• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    周齡和激素水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵效果的影響

    2012-09-17 13:28:46朱祥宇陳振文杜小燕
    中國比較醫(yī)學雜志 2012年8期
    關(guān)鍵詞:沙鼠卵母細胞周齡

    路 靜,朱祥宇,王 超,王 迎,陳振文,杜小燕

    (1.首都醫(yī)科大學實驗動物部,北京 100069;2.北京大學醫(yī)學部實驗動物部,北京 100191)

    周齡和激素水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵效果的影響

    路 靜1,朱祥宇2,王 超1,王 迎1,陳振文1,杜小燕1

    (1.首都醫(yī)科大學實驗動物部,北京 100069;2.北京大學醫(yī)學部實驗動物部,北京 100191)

    目的 探討不同周齡和激素水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵效果的影響,以期確定長爪沙鼠最佳超排周齡和激素使用劑量。方法 腹腔注射10 IU PMSG/HCG對4~18周齡8個年齡段的雌性長爪沙鼠進行超數(shù)排卵,末次注射16~17 h內(nèi)對各組動物卵母細胞計數(shù),確定最佳超排周齡后,對該年齡動物以5、10、15 IU3個劑量水平腹腔注射PMSG/HCG,觀察各組動物的卵母細胞計數(shù)差異。結(jié)果 與其它周齡組相比,6周齡組長爪沙鼠超數(shù)排卵后的卵母細胞數(shù)最多,各組間有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而5、10、15IU等3個劑量組的超排效果也有一定的差異,10 IU組數(shù)量最高。結(jié)論 對長爪沙鼠而言,采用10 IU激素注射和6周齡的動物進行超數(shù)排卵,獲得的卵母細胞數(shù)量最多而且超排效果穩(wěn)定性。

    長爪沙鼠;周齡;劑量;超數(shù)排卵

    長爪沙鼠,又稱蒙古沙鼠(Meriones unguiculatus,Mongolian gerbil),屬于哺乳綱,嚙齒目,倉鼠科,沙鼠亞科,沙鼠屬。由于其具有一些獨特的解剖學、生理學和行為學特征,是一種正在開發(fā)的,具有廣泛應用前景的“多功能”實驗動物,目前已廣泛應用于腦缺血、營養(yǎng)代謝、寄生蟲、藥理學、胃癌等研究領(lǐng)域,甚至在聽覺、焦慮等研究領(lǐng)域也發(fā)揮了重要作用[1-5]。但遺憾的是,國內(nèi)外對其生殖以及胚胎發(fā)育的研究均鮮有報道,這極大地桎梏了長爪沙鼠的開發(fā)和利用。為了探討長爪沙鼠穩(wěn)定高效的超排方法,獲取數(shù)量較多及質(zhì)量較高的長爪沙鼠的成熟卵母細胞,本文從影響超數(shù)排卵最重要的兩種因素年齡和激素劑量入手,對長爪沙鼠的超數(shù)排卵效果進行研究,為開展相關(guān)的胚胎研究提供前期基礎(chǔ)。

    1 材料和方法

    1.1 實驗動物

    普通級長爪沙鼠40只,雌性,體重30~75 g,來自首都醫(yī)科大學實驗動物部,生產(chǎn)合格證號 SCXK(京)2000-0012,飼養(yǎng)于控制溫濕度的普通環(huán)境中。

    1.2 試劑

    PMSG(孕馬血清促性腺激素),HCG(人絨毛膜促性腺激素)均購西美杰公司;透明質(zhì)酸酶購自美國Sigma公司,生理鹽水,M2培養(yǎng)液,75%乙醇等。

