肥大細(xì)胞與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴管生成的關(guān)系探討

黎晴，楊梅，曹桂明*

(1.廣州市荔灣區(qū)人民醫(yī)院病理室，廣東廣州510370；2.南華大學(xué)附屬南華醫(yī)院病理科，湖南衡陽421000)

肥大細(xì)胞與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴管生成的關(guān)系探討

黎晴1，楊梅2，曹桂明2*

(1.廣州市荔灣區(qū)人民醫(yī)院病理室，廣東廣州510370；2.南華大學(xué)附屬南華醫(yī)院病理科，湖南衡陽421000)

目的探討肥大細(xì)胞在浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及其與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴管生成的關(guān)系。方法用免疫組化染色檢查肥大細(xì)胞在乳腺良性病變和乳腺浸潤性導(dǎo)管癌組織中的表達(dá)，用D2-40標(biāo)記淋巴管并計(jì)數(shù)。結(jié)果肥大細(xì)胞數(shù)量在乳腺良性病變和乳腺浸潤性導(dǎo)管癌之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級患者的肥大細(xì)胞數(shù)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。肥大細(xì)胞數(shù)量與浸潤性導(dǎo)管癌有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。肥大細(xì)胞數(shù)量與乳腺癌淋巴管數(shù)量呈正相關(guān)(r=0.18)。結(jié)論肥大細(xì)胞數(shù)量可作為乳腺浸潤性導(dǎo)管癌遠(yuǎn)期預(yù)后判斷的參考指標(biāo)。

乳腺癌；組織學(xué)分級；肥大細(xì)胞；淋巴管計(jì)數(shù)；預(yù)后判斷

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是乳腺癌最主要的擴(kuò)散轉(zhuǎn)移方式，在乳腺浸潤癌中，淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的基底膜破裂處淋巴迷路與惡性腫瘤細(xì)胞直接接觸，提示淋巴管是腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散的主要途徑[1]。肥大細(xì)胞是一種多功能細(xì)胞，活化后能分泌多種生物活性物質(zhì)參與免疫和炎癥反應(yīng)。它在乳腺癌中廣泛浸潤，并與腫瘤的發(fā)病機(jī)制、分化、轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)[2-3]。目前對于肥大細(xì)胞與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴管生成的關(guān)系研究甚少。我們就87例乳腺病變中肥大細(xì)胞的數(shù)量與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及淋巴管生成的關(guān)系進(jìn)行研究，以探討肥大細(xì)胞在乳腺癌淋巴道轉(zhuǎn)移擴(kuò)散中的作用以及是否可作為判斷乳腺癌預(yù)后的參考指標(biāo)。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本收集附屬南華醫(yī)院病理科1998年12月至2008年3月序列檔案石蠟切片標(biāo)本共87例，其中術(shù)前未經(jīng)放、化療的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌根治標(biāo)本55例，乳腺良性病變32例。所有病例均為女性。乳腺癌患者的年齡27～76歲，平均49.7歲。根據(jù)2003年乳腺腫瘤WHO組織學(xué)分類標(biāo)準(zhǔn)對所有病例進(jìn)行診斷、分級。

1.2 方法用肥大細(xì)胞類胰蛋白酶和D2-40抗體通過免疫組化SP法分別標(biāo)記肥大細(xì)胞(MC)和淋巴管。在光鏡40×10高倍視野(HPF×400)下觀察每張切片中20個HPF的MC，然后計(jì)算每個HPF的MC平均數(shù)(x-)、標(biāo)準(zhǔn)差(s)。D2-40陽性淋巴管按Weidner法[4]計(jì)數(shù)，分別測定乳腺癌腫瘤區(qū)、周邊區(qū)和良性乳腺病變的淋巴管密度(Lymphatic vessel density，LVD)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

