漾濞泡核桃青皮中脂溶性成分的GC-MS分析

李寅珊，李冬梅，劉 熙，劉光明

大理學(xué)院藥學(xué)院有機(jī)藥化教研室，大理 671000

漾濞泡核桃又名漾濞核桃、茶核桃、鐵核桃，是胡桃科(Juglandaceae)胡桃屬(Juglans)植物，主要分布于云南、貴州、四川西部及西藏雅魯藏布江下游［1］。青龍衣是漾濞泡核桃(Juglans sigillata D.)同屬植物胡桃(Juglans regia D.)和胡桃楸(Juglans mandshurica M.)未成熟果實(shí)的外皮。據(jù)《中華本草》記載，青龍衣味苦、澀，性平。歸肝、脾、胃經(jīng)。具有止痛、止咳、止瀉、解毒、殺蟲等功效。中醫(yī)主要用其治療脘腹脹痛、痛經(jīng)、久咳、泄瀉久痢、癰腫瘡毒、頑癬、禿瘡、白癜風(fēng)等癥［2］?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究顯示，青龍衣具有消炎鎮(zhèn)痛、抗菌、抗氧化、抗腫瘤、抗植物病毒、殺蟲等生物活性［3-8］?；瘜W(xué)成分研究表明，青龍衣主要含有醌及其苷類、黃酮類、脂肪醇類、鞣質(zhì)類、生物堿類及強(qiáng)心苷類物質(zhì)［9］。云南漾濞是漾濞泡核桃的主要產(chǎn)區(qū)之一，種植面積高達(dá)100萬畝，年產(chǎn)3萬余噸。每年采收后有數(shù)萬噸青皮廢棄于山野田間造成環(huán)境污染，如果可對其加以利用，不但能防止環(huán)境污染、避免資源浪費(fèi)，還可變廢為寶增加當(dāng)?shù)厥杖?。本?shí)驗(yàn)采用GCMS技術(shù)對漾濞泡核桃青皮脂溶性成分進(jìn)行了研究與分析，以期為漾濞泡核桃青皮的后續(xù)研究和應(yīng)用提供參考。

1 儀器與材料

漾濞泡核桃青皮于2011年10月采集于云南省漾濞縣，由大理學(xué)院生藥教研室周濃副教授鑒定，標(biāo)本(DLXY-LGMZ-2011-10-26)保存在大理學(xué)院藥學(xué)院。分析儀器為美國 Agilent Technologies公司HP6890GC/5973MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。BUCHI Rotavapor R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。甲醇、正己烷等化學(xué)試劑均為天津化學(xué)試劑公司分析純產(chǎn)品。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 樣品制備

稱取干燥的漾濞泡核桃青皮0.6 kg，粉碎后用2000 mL甲醇連續(xù)回流提取1h，回收溶劑得提取物28.0 g。提取物經(jīng)水分散后用正己烷萃取，正己烷萃取物經(jīng)微孔濾膜過濾，回收溶劑至干得4.0 g樣品，密封備做GC-MS。

2.2 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析條件

2.2.1 氣相色譜條件

HP-5MS石英毛細(xì)管柱(30 m ×0.25 mm，0.25 μm);柱溫80℃，程序升溫5℃/min，至260℃;柱流量1.0 mL/min;進(jìn)樣口溫度250℃;柱前壓100 kPa;進(jìn)樣量 0.6 μL;分流比 10∶1;載氣為高純氦氣。

2.2.2 質(zhì)譜條件

電離方式EI，電子能量70 eV，傳輸線溫度250℃，離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃;質(zhì)量范圍35～500;采用wiley7n.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索定性，同時(shí)利用面積歸一法從總離子流圖中計(jì)算各成分的相對百分含量。

3 結(jié)果與分析

通過GC-MS分析，并利用 wiley7n.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索定性，同時(shí)采用面積歸一法從總離子流圖中計(jì)算各成分的相對百分含量，得到漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的總離子流圖，70 min內(nèi)共分離出72個(gè)峰，鑒定出了其中55個(gè)組分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。由分析結(jié)果可知 β-谷甾醇 (18.68%)、4-乙基金剛烷酮(12.07%)、二十九烷 (9.04%)、二十七烷(7.43%)、棕櫚酸(7.45%)、十八碳二烯酸(4.60%)、α-生育酚(3.53%)等是漾濞泡核桃青皮脂溶性成分中的主要組分。漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的化學(xué)組成及含量如表1所示。

表1 漾濞泡核桃青皮脂溶性成分的組成及百分含量Table 1 The Fat-soluble components detected in the green rind of J.Sigillata

