月婷婷丁香| av播播在线观看一区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 干丝袜人妻中文字幕| 赤兔流量卡办理| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精品女同一区二区软件| 一区二区三区乱码不卡18| 午夜福利在线观看吧| 国产探花在线观看一区二区| 成年av动漫网址| 夫妻性生交免费视频一级片| 午夜精品一区二区三区免费看| 中文字幕免费在线视频6| 91精品一卡2卡3卡4卡| 性插视频无遮挡在线免费观看| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲最大成人av| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 六月丁香七月| 久久精品夜色国产| 国产高清三级在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美高清成人免费视频www| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产真实伦视频高清在线观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲av男天堂| 一区二区三区四区激情视频| 99在线视频只有这里精品首页| 男人的好看免费观看在线视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 成人性生交大片免费视频hd| 国产视频内射| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 高清视频免费观看一区二区 | 精品免费久久久久久久清纯| 日韩欧美精品免费久久| 舔av片在线| 真实男女啪啪啪动态图| 日本三级黄在线观看| 特大巨黑吊av在线直播| av黄色大香蕉| 国产成人精品一,二区| 国产精品永久免费网站| 嫩草影院入口| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产精品久久视频播放| 午夜精品在线福利| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲美女视频黄频| 国产片特级美女逼逼视频| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲乱码一区二区免费版| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美成人一区二区免费高清观看| av在线亚洲专区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品不卡视频一区二区| 黑人高潮一二区| 少妇熟女欧美另类| 在线观看66精品国产| 九色成人免费人妻av| 免费看av在线观看网站| 永久网站在线| 久久韩国三级中文字幕| 欧美变态另类bdsm刘玥| 久久久成人免费电影| 国产精品嫩草影院av在线观看| 尾随美女入室| 高清日韩中文字幕在线| 桃色一区二区三区在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 97超碰精品成人国产| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲精品影视一区二区三区av| 联通29元200g的流量卡| 国产三级在线视频| 大香蕉97超碰在线| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲欧洲国产日韩| 免费黄色在线免费观看| 欧美区成人在线视频| 成人特级av手机在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 久久久亚洲精品成人影院| 国产高清国产精品国产三级 | 日韩精品有码人妻一区| av在线天堂中文字幕| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产精品不卡视频一区二区| 2022亚洲国产成人精品| 日韩强制内射视频| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 色综合亚洲欧美另类图片| 久久久久久久午夜电影| 99久国产av精品国产电影| 日本一本二区三区精品| 日韩av在线免费看完整版不卡| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 美女高潮的动态| 黄色配什么色好看| 欧美精品一区二区大全| 变态另类丝袜制服| 99热6这里只有精品| 高清毛片免费看| 国产毛片a区久久久久| 亚洲成人中文字幕在线播放| 国国产精品蜜臀av免费| 日韩成人av中文字幕在线观看| 视频中文字幕在线观看| 久久人人爽人人片av| 麻豆一二三区av精品| 精品熟女少妇av免费看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 最新中文字幕久久久久| 午夜免费激情av| 激情 狠狠 欧美| 最近中文字幕高清免费大全6| 人人妻人人看人人澡| 国内精品宾馆在线| 九九爱精品视频在线观看| 久久精品国产亚洲av涩爱| av福利片在线观看| 国产精品一区二区在线观看99 | 欧美高清成人免费视频www| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 久久这里只有精品中国| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 夫妻性生交免费视频一级片| 久久99热这里只频精品6学生 | 欧美日韩在线观看h| 国内精品宾馆在线| 在线a可以看的网站| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 国产精品久久电影中文字幕| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 大香蕉久久网| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产午夜精品一二区理论片| 高清av免费在线| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 99久久精品热视频| 国产单亲对白刺激| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 熟女人妻精品中文字幕| 在线a可以看的网站| 超碰av人人做人人爽久久| 真实男女啪啪啪动态图| 精品一区二区免费观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 精品欧美国产一区二区三| 