    1.3 器械

    35mm塑料培養(yǎng)皿,體視顯微鏡,倒置顯微鏡,CO2培養(yǎng)箱,超凈工作臺,滅菌手術(shù)器械(眼科剪、眼科鑷、顯微剪和顯微鑷等)。

    1.4 超數(shù)排卵實驗過程

    以年齡因素為變量的實驗,長爪沙鼠共分為8組,分別為 4、6、8、10、12、14、16、18 周齡,每組 4 只,注射劑量為10 IU PMSG/HCG。以劑量為變量的長爪沙鼠共分為 3個組,分別為 5、10和 15 IU的PMSG/HCG。給長爪沙鼠腹腔注射 PMSG后,46~48 h內(nèi)再腹腔注射HCG,此后在16~17 h內(nèi)將長爪沙鼠頸椎脫臼處死,仰臥噴灑75%酒精,打開腹腔,分別取出兩側(cè)輸卵管和卵巢置于盛有M2培養(yǎng)液液滴的培養(yǎng)皿中,在雙筒體視顯微鏡下,用顯微鑷撕開輸卵管膨大的壺腹部,釋出卵母細胞-卵丘細胞復合體。將卵母細胞-卵丘細胞復合體收集到含有0.1%透明質(zhì)酸酶的 M2液滴中,處理3~5 min,移入M2液滴中,洗滌1~2次,在體視顯微鏡和倒置顯微鏡下觀察,計算卵母細胞數(shù)。

    1.5 統(tǒng)計學分析

    對于不同周齡以及不同激素劑量各組間的比較采用方差分析進行統(tǒng)計學分析。

    2 結(jié)果

    2.1 不同周齡的長爪沙鼠超數(shù)排卵的效果

    在本試驗中,我們對 4、6、8、10、12、14、16、18 周齡的長爪沙鼠分別腹腔注射10 IU的PMSG/HCG后對其超數(shù)排卵的卵母細胞數(shù)進行了分析,結(jié)果見圖1。從圖1可以看出,與其他各年齡組相比,6周齡組的動物取卵總數(shù)最高,而且動物個體間的超排數(shù)量差異較小,超排效果比較穩(wěn)定。6周齡后隨著年齡的增加,取卵數(shù)呈下降趨勢。

    2.2 不同激素劑量水平對長爪沙鼠超數(shù)排卵后的效果

    鑒于目前對長爪沙鼠超數(shù)排卵的激素劑量水平還不十分清楚,我們分別用 5、10和 15 IU的PMSG/HCG 3個劑量對其進行了超數(shù)排卵實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn),10 IU組的超數(shù)排卵后卵卵母細胞總數(shù)最高,5 IU的最低,15 IU劑量組的介于二者之間,經(jīng)方差分析發(fā)現(xiàn)3個劑量組之間差異有顯著性(P<0.05)(表1)。

    圖1 不同周齡動物超排后的取卵數(shù)平均值Fig.1 The average number of eggs obtained in gerbils ofdifferent weeks-ages after superovulation

    表1 經(jīng)3個不同劑量腹腔注射PMSG/HCG于6周齡的長爪沙鼠后超數(shù)排卵的結(jié)果Tab.1 Results of superovulation after intraperitoneal injection of 5,10,15 IU PMSG/HCG in gerbils at the age of 6 weeks

    3 討論

    對小型嚙齒類動物而言,選擇適當年齡段的動物超數(shù)排卵是非常重要的。年齡太小,發(fā)育不成熟,無法完成排卵過程;年齡太大,激素對其發(fā)育過程的干預有限,也無法得到數(shù)量較多的卵母細胞。因此,有許多文獻對小鼠、金黃地鼠、布氏田鼠等實驗動物的超數(shù)排卵年齡進行了研究[7-9]。對長爪沙鼠而言,關(guān)于其超數(shù)排卵的文獻只有 Mochida KJ等[10]的報道,他們選用8~18周齡的動物進行了超數(shù)排卵和胚胎冷凍的研究。分析本實驗的結(jié)果可知,參照封閉群小鼠的經(jīng)驗[7],我們用4周齡剛離乳的沙鼠進行超數(shù)排卵,結(jié)果取卵數(shù)為0,4只動物均沒有收集到卵母細胞,且觀察到其卵巢較小,可能該年齡的動物還不具備產(chǎn)生卵子的能力。而隨著年齡的增加,超排數(shù)量減少,可見激素對其排卵的干預能力受限,如果要取得較好的超排效果,應該結(jié)合陰道涂片的結(jié)果和考慮其發(fā)情周期來確定超排注射激素的時間。本實驗的結(jié)果與Mochida KJ等的略有差異,其一可能是所用動物種群不同造成的差異,其二基于胚胎冷凍的目的,其文中并未詳細說明不同動物周齡收集胚胎數(shù)量的差異,但這種差異應該是存在的。

