有機(jī)農(nóng)藥在蔬菜中的殘留檢測(cè)分析*

盛梓良

（咸寧職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖北 咸寧 437100）

隨著農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量的增大，從數(shù)量上農(nóng)產(chǎn)品已經(jīng)能夠大大滿足人們的需要了，所以對(duì)于產(chǎn)品的質(zhì)量也日漸重視.近些年食品安全事故頻發(fā)，當(dāng)中有很多就是因?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量超標(biāo)而導(dǎo)致的農(nóng)藥中毒.由于農(nóng)藥的使用不合理，使得農(nóng)藥殘留愈發(fā)的嚴(yán)重，降解的速度也變得十分的緩慢.所以，對(duì)于農(nóng)藥殘留的檢測(cè)還需要加大力度.

1 有機(jī)農(nóng)藥殘留的危害

隨著我國(guó)人口不斷的增加而有效的耕地面積又在逐漸減少，這樣就對(duì)單位面積上農(nóng)作物的產(chǎn)量提出了更高的要求.農(nóng)藥對(duì)于控制農(nóng)作物的危害促進(jìn)農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)，保證農(nóng)業(yè)的大豐收有著極其重要的作用.

在我國(guó)的蔬菜中殘留農(nóng)藥比較嚴(yán)重而且比較普遍.在2002年農(nóng)業(yè)部對(duì)某些地區(qū)蔬菜質(zhì)量的檢查中發(fā)現(xiàn)，敵敵畏、菊醋類農(nóng)藥、甲胺磷等農(nóng)藥的含量嚴(yán)重的超標(biāo).所以，不難看出，我國(guó)食用農(nóng)產(chǎn)品中的殘留農(nóng)藥是非常嚴(yán)重的，長(zhǎng)時(shí)間的吃這樣的蔬菜肯定會(huì)或多或少的對(duì)身體健康造成一定的影響.國(guó)內(nèi)外對(duì)于蔬菜中有機(jī)農(nóng)藥殘留限量的要求如下表所示（大白菜）：

表1 中國(guó)與主要發(fā)達(dá)國(guó)家大白菜殘留農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)比較

我國(guó)對(duì)農(nóng)藥的檢查標(biāo)準(zhǔn)和方法，如下表所示：

表2 無(wú)公害白菜類蔬菜中殘留農(nóng)藥的檢測(cè)規(guī)定，檢測(cè)方法、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)以及所需的儀器

2 農(nóng)藥殘留檢測(cè)的現(xiàn)狀

目前，對(duì)于殘留農(nóng)藥的檢測(cè)主要有兩種方法：一種是快速檢測(cè)，另一種是實(shí)驗(yàn)室定量檢測(cè).

2.1 快速檢測(cè)

目前主要是膽堿酯酶能分解乙酰膽或者是其他的脂類，然而有機(jī)磷和氨基酸酯類的農(nóng)藥能夠抑制膽堿酯酶，讓它的分解失去活性.

通過(guò)對(duì)乙酰膽堿或者是其他脂類化合物分解產(chǎn)物的檢測(cè)，就可以判斷出樣品中是不是含有有機(jī)磷或者是氨基甲酸脂類的農(nóng)藥.但是這樣的檢測(cè)辦法只能定性的反應(yīng)氨基甲酸酯類和有機(jī)磷農(nóng)藥總體的殘留情況，然而無(wú)法為農(nóng)藥殘留準(zhǔn)確的定量，也不可能區(qū)分出農(nóng)藥的種類，更不區(qū)分該農(nóng)藥毒性的程度到底是違禁、低度、中度還是高度.

但是快速檢測(cè)依然有它的優(yōu)缺點(diǎn)存在.

優(yōu)點(diǎn)：快速、能及時(shí)滿足需求；簡(jiǎn)單，專業(yè)性不強(qiáng)，即使是非專業(yè)人員在簡(jiǎn)單的培訓(xùn)之后便可操作；簡(jiǎn)便快捷，能服務(wù)于眾多的工作場(chǎng)所；成本低廉.

缺點(diǎn)：無(wú)法檢測(cè)每一種農(nóng)藥的含量；假陽(yáng)性比較高，靈敏度比較低.

2.2 實(shí)驗(yàn)室定量檢測(cè)

目前，實(shí)驗(yàn)室定性定量檢測(cè)包含了單殘留檢測(cè)分析以及多殘留檢測(cè)分析.而多殘留檢測(cè)分析又可以分為單類型多殘留檢測(cè)分析、多類型多殘留檢測(cè)分析、未知樣本的農(nóng)藥多殘留檢測(cè)分析.因?yàn)榉治鲇玫霓r(nóng)藥樣品的歷史未知性，也就是樣品種類的多樣性和污染源的未知性.所以，農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的檢測(cè)分析主要是以后兩種為主.