少妇熟女aⅴ在线视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 久久久久久久国产电影| 中文欧美无线码| 成人性生交大片免费视频hd| 亚洲欧美精品自产自拍| 亚洲精品国产av成人精品| 久久久久国产网址| 日本免费a在线| 联通29元200g的流量卡| 亚洲自偷自拍三级| 直男gayav资源| 亚洲av中文av极速乱| 一二三四中文在线观看免费高清| 久久这里有精品视频免费| 亚洲av成人精品一二三区| 久久人人爽人人片av| 国产免费福利视频在线观看| 免费观看的影片在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 日韩大片免费观看网站 | 亚洲精品自拍成人| 男插女下体视频免费在线播放| 黄色配什么色好看| 久久99热这里只频精品6学生 | 五月玫瑰六月丁香| 久久精品久久久久久久性| 国产精品综合久久久久久久免费| 精品欧美国产一区二区三| av天堂中文字幕网| 亚洲欧美日韩卡通动漫| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲伊人久久精品综合 | 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 毛片一级片免费看久久久久| 中国美白少妇内射xxxbb| 变态另类丝袜制服| 亚洲三级黄色毛片| 国产亚洲91精品色在线| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲综合色惰| 欧美成人精品欧美一级黄| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲综合精品二区| 久久久久久久久久久免费av| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产高清视频在线观看网站| 国产69精品久久久久777片| 小说图片视频综合网站| 一边摸一边抽搐一进一小说| 色网站视频免费| 日本免费a在线| 国产精品人妻久久久久久| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 天堂影院成人在线观看| 亚洲美女视频黄频| 99久久人妻综合| 中文欧美无线码| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久精品91蜜桃| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久精品国产亚洲av涩爱| 成人漫画全彩无遮挡| 成人一区二区视频在线观看| 精品久久久久久久久av| 秋霞伦理黄片| 午夜a级毛片| 超碰97精品在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 99在线视频只有这里精品首页| 五月玫瑰六月丁香| 亚洲图色成人| 日本wwww免费看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲国产精品sss在线观看| 免费在线观看成人毛片| 久久精品人妻少妇| 在线免费观看不下载黄p国产| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲欧美清纯卡通| 欧美区成人在线视频| 亚洲高清免费不卡视频| 亚洲av二区三区四区| 久久精品久久精品一区二区三区| 一个人看视频在线观看www免费| 国产视频首页在线观看| 亚洲无线观看免费| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 简卡轻食公司| 中文字幕av成人在线电影| 一本久久精品| 高清午夜精品一区二区三区| 亚洲综合精品二区| 寂寞人妻少妇视频99o| 能在线免费看毛片的网站| 精品酒店卫生间| 一区二区三区四区激情视频| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产精品精品国产色婷婷| 九九爱精品视频在线观看| 一级黄色大片毛片| 日韩视频在线欧美| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 国产成人一区二区在线| 国产 一区精品| 国产老妇伦熟女老妇高清| 色5月婷婷丁香| 天堂√8在线中文| 国产精品国产三级国产专区5o | 一个人观看的视频www高清免费观看| av专区在线播放| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美xxxx性猛交bbbb| 成人二区视频| 国产真实伦视频高清在线观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 男的添女的下面高潮视频| 国产人妻一区二区三区在| 内射极品少妇av片p| 国产高清视频在线观看网站| 99久久精品一区二区三区| 久久精品综合一区二区三区| 国产伦理片在线播放av一区| 91在线精品国自产拍蜜月| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲国产精品成人综合色| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 亚洲在久久综合| 男女国产视频网站| 欧美+日韩+精品| 日本爱情动作片www.在线观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 国产精品.久久久| 免费观看人在逋| 免费看光身美女| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产高清不卡午夜福利| 99久国产av精品国产电影| 我的老师免费观看完整版| 毛片女人毛片| 久久精品91蜜桃| 欧美色视频一区免费| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产麻豆成人av免费视频| 2022亚洲国产成人精品| 极品教师在线视频| 成人国产麻豆网| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲国产欧美在线一区| 精品久久久噜噜| 亚洲欧洲日产国产| 国产成人一区二区在线| 久久韩国三级中文字幕| 免费观看在线日韩| 最近的中文字幕免费完整| 亚洲真实伦在线观看| 免费看日本二区| 午夜a级毛片| av黄色大香蕉| 精品久久久久久久久av| 国产成人一区二区在线| 国产成人a∨麻豆精品| 国产精品国产高清国产av| 免费搜索国产男女视频| 免费观看在线日韩| 午夜激情欧美在线| 五月伊人婷婷丁香| 国产在线一区二区三区精 | 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 久久99热这里只有精品18| 午夜日本视频在线| 久久热精品热| 老司机影院成人| 永久网站在线| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产精品国产三级专区第一集| 免费看日本二区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 草草在线视频免费看| 国产色爽女视频免费观看| 在线免费观看的www视频| 成人一区二区视频在线观看| 免费看美女性在线毛片视频| 特级一级黄色大片| 嫩草影院新地址| 免费av不卡在线播放| 一本一本综合久久| 久久99精品国语久久久| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲av电影不卡..