    超數(shù)排卵的劑量選擇一直是該實驗成功與否的關(guān)鍵,有多個報道對小鼠、家兔、金黃地鼠、布氏田鼠、豬等等動物實施超數(shù)排卵的激素劑量進行了研究[8,9,11-13]。本文僅僅設(shè)定了 5、10 和 15 IU 3 個劑量組對長爪沙鼠進行了超排實驗,結(jié)果發(fā)現(xiàn),10 IU組和15 IU組收集的卵母細胞數(shù)量有一定的差別,但沒有統(tǒng)計學差異。因此,在實際工作中可以考慮采用10 IU PMSG/HCG對長爪沙鼠進行超數(shù)排卵。

    [1]Arguello GarciaR,OrtegaPierres MG. Giardia duodenalis:Analysis of humoral immune response in experimentally infected gerbils(Meriones unguiculatus)[J].Arch Med Res,1997,28:171-178.

    [2]Cruz YR,Tamos YM,Cernuda AM,et al.Treatment with nasal neuro-EPO improves the neurological,cognitive,and histological state in a gerbil model of focal ischemia[J].Sci World J,2010,10:2288-2300.

    [3]Segatelli TM,F(xiàn)ranca LR,Pinheiro PF,et al.Spermatogenic cycle length and spermatogenic efficiency in the gerbil(Meriones unguiculatus)[J].J Androl,2004,25(6):872-880.

    [4]Lee CH,Yoo KY,Choi JH,et al.Cyclin D1 immunoreactivity changes in CA1 pyramidal neurons and dentate granule cells in the gerbil hippocampus after transient forebrain ischemia[J].Neurol Res,2011,33(1):93-100.

    [5]Gleich O,Weiss M,Strutz J.Age-dependent changes in the lateral superior olive of the gerbil(Meriones unguiculatus)[J].Hear Res,2004,194(1-2):47-59.

    [6]Matsubara S,Shibata H,Takahashi M,et al.Cloning of Mongolian gerbil cDNAs encoding inflammatory proteins,and their expression in glandular stomach during H.pylori infection[J].Cancer Sci,2004,95(10):798-802.

    [7]薛亮亮,雷小春,司蘇晉,等.近交系C57小鼠與封閉群昆明小鼠超排卵數(shù)的比較[J].山西醫(yī)科大學學報,2010,41(3):225-226.

    [8]包華瓊 孫嵐,任彬林,等.金黃地鼠超數(shù)排卵模型的建立[J].動物醫(yī)學進展,2010,31(7):52-54.

    [9]潘思丹,施海霞,宋銘晶.SPF級布氏田鼠的繁殖及生長發(fā)育性能測定[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2011,21(1):92-94.

    [10]Mochida KJ,Wakayama T,Takano K,et al.Birth of offspring after transfer of Mongolian gerbil(Meriones Unguiculatus)embryos cryopreserved by vitrification[J].Molec Reprod Dev,2005,70:464-470.

    [11]王田娟,章志國,邢瓊,等.不同超排方法對家兔超數(shù)排卵效果的影響[J].安徽醫(yī)科大學學報,2011,46(4):355-357.