24 27.92 十七烷酸 n-Heptadecanoic acid C17H34O2 0.42% 96%25 28.47 十八碳二烯酸甲酯(亞油酸甲酯)(Z，Z)-9，12-Octadecadienoic acid methyl ester C19H34O2 0.67% 99%26 28.94 植醇 Phytol C20H40O 1.05% 90%27 29.27 十八碳二烯酸(亞油酸)Linoleic acid C18H32O2 4.60% 98%28 29.75 十八烷酸(硬脂酸)Octadecanoic acid C18H36O2 1.46% 99%29 30.21 二十二烷 n-Docosane C22H46 0.90% 93%30 32.04 二十三烷 n-Tricosane C23H48 0.67% 93%31 32.36 2，6，10-三甲基-2，9-十一烷二烯-4-酮 2，6，10-Trimethylundecan-2，9-dien-4-oneC14H24O 0.89% 30%32 32.75 三十一碳烯醇 18-Nonadecen-1-ol C31H62O 0.26% 87%33 33.03 4，8，12，16-四甲基十七-4-內(nèi)酯 4，8，12，16-Tetramethylheptadecan-4-olide C21H40O2 0.59% 70%34 33.68 二十四烷 Tetracosane C24H50 0.74% 99%35 34.20 二十二烷醛 Octadecanal C22H44O 0.60% 74%36 35.28 二十五烷 n-Pentacosane C25H52 1.85% 99%37 35.80 二十三烷醛 Octadecanal C23H46O 0.50% 86%38 36.11 二十六碳烯 1-Hexacosene C26H52 0.44% 86%39 36.84 二十六烷 Hexacosane C26H54 1.51% 94%40 37.47 二十四烷醛 1，21-Docosadiene C24H48O 0.49% 98%41 38.70 二十七烷 Heptacosane C27H56 7.43% 99%42 39.46 蘿芙堿 Ajmaline C20H26N2O2 0.52% 87%43 39.89 環(huán)二十八烷 Cyclooctacosane C28H56 0.61% 83%44 40.88 二十八烷 Octacosane C28H58 2.18% 93%45 41.22 角鯊烯 Squalene C30H50 1.13% 93%46 41.89 二十六烷醛 Octadecanal C26H52O 0.77% 91%47 42.93 2-(＇2-苯并呋喃)-3-苯基-1H-吲哚 2-(＇2-benzofuryl)-3-phenyl-1H-Indole C22H17NO 0.57% 47%48 43.23(E，3aR，5S，6aR，11bS)-5-［1-(羥甲基)丙烯基］-7-(甲酰氧基-2，3，3a，4，5，6，6a，7-八氫-1H-吡咯［2，3-d］咔唑(E，3aR，5S，6aR，11bS)-5-［1-(Hydroxymethyl)propenyl］-7-(methoxycarbonyl)-2，3，3a，4，5，6，6a，7-octahydro-1H-pyrrolo［2，3-d］carbazole C20H26N2O3 0.15% 72%49 43.76 二十九烷 n-Nonacosane C29H60 9.04% 95%50 45.35 3，4-二氫-2，8-二甲基-2-(4，8，12-三甲基十三烷基)-2H-1-苯并呋喃-6-醇 C27H46O2 2.01% 99%51 47.04 三十烷 n-Triacontane C30H62 0.62% 95%52 48.73 β-生育酚 β-Tocopherol C28H48O2 0.93% 97%53 51.37 三十一烷 Hentriacontane C31H64 1.11% 94%54 53.14 α-生育酚 Vitamin E C29H50O2 3.53% 99%55 63.70 β-谷甾醇 β-stigmasterol C29H50O 18.68% 99%

4 討論

通過GC-MS和wiley7n.L標(biāo)準(zhǔn)譜庫檢索，漾濞泡核桃青皮脂溶性成分主要含有脂肪烴(26.66%)、甾體(18.68%)、脂肪酸(10.67%)、不飽和脂肪酸(5.03%)、脂肪醛(2.75%)、不飽和脂肪烴(1.72%)及脂肪酸酯(1.34%)等類物質(zhì)。其中，含量較高的β-谷甾醇、棕櫚酸、亞油酸等物質(zhì)研究應(yīng)用較為廣泛。β-谷甾醇不僅具有抗癌、抗炎、鎮(zhèn)痛、降脂、降血糖、抗氧化等藥理活性［10-13］，亦是合成一些降脂藥、口服避孕藥的原料［12，14］。作為一種從植物中分離的到得天然成分，β-谷甾醇不僅對害蟲殺滅能力強(qiáng)，且毒副作用較小，是制造農(nóng)藥比較理想的原料［15］。棕櫚酸廣泛存在于自然界中，幾乎所有油脂中都含有數(shù)量不等的棕櫚酸。其不僅是人體重要的產(chǎn)能脂肪酸，在人體脂肪代謝中起著重要的作用［16］，也是第一種從脂肪生成中產(chǎn)生的脂肪酸，可以由它產(chǎn)生更長的脂肪酸及其他工業(yè)原料。因此，棕櫚酸在化工、建材、化妝品、制藥、食品等多個(gè)行業(yè)皆有應(yīng)用。隨著生活水平的提高，人們逐漸意識到在日常食用的油脂中添加一些不飽和脂肪酸更有利于健康。研究表明，共軛亞油酸不但能防止動脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、抗氧化、降血脂、改善骨組織代謝，而且許多共軛亞油酸具有較好的抗腫瘤活性。目前國內(nèi)外對其抗腫瘤活性的研究報(bào)道也較多［17-19］。由此證明，漾濞泡核桃青皮具有一定的開發(fā)利用價(jià)值。

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