川藿苷A的NMR數(shù)據(jù)解析

吳鳴建，張 燕，2，張海艷，趙天增

(1.鄭州大學(xué)化工與能源學(xué)院，河南鄭州450001;2.河南省科學(xué)院天然產(chǎn)物重點實驗室，河南鄭州450002)

0 引言

川藿苷A(Sutchuenoside A)為山奈酚的苷類化合物，具有顯著的免疫抑制活性［1］.迄今已從小檗科淫羊藿屬植物 Epimedium Sutchuenense［2］、蚌殼蕨科狗脊屬植物狗脊［3］和鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物粗莖鱗毛蕨 Dryoptens Crassirhizoma，Aspidiaceae［1］中發(fā)現(xiàn)該化合物的存在.其δH、JHH、δC數(shù)據(jù)已有報道［1-2］，但其歸屬詳細解析過程未見報道.

最近，我們首次從光葉淫羊藿 (Epimedium Sagittatum(Sieb.et Zucc.)Maxim.Var.Glabratum T.S.Ying)葉乙酸乙酯萃取物中分離得到川藿苷A.筆者對其分別進行了1H和13C NMR檢測，并通過DEPT和1H-1H COSY、HSQC、HMBC 等2D NMR技術(shù)對其所有的1H和13C NMR信號進行了全歸屬和詳細解析，指出其NMR數(shù)據(jù)特征.川霍苷A的結(jié)構(gòu)如圖1所示.

1 實驗部分

所有NMR實驗均在Bruker DPX 400型核磁共振儀上進行.1H NMR的工作頻率為400 MHz，13C NMR 的工作頻率為 100.577 MHz，以DMSO-d6為溶劑.使用5 mm NMR探頭，NMR實驗在室溫下進行.1H NMR的譜寬為8 000 Hz，數(shù)據(jù)點為32 000，弛豫延遲為1 s.13C NMR的譜寬為25 000 Hz，數(shù)據(jù)點為32 000，弛豫延遲為2 s.二維譜均采用正檢測探頭.

圖1 川藿苷A的結(jié)構(gòu)Fig.1 The structure of Sutchuenoside A

質(zhì)譜ESI-MS用Waters Micromass公司Q-Tof MicroTM型高分辨質(zhì)譜儀測定.

光葉淫羊藿2005年6月采自貴州江口，經(jīng)河南農(nóng)業(yè)大學(xué)朱長山教授鑒定為光葉淫羊藿.

2 結(jié)果與討論

高分辨質(zhì)譜(HR ESI-MS)確定川藿苷A分子式為 C29H32O15(m/z 643.166 1［M+Na］+，calcd.for C29H32O15Na 643.163 9).

川藿苷 A 的1H NMR 中，δH6.47(1H，d，J=2.0 Hz)為A環(huán)C-6位質(zhì)子信號，6.80(1H，d，J=2.0 Hz)為A環(huán)C-8位質(zhì)子信號，7.78(2H，d，J=8.8 Hz)，6.95(2H，d，J=8.8 Hz)分別為 C 環(huán)AA'BB'自旋系統(tǒng)［4］中 C-2'，6'和 C-3'，5'位的質(zhì)子信號，10.31(1H，s)和12.56(1H，s)分別為OH-4'和 OH-5 的質(zhì)子信號;0.70(3H，d，J=6.0 Hz)，1.13(3H，d，J=6.0 Hz)分別為 2 個鼠李糖的6位甲基質(zhì)子信號5.27(1H，brs)，5.56(1H，brs)分別為2個鼠李糖的端位質(zhì)子信號.

川藿苷A的13C NMR數(shù)據(jù)顯示27條碳峰信號，其中由于C-2'，6'和 C-3'，5'為 C環(huán)上的對稱結(jié)構(gòu)，顯示重疊的單峰，因此，27條碳峰信號實際表示29個碳.DEPT顯示3個甲基碳、16個叔碳(14條碳峰，其中有2條碳峰各含2個叔碳)、10個季碳信號［5］.其中，δC161.1，99.7，161.9，94.8，156.4，106.0 分別為 A 環(huán) 5，6，7，8，9 和 10 位苯環(huán)碳信號，120.4，130.9 ×2，115.6 ×2，160.5 分別為 C環(huán) 1'，2'和 6'，3'和 5'，4'位苯環(huán)碳信號，178.0 為 B環(huán)C-4羰基信號，158.2，134.5為B環(huán)C-2、C-3信號;δC17.3和18.1為2個鼠李糖的6位甲基碳信號，101.7和98.6為2個鼠李糖的端位碳信號，68.0，68.2，70.0，70.1，70.3，70.4，71.8，73.3 為 2個鼠李糖的其他8個碳信號.