    [12]郭慶勇,況玲,蔣國英,等.激素的不同劑量對小鼠超數(shù)排卵的影響[J].新疆農(nóng)業(yè)科學,2010,47(7):1466-1469.

    [13]鄧凱偉,王峰,王志剛,等.豬超數(shù)排卵影響因素的研究[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)(科技版),2011,4:39-41.

    Effect of Week-Age and Hormonal Level on Superovulation in Mongolian Gerbils

    LU Jing1,ZHU Xiang-yu2,WANG Chao1,WANG Ying1,CHEN Zhen-wen1,DU Xiao-yan1
    (1.Department of Laboratory Animals,Capital Medical University,Beijing 100069,China;2.Department of Laboratory Animals,Peking University Health Science Center,Beijing 100191)

    Objective To investigate the influence of different week-age and the hormonal level on superovulation in Mongolian gerbils.Methods Eight groups of Mongolian gerbils at different age of 4-18 weeks were induced to superovulate by intraperitoneal injection of 10 IU PMSG/HCG,respectively.At 16-17 h after the last injection,the amounts of eggs of animals in different groups were counted and analyzed to determine the best week-age of superovulation.Superovulation was induced in the animals of best week-age by intraperitoneal injection of 5,10,15 IU PMSG/HCG to analyze the different amounts of eggs.Results Compared with other groups,the amount of eggs obtained in gerbils at age of 6 weeks is highest and there were significant differences among all groups(P<0.05).The amounts of eggs obtained in groups of different PMSG/HCG doses were significantly different and that of the 10 IU group was highest.Conclusion

    The age of 6 weeks and the dose of 10 IU PMSG/HCG are the best ages and effective dose to induce superovulation in Mongolian gerbils.

    Mongolian gerbil;Week age;Pregnant mare's serum gonadotrophin,PMSG;Human chorionic gonadotropin,HCG;Doses;Superovuliation.