在线观看| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 国产精品熟女久久久久浪| 身体一侧抽搐| 国产美女午夜福利| www日本黄色视频网| 精品久久久久久成人av| 国产男人的电影天堂91| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 亚洲av熟女| 久久久久久久久久久免费av| 久久久久网色| 日本五十路高清| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品一区二区性色av| 久久精品国产亚洲网站| 免费观看a级毛片全部| 特大巨黑吊av在线直播| 久久久久久伊人网av| 可以在线观看毛片的网站| or卡值多少钱| 亚洲经典国产精华液单| 大香蕉97超碰在线| 2021天堂中文幕一二区在线观| 晚上一个人看的免费电影| 国产精品,欧美在线| 久久久a久久爽久久v久久| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产午夜精品论理片| 亚洲五月天丁香| 日本免费在线观看一区| 亚洲人与动物交配视频| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | or卡值多少钱| 亚洲经典国产精华液单| 熟女人妻精品中文字幕| 看非洲黑人一级黄片| 级片在线观看| 亚洲国产欧美人成| kizo精华| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 少妇裸体淫交视频免费看高清| 成年版毛片免费区| 午夜爱爱视频在线播放| 久久精品国产自在天天线| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 嫩草影院精品99| av专区在线播放| av免费在线看不卡| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 欧美又色又爽又黄视频| 欧美成人一区二区免费高清观看| 国产毛片a区久久久久| 久久精品综合一区二区三区| 可以在线观看毛片的网站| 长腿黑丝高跟| 天堂影院成人在线观看| 国产私拍福利视频在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲国产精品专区欧美| 国产精品伦人一区二区| 日本午夜av视频| 成年免费大片在线观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 51国产日韩欧美| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 毛片一级片免费看久久久久| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产精品三级大全| 免费人成在线观看视频色| 国产精品日韩av在线免费观看| 老女人水多毛片| 日韩大片免费观看网站 | 亚洲精品日韩在线中文字幕| 99热这里只有是精品在线观看| 午夜福利高清视频| 乱系列少妇在线播放| 国产 一区精品| 国产日韩欧美在线精品| 国产黄片视频在线免费观看| 天堂中文最新版在线下载 | 久久99热这里只频精品6学生 | 欧美成人一区二区免费高清观看| 午夜日本视频在线| av黄色大香蕉| 深爱激情五月婷婷| 色网站视频免费| 国产精品国产三级国产专区5o | 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲av成人av| 色综合色国产| 在现免费观看毛片| 波多野结衣高清无吗| 高清在线视频一区二区三区 | 国产精品电影一区二区三区| 日韩av在线大香蕉| 永久免费av网站大全| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 在现免费观看毛片| 日韩中字成人| 中文字幕久久专区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 在线观看av片永久免费下载| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲内射少妇av| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 搡女人真爽免费视频火全软件| 人人妻人人看人人澡| 一区二区三区乱码不卡18| av播播在线观看一区| 精品久久久久久久久久久久久| 男女国产视频网站| 插逼视频在线观看| 久久99热6这里只有精品| 日韩三级伦理在线观看| 九草在线视频观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产成人免费观看mmmm| 国产免费男女视频| 免费观看的影片在线观看| av免费观看日本| 国产伦精品一区二区三区四那| 一区二区三区免费毛片| 国产三级中文精品| 亚洲精品456在线播放app| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| .国产精品久久| 日本黄色片子视频| 高清av免费在线| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 人妻少妇偷人精品九色| 99热网站在线观看| 成人欧美大片| 午夜老司机福利剧场| 久久99精品国语久久久| 黄色欧美视频在线观看| 嫩草影院入口| 亚洲欧美精品专区久久| 一级毛片aaaaaa免费看小| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 99久久人妻综合| 在线观看美女被高潮喷水网站| 永久网站在线| 亚洲美女搞黄在线观看| 久久综合国产亚洲精品| 三级国产精品欧美在线观看| av线在线观看网站| 少妇裸体淫交视频免费看高清| ponron亚洲| 在线播放国产精品三级| 国产高清国产精品国产三级 | 国产精品国产三级国产专区5o | 不卡视频在线观看欧美| 国产真实乱freesex| 国产精品av视频在线免费观看| 久久久欧美国产精品| 国内精品宾馆在线| 久久国产乱子免费精品| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 日本与韩国留学比较|