肥大細(xì)胞陽性細(xì)胞胞漿著棕黃色、顆粒狀，在病理組織中分布不均勻，大多數(shù)呈灶狀分布于病變組織與正常組織交界處或密集于膠原纖維組織內(nèi)(圖1、圖2)。乳腺良性病變的肥大細(xì)胞數(shù)量明顯低于乳腺浸潤性導(dǎo)管癌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；在浸潤性導(dǎo)管癌中，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級之間的肥大細(xì)胞數(shù)量差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，見表1。被D2-40染成棕黃色的微小管腔、管腔樣結(jié)構(gòu)或細(xì)胞即為D2-40陽性，每個呈棕黃色、有或無內(nèi)皮細(xì)胞被覆、不含紅細(xì)胞的微小管腔或管腔樣結(jié)構(gòu)或內(nèi)皮細(xì)胞簇視為一個淋巴管(圖3)。將浸潤性導(dǎo)管癌分成有或無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移兩組，發(fā)現(xiàn)有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的肥大細(xì)胞數(shù)量明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P＜0.01)，并且肥大細(xì)胞數(shù)量與癌周邊區(qū)淋巴管數(shù)量呈正相關(guān)(r= 0.18；見表2)。

圖1 乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中的肥大細(xì)胞；圖2乳腺良性病變中的肥大細(xì)胞；圖3乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中D2-40抗體陽性的淋巴管

表1 乳腺良性病變與浸潤性導(dǎo)管癌的肥大細(xì)胞數(shù)量與臨床病理指標(biāo)的比較()

表1 乳腺良性病變與浸潤性導(dǎo)管癌的肥大細(xì)胞數(shù)量與臨床病理指標(biāo)的比較()

組織學(xué)類型乳腺良性病變浸潤性導(dǎo)管癌浸潤性導(dǎo)管癌分級Ⅰ級Ⅱ級Ⅲ級32 55 19 22 14 7.80±1.22 15.44±2.39 10.75±2.61 13.70±1.92 15.33±0.62 12.08＜0.01 10.39 19.12 25.96＜0.01＜0.01＜0.01

表2 肥大細(xì)胞數(shù)量與LVD的關(guān)系()

表2 肥大細(xì)胞數(shù)量與LVD的關(guān)系()

注：兩者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，*P＜0.01。

11.21±4.60*5.78±3.02有無31 24 14.03±2.01*11.22±0.55 0.18

3 討論

目前已有的研究尚不能明確定義肥大細(xì)胞對腫瘤生長的影響，但已有實(shí)驗(yàn)證明肥大細(xì)胞能促進(jìn)腫瘤的前哨淋巴結(jié)中血管的生成，從而影響腫瘤的生長及轉(zhuǎn)移[5]。本文研究數(shù)據(jù)表明，乳腺良性病變與浸潤性導(dǎo)管癌的肥大細(xì)胞數(shù)量水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(H= 12.08，P＜0.01)，而且隨著乳腺浸潤性導(dǎo)管癌的級別增加，肥大細(xì)胞數(shù)量也隨之增加，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。這提示肥大細(xì)胞數(shù)量與乳腺浸潤性導(dǎo)管癌級別程度呈正相關(guān)。我們的實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，肥大細(xì)胞數(shù)量多的病例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的幾率也大為增加，數(shù)據(jù)顯示肥大細(xì)胞數(shù)量在有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的分組比較中，其組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，相關(guān)性分析顯示呈正相關(guān)性(r=0.18)，并且在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中，癌周淋巴管的數(shù)量也明顯增多，與沒有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的病例中癌周淋巴管的數(shù)量之間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，說明淋巴管生成與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，這與我們之前的研究發(fā)現(xiàn)相符[6-7]。依據(jù)這一研究數(shù)據(jù)，可以推斷：肥大細(xì)胞具有促進(jìn)腫瘤發(fā)展的作用，且肥大細(xì)胞數(shù)量有利于腫瘤的病理分級和對預(yù)后的判斷，并且肥大細(xì)胞能通過促進(jìn)淋巴管生成，導(dǎo)致淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，從而影響患者預(yù)后。先前有文獻(xiàn)報(bào)道類胰蛋白酶陽性的肥大細(xì)胞可能促進(jìn)乳腺癌前哨淋巴結(jié)中的血管生成[8]，這提示肥大細(xì)胞促進(jìn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有可能是刺激淋巴管及血管生成雙重機(jī)制作用的結(jié)果。但是其促進(jìn)淋巴管及血管生成的具體通路還有待進(jìn)一步的研究證明。