    R33

    A

    1671-7856(2012)08-0015-03

    10.3969.j.issn.1671.7856.2012.008.003

    2012-05-10

    國家自然基金面上項目(No.31071988)和國家“十二五”科技支撐項目(No.2011BAI15B01)。

    路靜,助理實驗師,主要從事實驗動物技術(shù)工作。

    杜小燕,E-mail:duduyan@ccmu.edu.cn。

    猜你喜歡
    沙鼠卵母細胞周齡
    渝州白鵝剩余采食量測定及其與飼料利用效率相關(guān)性狀的相關(guān)分析
    申鴻七彩雉血液生化指標和肌內(nèi)脂肪含量的測定及其相關(guān)性分析
    你越追,它越遠
    寧都黃公雞睪丸質(zhì)量與不同周齡第二性征的回歸與主成分分析
    長爪沙鼠全腦缺血再灌注損傷后半胱氨酰白三烯受體表達變化的研究
    牛卵母細胞的體外成熟培養(yǎng)研究
    凋亡抑制劑Z-VAD-FMK在豬卵母細胞冷凍保存中的應用
    褐殼蛋雞
    長爪沙鼠高脂血癥的初步研究
    蜂膠對幽門螺桿菌感染長爪沙鼠胃黏膜影響的初步觀察
    成人毛片a级毛片在线播放| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲人与动物交配视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 两性夫妻黄色片 | 黄色配什么色好看| 丁香六月天网| 免费看av在线观看网站| av不卡在线播放| 国产高清国产精品国产三级| 国产麻豆69| 69精品国产乱码久久久| 一级,二级,三级黄色视频| 国产av精品麻豆| 亚洲在久久综合| 日韩成人伦理影院| 乱人伦中国视频| 国产成人欧美| 久久99热6这里只有精品| 国产片特级美女逼逼视频| 日日爽夜夜爽网站| 久久影院123| av免费观看日本| av在线观看视频网站免费| 熟女电影av网| 日韩在线高清观看一区二区三区| 亚洲伊人色综图| 国产乱来视频区| 女性被躁到高潮视频| 日日爽夜夜爽网站| 免费大片18禁| 91久久精品国产一区二区三区| 久久精品国产自在天天线| 久久久久久久久久久久大奶| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 免费人成在线观看视频色| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 欧美丝袜亚洲另类| 色婷婷久久久亚洲欧美| 一区二区三区乱码不卡18| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 最新的欧美精品一区二区| 精品国产露脸久久av麻豆| 岛国毛片在线播放| 午夜91福利影院| 久久久久久久久久人人人人人人| 婷婷成人精品国产| 欧美xxxx性猛交bbbb| 我要看黄色一级片免费的| av卡一久久| 青春草亚洲视频在线观看| 精品午夜福利在线看| 日韩大片免费观看网站| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 大香蕉久久成人网| 亚洲一码二码三码区别大吗| 波野结衣二区三区在线| 国产欧美亚洲国产| 国产成人一区二区在线| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产淫语在线视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 高清毛片免费看| 少妇 在线观看| 在线 av 中文字幕| 一区二区三区乱码不卡18| 91久久精品国产一区二区三区| 欧美精品国产亚洲| 在线观看三级黄色| 一级片'在线观看视频| 五月玫瑰六月丁香| 午夜久久久在线观看| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 久久久久久人人人人人| 国产片特级美女逼逼视频| 久久国内精品自在自线图片| av国产久精品久网站免费入址| av卡一久久| 好男人视频免费观看在线| 国产成人免费无遮挡视频| 青青草视频在线视频观看| 色视频在线一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲人成网站在线观看播放| 精品一区二区三区视频在线| 亚洲成人手机| 视频中文字幕在线观看| 亚洲精品久久午夜乱码| av国产精品久久久久影院| av在线播放精品| 久久青草综合色| 男女国产视频网站| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 黄片无遮挡物在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 天堂中文最新版在线下载| 国产男女超爽视频在线观看| 色94色欧美一区二区| 亚洲性久久影院| 亚洲精品美女久久av网站| 五月开心婷婷网| 黑丝袜美女国产一区| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 免费高清在线观看日韩| 午夜福利网站1000一区二区三区| 男女边摸边吃奶| 国产 一区精品| 最新中文字幕久久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 日韩av免费高清视频| 国产亚洲最大av| 国精品久久久久久国模美| 久久97久久精品| 人妻人人澡人人爽人人| 国产精品一区www在线观看| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产伦理片在线播放av一区| 国产探花极品一区二区| 久久久久久久久久久免费av| 国产福利在线免费观看视频| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 日本av免费视频播放| 最近最新中文字幕免费大全7| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 