3 快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留方法

3.1 乙酰膽堿酯酶的檢測(cè)

乙酰膽堿酯酶簡(jiǎn)稱AchE，具有氨肽酶和羧肽酶的活性.乙酰膽堿酯酶能夠促進(jìn)神經(jīng)的再生和神經(jīng)元的發(fā)育，從而作用于細(xì)胞的成熟和發(fā)育.在身體外部，乙酰膽堿酯酶能夠水解P物質(zhì)以及腦啡肽，但是對(duì)于血管加壓素和生長(zhǎng)抑素等等卻沒(méi)有辦法.

下面詳細(xì)的介紹乙酰膽堿酯酶的檢測(cè)方法

表3 乙酰膽堿酯酶酶抑制的檢測(cè)方法以及比較

3.2 丁酰膽堿酯酶

催化丁酰膽堿酯酶水解的酶在神經(jīng)系統(tǒng)以外的各種組織中普遍存在.作為一類糖蛋白，主要是由肝臟來(lái)合成的，并且在血清中存在.

有機(jī)磷農(nóng)藥能夠同丁酰膽堿酯酶相結(jié)合，能夠多種酰胺類的化合物、肽類，酯類等等進(jìn)行水解，從而能夠防止化合物中毒.最廣泛的應(yīng)用就目前來(lái)說(shuō)就是對(duì)人類血清或者是其他體液中膽堿酯酶活力進(jìn)行的體外定量檢測(cè)，有機(jī)磷同活性位點(diǎn)的絲氨酸殘基形成的共價(jià)鍵破壞了酯酶的活性.

3.3 植物膽堿酯酶

通常植物膽堿酯酶被稱作為絲氨酸水解酶，多存在于植物的體內(nèi)，隨著植物生長(zhǎng)期以及種類的不相同，它的含量也有所不同，雖然植物內(nèi)的乙酰膽堿酯酶的活性比膽堿酯酶的活性要稍微高一點(diǎn)點(diǎn)，但是它的來(lái)源廣泛，而且成本低廉，逐漸的被廣大學(xué)者所關(guān)注.

植物膽堿酯酶可以讓?duì)痢宜彷刘ニ獬蔀檩练雍鸵宜?顯色劑固藍(lán)β鹽同萘酚互相反應(yīng)，生成偶氮化合物，顏色變?yōu)樽霞t色.因?yàn)槊傅奶匦院鸵种谱饔眯枰刑囟ǖ沫h(huán)境，所以任何外部環(huán)境的干擾都可能會(huì)影響、抑制酶的活性效果.

4 實(shí)驗(yàn)室分析方法

利用氣相色譜儀、液相色譜儀、氣象色譜儀同液相色譜儀和質(zhì)譜儀的聯(lián)用定性定量檢測(cè)，這些方法是在目前來(lái)講殘留農(nóng)藥實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量檢測(cè)的主要方法.

4.1 氣相色譜分析技術(shù)

氣相色譜分析方法是一種比較經(jīng)典的分析方法.采用氣體作為流動(dòng)相的色譜法，主要用來(lái)檢測(cè)揮發(fā)性農(nóng)藥，具有較高的高靈敏度、較高的分離效果、較高的選擇性等特點(diǎn).用氣相色譜分析技術(shù)來(lái)測(cè)定農(nóng)藥的關(guān)鍵就在于怎樣正確的選擇檢測(cè)的儀器.理想中的檢測(cè)儀器應(yīng)該具備穩(wěn)定性、重復(fù)性而且靈敏度高，響應(yīng)速度快、線性范圍廣等特點(diǎn).

4.2 氣相色譜—質(zhì)譜連用技術(shù)

色譜質(zhì)譜連用技術(shù)是把質(zhì)譜儀同氣相色譜儀串聯(lián)起來(lái)，成為一個(gè)能夠用來(lái)檢測(cè)的技術(shù)整體.它不僅擁有質(zhì)譜準(zhǔn)確堅(jiān)定化合物結(jié)構(gòu)的功能，同樣還包含色譜的分離功能，這樣就既達(dá)到了定量檢測(cè)的目的又達(dá)到了同時(shí)鑒定的要求.

4.3 高效液相色譜法

氣相色譜檢測(cè)出的值相對(duì)于高效液相色譜法檢測(cè)出的結(jié)果低一點(diǎn)，但高效液相色譜法是一種傳統(tǒng)的檢測(cè)辦法.它能夠分離檢測(cè)分子量大而且極性強(qiáng)的離子型農(nóng)藥，特別是色譜法中不能分析的高溫或者高沸點(diǎn)且不穩(wěn)定的農(nóng)藥，它都可以把這些農(nóng)藥有效的分離并且檢測(cè).近些年來(lái)，使用高壓泵、高效的色譜柱和高靈敏度的檢測(cè)儀器，大大的提高了液相色譜的檢測(cè)速度，靈敏度、效率.已經(jīng)成為殘留農(nóng)藥檢測(cè)中不可缺少的方法.