[1]王虎霞,盛薇,樊林.乳腺癌淋巴管生成與血管內(nèi)皮生長因子-C表達(dá)研究進(jìn)展[J].國際外科雜志,2006,33(6):42-45.

[2]Kankkunen JP,Harvima IT,Naukkarinen A.Quantitative analysis of tryptase and chymase containing mast cells in benign and malignant breast lesions[J].Int J Cancer,1997,72:385-388.

[3]Groot Kormelink T,Abudukelimu A,Redegeld FA.Mast cells as target in cancer therapy[J].Curr Pharm Des,2009,15(16):1868-1878.

[4]Coltrera MD,Wang J.Expression of Platele-derived growth factorB-chain and the Platelet-derived growth factor receptor beta subunit in human breast tissue and breas carcinoma[J].Cancer Res, 1995,55:2703-2708.

[5]黃望珍,周鈞,張友元.乳腺癌MCD與hTR、hTRT表達(dá)的關(guān)系[J].腫瘤防治研究,2006,33(9):685.

[6]曹桂明,楊梅.VEGF-C和VEGFR-3對乳腺癌淋巴管生成和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響[J].中國腫瘤臨床,2006,33(6):310-313.

[7]曹桂明,楊梅,洪海,等.缺氧誘導(dǎo)因子1α對乳腺癌淋巴管生成及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響[J].中華普通外科雜志,2006,21(4):306-307.

[8]Ribatti N,Finato E,Crivellato,et al.Angiogenesis and mast cells in human breast cancer sentinel lymph nodes with and without micrometastases[J].Histopathology,2007,51:837-42.

Study of the relationship between the expression of Mass Cells and lymph node metastases and lymphangiogenesis in invasive ductal carcinoma.

LI Qing1,YANG Mei2,CAO Gui-ming2*.1.Department of Pathology,People's Hospi-tal of Liwan District of Guangzhou City,Guangzhou 510370,Guangdong,CHINA;2.Department of Pathology,the Affiliated Hospital of Nanhua University,Hengyang 421000,Hunan,CHINA

ObjectiveTo observe the expression of mass cells in breast invasive ductal carcinoma,and analyze the relationship between mass cells and lymph node metastasis and lymphangiogenesis.MethodsImmunohistochemistry(IHC)was used to detect the levels of Mass cells,and D2-40 was used to mark lymphatic vessels.ResultsThe quantity of mass cells showed significant different in benign breast lesions and invasive ductal carcinoma tissues(P＜0.01),and also showed significant difference between the three grades(gradeⅠ,gradeⅡ,and gradeⅢ)of invasive ductal carcinoma(P＜0.01);Statistically significant difference was also found in the quantity of the mass cells between invasive ductal carcinoma with lymph node metastasis and that without lymph node metastasis. ConclusionThe quantities of the mass cells was positively correlated with lymphangiogenesis and lymph node metastasis,which could be used as the valuable indexes for the diagnosis and long-term prognosis of breast invasive ductal carcinoma.

Breast carcinoma;Mass cells;Histological grading;LVD;Index for diagnosis

R737.9

A

1003—6350(2012)09—007—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2012.09.003

2011-10-20)

湖南省衛(wèi)生廳項(xiàng)目(編號：B2006-122)；衡陽市2007年社會發(fā)展科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(編號：2007KS25)

黎晴(1983—)，女，湖南省瀏陽市人，醫(yī)師，碩士。

*通訊作者：曹桂明。E-mail：13975437349@163.com