川藿苷A的1H、13C NMR數(shù)據(jù)歸屬主要通過1H-1H COSY、HSQC、HMBC［6］進行，具體分析如下.

川藿苷A具有2個鼠李糖，其NMR數(shù)據(jù)解析主要應(yīng)是如何區(qū)分2個鼠李糖的NMR數(shù)據(jù)歸屬.根據(jù)黃酮醇苷C-3化學(xué)位移一般為134左右，可以認定δC134.5為川藿苷A的C-3信號，HMBC顯示 δC134.5與 δH5.27相關(guān)，說明 δH5.27歸屬H-1″，因此，另一個鼠李糖端質(zhì)子化學(xué)位移為5.56;H-1″和 H-1?得到區(qū)分后，即可通過1H-1H COSY分別將2個鼠李糖質(zhì)子由 H-1″(或 H-1?)到 H-6″(或 H-6?)逐次進行歸屬，然后再通過HSQC歸屬2個鼠李糖的碳峰.

但是，由于在1H-1H COSY中，沒有看到H-1″和 H-2″、H-2″和 H-3″的相關(guān)，對與 C-3 相連的鼠李糖1H NMR數(shù)據(jù)歸屬帶來一定困難.為此，可以從兩方面入手，一方面，HMBC顯示δC101.7(C-1″)與 δH5.32(OH-2″)相關(guān)，1H-1H COSY 顯示 5.32與4.02相關(guān)，則4.02歸屬H-2″;另一方面，由于H-4″同碳連有 OAc，H-4″化學(xué)位移移向低場，δH4.71的三重峰可認定為 H-4″，1H-1H COSY顯示4.71與3.70和3.29相關(guān)，3.29與0.70相關(guān)，則3.70 歸屬 H-3″，3.29 歸屬 H-5″，0.70 歸屬 H-6″，至此，與C-3相連的鼠李糖所有1H NMR數(shù)據(jù)得到歸屬;然后通過 HSQC 數(shù)據(jù)，δC101.7/δH5.27，70.1/4.02，68.2/3.70，73.3/4.71，68.0/3.29，17.3/0.70，將其13C NMR數(shù)據(jù)明確歸屬.

通過1H-1H COSY 數(shù)據(jù)，δH5.56/δH3.84，3.84/3.63，3.36/3.32，3.32/3.43，3.43/1.13，7位鼠李糖1H NMR數(shù)據(jù)得到明確歸屬;再通過HSQC 數(shù)據(jù)，δC98.6/δH5.56，70.0/3.84，70.4/3.63，71.8/3.32，70.3/3.43，18.1/1.13，其13C NMR數(shù)據(jù)得到明確歸屬.

川藿苷A的1H、13C NMR數(shù)據(jù)解析結(jié)果見表1.

表1 川藿苷A的1H NMR，13C NMR，HSQC，1H-1H COSY和HMBC數(shù)據(jù) (DMSO-d6，)Tab.1 1H NMR，13C NMR，HSQC，1H-1H COSY 和 HMBC data of Sutchuenoside A in DMSO-d6

續(xù)表1

3 結(jié)論

對川藿苷 A進行1H、13C NMR、DEPT一維NMR 技術(shù)和1H-1H COSY、HSQC、HMBC 二維NMR技術(shù)檢測，對其所有的1H和13C NMR數(shù)據(jù)進行了詳細解析和全歸屬，為黃酮醇苷類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定提供了可靠的NMR數(shù)據(jù)解析方法和依據(jù)，也為該類化合物的深入研究和應(yīng)用提供了重要的結(jié)構(gòu)信息.

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