午夜激情久久久久久久| 久久ye,这里只有精品| 9191精品国产免费久久| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲av综合色区一区| 日本91视频免费播放| 日韩在线高清观看一区二区三区| 伦精品一区二区三区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 一区二区三区精品91| 久久精品久久久久久久性| 国产精品一区www在线观看| 久久韩国三级中文字幕| 国产精品一区www在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美人与善性xxx| 在线看a的网站| 日本午夜av视频| 少妇的逼好多水| 亚洲成人手机| 97人妻天天添夜夜摸| 中文字幕亚洲精品专区| 精品人妻在线不人妻| 国产成人精品福利久久| 日韩人妻精品一区2区三区| 久久99精品国语久久久| 精品一区二区免费观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 亚洲精品av麻豆狂野| av不卡在线播放| 国产亚洲一区二区精品| 国产xxxxx性猛交| 久久久久国产网址| 丝袜人妻中文字幕| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲情色 制服丝袜| 美国免费a级毛片| 亚洲av综合色区一区| 亚洲,欧美精品.| 国产成人精品福利久久| 22中文网久久字幕| 99热网站在线观看| 天堂8中文在线网| 色婷婷久久久亚洲欧美| 国产爽快片一区二区三区| 欧美变态另类bdsm刘玥| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 久久99蜜桃精品久久| 男女边吃奶边做爰视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 岛国毛片在线播放| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 中国三级夫妇交换| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲性久久影院| 只有这里有精品99| 日韩av免费高清视频| 咕卡用的链子| 国产成人欧美| 国产又色又爽无遮挡免| 亚洲第一区二区三区不卡| 最黄视频免费看| 男女国产视频网站| 最近手机中文字幕大全| 九九爱精品视频在线观看| 人妻一区二区av| 日韩av在线免费看完整版不卡| 欧美精品国产亚洲| 大片免费播放器 马上看| 婷婷色av中文字幕| 免费人成在线观看视频色| 久久精品人人爽人人爽视色| 18在线观看网站| 日韩三级伦理在线观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| 熟妇人妻不卡中文字幕| 午夜福利,免费看| 男的添女的下面高潮视频| 国产精品人妻久久久影院| av电影中文网址| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 热99久久久久精品小说推荐| 欧美精品一区二区大全| 国产一区亚洲一区在线观看| 免费观看无遮挡的男女| 99热这里只有是精品在线观看| 一级爰片在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 国产黄色视频一区二区在线观看| 妹子高潮喷水视频| 乱人伦中国视频| 久久女婷五月综合色啪小说| 欧美日韩视频精品一区| 精品第一国产精品| 国产精品久久久久成人av| 免费黄频网站在线观看国产| 女性生殖器流出的白浆| 日韩中字成人| 国精品久久久久久国模美| 热re99久久精品国产66热6| 久久久精品免费免费高清| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 久久精品国产综合久久久 | 国产精品成人在线| 久久影院123| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品视频人人做人人爽| 男女免费视频国产| 亚洲综合色网址| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲欧美精品自产自拍| 色吧在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲美女搞黄在线观看| 久久国产精品大桥未久av| 久久久久精品久久久久真实原创| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 欧美精品亚洲一区二区| 丝袜喷水一区| 午夜福利在线观看免费完整高清在| av免费在线看不卡| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 另类精品久久| 亚洲性久久影院| 国产熟女午夜一区二区三区| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产欧美亚洲国产| 极品人妻少妇av视频| 99九九在线精品视频| 晚上一个人看的免费电影| 五月开心婷婷网| 亚洲av.av天堂| 国产亚洲精品久久久com| tube8黄色片| 欧美精品一区二区大全| 欧美国产精品一级二级三级| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产免费又黄又爽又色| 国产精品一区二区在线观看99| 亚洲第一区二区三区不卡| 色婷婷av一区二区三区视频| 大片免费播放器 马上看| 内地一区二区视频在线| 欧美最新免费一区二区三区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 大香蕉97超碰在线| 亚洲国产看品久久| 精品福利永久在线观看| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 国产色婷婷99| 大话2 男鬼变身卡| 一边亲一边摸免费视频| 