4.4 液相色譜

對(duì)待熱或者極性不穩(wěn)定的農(nóng)藥，不能夠直接用氣相色譜質(zhì)譜連用技術(shù).因?yàn)樵S許多多的有機(jī)化合物熱不穩(wěn)定、低揮發(fā)、高分子量、極性強(qiáng)等特點(diǎn)才推動(dòng)了液相色譜技術(shù)的發(fā)展.液相色譜質(zhì)譜連用技術(shù)具有結(jié)果可靠、選擇性好、靈敏度高、定性定量等等優(yōu)點(diǎn).

4.5 高效毛細(xì)血管電泳分析法

毛細(xì)血管電泳技術(shù)又被稱作為毛細(xì)管分離法和高效毛細(xì)管電泳，主要是利用高壓電場(chǎng)作為驅(qū)動(dòng)力，把毛細(xì)血管當(dāng)做分離通道，根據(jù)樣品中各組分之間的分離系數(shù)的不同而進(jìn)行分離的一項(xiàng)新興的液相分離技術(shù).

5 實(shí)際例子

5.1 實(shí)驗(yàn)材料

農(nóng)藥標(biāo)樣：有機(jī)磷類；樂(lè)果；甲拌磷；氨基甲酸酯類；呋喃丹；西維因.乙酰膽堿酯酶酶液.底物：碘化硫代乙酰膽堿.顯色劑：二氯靛酚鈉鹽.分光光度計(jì)，微量加樣器，電子天平，振蕩器，試管，滴管等等.

5.2 實(shí)驗(yàn)方法和數(shù)據(jù)

把農(nóng)藥稀釋為1.0ppm，分別把稀釋200倍、150倍、100倍、50倍、25倍的酶液加到其中，加入足量而且等量的顯色劑和底物.OD值（600nm）減小到一半的時(shí)間分別是2分鐘、4分鐘、7分鐘、15分鐘、30分鐘.所以，選擇稀釋100倍的酶液.因?yàn)轱@色劑顏色的變化速度適中，而且容易觀測(cè)，數(shù)據(jù)之間有了比較明顯的差異，減小偶然誤差，便有利于數(shù)據(jù)的分析和處理.

5.3 酶的最適溫度研究

取農(nóng)藥標(biāo)樣（100ppm）、用甲醇水溶液（3：1），分別稀釋到2.5ppm、2.0ppm、1.5ppm、1.0ppm、0.5ppm 各取 4ml上述的濃度（已稀釋）的溶液，加入1ml酶液（1：100），再加入1m l顯色劑，混勻，等待它反映完畢.

加入0.0086g底物，混勻，開(kāi)始計(jì)時(shí).

三分鐘之后，每隔一分鐘記錄一次OD值（600nm）

5.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

表1 15℃

表二 20℃

表三 25℃

表四 30℃

表五 35℃

表六 甲拌磷的OD值

表七

表八

表九

5.5 分 析

因?yàn)橐阴Ｄ憠A酯酶的活性非常的敏感，所以在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程當(dāng)中會(huì)受到溫度、PH值，底物量、顯色劑的多少等等條件的影響.在目前的條件下，要做到精確的測(cè)量還是有一定的難度，這種測(cè)量的精確性和穩(wěn)定性還是有不曉得差距.

6 總結(jié)

由于殘留農(nóng)藥的檢測(cè)處理技術(shù)發(fā)展的很迅速，需要對(duì)殘留農(nóng)藥的檢測(cè)程序不斷的簡(jiǎn)化，也需要對(duì)不同地區(qū)的農(nóng)藥使用習(xí)慣以及用藥的要求進(jìn)行調(diào)查，結(jié)合新的處理方法，開(kāi)發(fā)出新的檢測(cè)方法.本文主要介紹了幾種檢測(cè)的方法，然而殘留農(nóng)藥的檢測(cè)這幾種常見(jiàn)的方法肯定是不能夠滿足，需要大家更大的努力，發(fā)現(xiàn)新的檢測(cè)方法，更希望能找到對(duì)生物體無(wú)害的農(nóng)藥，這樣才能使食品的安全性到達(dá)最高.

［1］丁毅，倪小東，李飛紅，劉曉穎.氣相色譜—質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量［J］.安徽大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2005，（3）.

［2］吳昭陽(yáng)，李政一，劉效蘭，段蕾.有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)方法的應(yīng)用與研究進(jìn)展［J］.北京工商大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2004，（4）.

［3］邱萍.化學(xué)計(jì)量學(xué)用于食品中有機(jī)農(nóng)藥殘留量分析的研究［D］.南昌：南昌大學(xué)，2006.