一级黄片播放器| 亚洲性久久影院| 欧美日韩精品成人综合77777| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 黄色一级大片看看| 99热国产这里只有精品6| 中文字幕av电影在线播放| 丝瓜视频免费看黄片| 最近中文字幕2019免费版| 日韩大片免费观看网站| 久久国内精品自在自线图片| 新久久久久国产一级毛片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 成人国语在线视频| 久久久久网色| 考比视频在线观看| av播播在线观看一区| 高清不卡的av网站| tube8黄色片| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 啦啦啦啦在线视频资源| 99精国产麻豆久久婷婷| 成人国产av品久久久| 2021少妇久久久久久久久久久| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 日韩av在线免费看完整版不卡| 久久影院123| 免费黄网站久久成人精品| 99国产综合亚洲精品| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 我要看黄色一级片免费的| 免费黄频网站在线观看国产| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲综合色网址| 999精品在线视频| 国产av码专区亚洲av| 久久人人爽人人爽人人片va| 少妇人妻精品综合一区二区| 午夜福利,免费看| 亚洲欧洲国产日韩| 色婷婷久久久亚洲欧美| 伦精品一区二区三区| 精品一区二区免费观看| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 精品久久国产蜜桃| 免费看av在线观看网站| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲综合色网址| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲成人av在线免费| 精品久久国产蜜桃| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 波野结衣二区三区在线| 久久人人爽人人爽人人片va| 超碰97精品在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 久久久久久人妻| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲色图综合在线观看| 少妇精品久久久久久久| 亚洲精品自拍成人| 一区二区三区四区激情视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产永久视频网站| 久久精品久久精品一区二区三区| 久热久热在线精品观看| 亚洲人成77777在线视频| 黑人高潮一二区| 秋霞在线观看毛片| 国产精品一区二区在线观看99| 男女国产视频网站| 伊人久久国产一区二区| 亚洲精品视频女| 成人无遮挡网站| 亚洲丝袜综合中文字幕| 69精品国产乱码久久久| 99久久精品国产国产毛片| 蜜桃在线观看..| 亚洲av.av天堂| 少妇 在线观看| 少妇高潮的动态图| 男女边吃奶边做爰视频| 男女午夜视频在线观看 | 一二三四在线观看免费中文在 | 99久久中文字幕三级久久日本| 免费黄色在线免费观看| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 中国国产av一级| 乱码一卡2卡4卡精品| 这个男人来自地球电影免费观看 | 永久免费av网站大全| 黄色怎么调成土黄色| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产熟女欧美一区二区| 亚洲国产精品一区三区| 欧美成人午夜免费资源| 人成视频在线观看免费观看| 欧美性感艳星| 精品国产一区二区三区四区第35| 午夜av观看不卡| 9热在线视频观看99| 少妇高潮的动态图| 国产精品女同一区二区软件| 涩涩av久久男人的天堂| 男人操女人黄网站| 欧美日韩av久久| 久久鲁丝午夜福利片| 美女国产视频在线观看| 9191精品国产免费久久| 51国产日韩欧美| 中文字幕亚洲精品专区| 午夜福利乱码中文字幕| 国产探花极品一区二区| 成年美女黄网站色视频大全免费| 成人毛片a级毛片在线播放| 午夜av观看不卡| 综合色丁香网| 国产免费又黄又爽又色| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 美国免费a级毛片| 免费在线观看完整版高清| 日本vs欧美在线观看视频| 久久精品夜色国产| 精品国产露脸久久av麻豆| 中国国产av一级| 国产精品久久久av美女十八| 超色免费av| 一本大道久久a久久精品| 国产欧美亚洲国产| 多毛熟女@视频| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产在视频线精品| 国产探花极品一区二区| 国产成人精品婷婷| 国产乱人偷精品视频| 国产精品偷伦视频观看了| 色婷婷久久久亚洲欧美| 成年人免费黄色播放视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久精品国产a三级三级三级| 午夜av观看不卡| 51国产日韩欧美| 中文字幕人妻丝袜制服| 一区二区三区四区激情视频| 赤兔流量卡办理| 黑人高潮一二区| 丝瓜视频免费看黄片| 国产精品国产三级专区第一集| 美女国产高潮福利片在线看| 女人久久www免费人成看片| 多毛熟女@视频| 在线观看人妻少妇| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产精品99久久99久久久不卡 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久精品国产亚洲av涩爱| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 久久午夜福利片| 捣出白浆h1v1| 激情五月婷婷亚洲| 97在线人人人人妻| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲四区av| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 免费大片18禁| 午夜福利乱码中文字幕| 成人国产av品久久久| 国精品久久久久久国模美| 亚洲精品国产av成人精品| 在线天堂中文资源库| 国产精品一区二区在线不卡| 天天影视国产精品| 日本vs欧美在线观看视频| 美女视频免费永久观看网站| 2022亚洲国产成人精品| av卡一久久| 岛国毛片在线播放| 亚洲国产精品一区三区| 美女视频免费永久观看网站| 交换朋友夫妻互换小说| 美女福利国产在线| 国产精品久久久av美女十八| 五月伊人婷婷丁香| 9热在线视频观看99| 日韩一区二区视频免费看| 人人妻人人澡人人看| 国产亚洲一区二区精品| 精品人妻偷拍中文字幕| 99久国产av精品国产电影| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲综合色网址| 97在线人人人人妻| 看非洲黑人一级黄片| 热re99久久精品国产66热6| 精品福利永久在线观看| 久久国内精品自在自线图片| 国产免费现黄频在线看| 黄色怎么调成土黄色| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 国产亚洲精品久久久com| www.av在线官网国产| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 蜜桃在线观看..| 男女国产视频网站| 国产淫语在线视频| 久久久久视频综合| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚洲美女视频黄频| 国产精品久久久久久久久免| 蜜臀久久99精品久久宅男| 欧美精品亚洲一区二区| 男女免费视频国产| 国产精品熟女久久久久浪| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 久久午夜福利片| 成人亚洲精品一区在线观看| 天美传媒精品一区二区| 中国美白少妇内射xxxbb| 中文字幕最新亚洲高清| 人妻 亚洲 视频| 国产精品欧美亚洲77777| 男人添女人高潮全过程视频| xxx大片免费视频| 亚洲少妇的诱惑av| 人人妻人人澡人人看| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 免费观看a级毛片全部| 亚洲成人一二三区av| 一区二区三区精品91| 天堂俺去俺来也www色官网| 只有这里有精品99| 国产日韩欧美视频二区| 最新的欧美精品一区二区| 秋霞在线观看毛片| 亚洲精品自拍成人| 秋霞在线观看毛片| freevideosex欧美| 欧美xxxx性猛交bbbb| 亚洲激情五月婷婷啪啪| a 毛片基地| 22中文网久久字幕| 黄色视频在线播放观看不卡| 久久99一区二区三区| 国产精品嫩草影院av在线观看| 国产成人精品无人区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 国产在视频线精品| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 最近手机中文字幕大全| 中文字幕人妻丝袜制服| 最后的刺客免费高清国语| 熟女电影av网| 又黄又粗又硬又大视频| 全区人妻精品视频| 国产精品久久久久成人av| 男女免费视频国产| 热99国产精品久久久久久7| 日本免费在线观看一区| 国产精品熟女久久久久浪| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 蜜桃国产av成人99| 五月伊人婷婷丁香| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 国产成人免费观看mmmm| 91成人精品电影| 少妇的丰满在线观看| 日韩电影二区| 男女高潮啪啪啪动态图| 蜜桃在线观看..| 视频中文字幕在线观看| 九草在线视频观看| 日韩欧美精品免费久久| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 女性被躁到高潮视频| 国产精品 国内视频| 99热全是精品| 国产 一区精品| 久久人人97超碰香蕉20202| 色婷婷av一区二区三区视频| 免费少妇av软件| 国产视频首页在线观看| 免费看光身美女| 久久国产亚洲av麻豆专区| 国产精品久久久久久久电影| 老司机亚洲免费影院| 日韩av不卡免费在线播放| 热re99久久精品国产66热6| 日韩伦理黄色片| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲精品乱久久久久久| av视频免费观看在线观看| 9色porny在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 99九九在线精品视频| 永久免费av网站大全| 国产日韩欧美视频二区| 五月伊人婷婷丁香| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产一区亚洲一区在线观看| 亚洲人成网站在线观看播放| 日韩成人av中文字幕在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 老司机影院成人| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲av.av天堂| 国产xxxxx性猛交| 精品一区在线观看国产| 看免费成人av毛片| 久久精品国产综合久久久 | 老司机影院成人| 国产极品天堂在线| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 黑人高潮一二区| 亚洲精品一二三| 99久久综合免费| 精品福利永久在线观看| 另类精品久久|