酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性能、抗氧化功能和抗病力的影響

張一平 劉 波 華洵璐 孫 梅 謝 駿* 史濟(jì)筠

(1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，農(nóng)業(yè)部淡水魚類遺傳育種和養(yǎng)殖生物學(xué)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，無錫 214081;2.江蘇省蘇微微生物研究有限公司，無錫 214063;

3.江蘇省宜興市天石飼料有限公司，宜興 214258)

核苷酸是生物體內(nèi)一類低分子化合物，是構(gòu)成生物大分子核糖核酸(RNA)和脫氧核糖核酸(DNA)的基本組分，幾乎參與細(xì)胞的所有生化過程，具有調(diào)節(jié)生物體能量代謝、參與遺傳信息編碼、傳遞細(xì)胞信號(hào)等重要的生理和生化功能［1］。生物體通過從頭合成和補(bǔ)救這2種途徑合成內(nèi)源核苷酸。從頭合成途徑是由多種小分子如二氧化碳、氨、核糖、甘氨酸、嘌呤和嘧啶等，經(jīng)一系列酶催化反應(yīng)逐步組裝而成;補(bǔ)救途徑是以食物吸收和體內(nèi)核酸分解所提供的堿基為原料，經(jīng)酶促磷酸化而成。從頭合成是核苷酸合成的主要方式，但需消耗相當(dāng)高的能量。外源核苷酸除直接提供核苷酸外，還可增加補(bǔ)救途徑的核苷酸生成量，并反饋抑制從頭合成途徑而起到節(jié)能作用［2］。研究表明，當(dāng)動(dòng)物處于快速生長(zhǎng)期、肝功能障礙、免疫應(yīng)激等特殊生理?xiàng)l件下時(shí)，內(nèi)源核苷酸合成相對(duì)不足，此時(shí)需要來源于飼料的外源核苷酸加以補(bǔ)充［3］。因此，核苷酸被稱為半必需營養(yǎng)物質(zhì)或條件營養(yǎng)物質(zhì)，是一類極有發(fā)展前途的新型飼料添加劑［4］。

外源核苷酸可促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)和提高免疫功能［5－6］已經(jīng)被證實(shí)。王銳等［7－8］在異育銀鯽幼魚飼料中添加500 mg/kg等量混勻的純度≥90%的5種核苷酸——腺苷酸(AMP)、尿苷酸(UMP)、胞苷酸(CMP)、肌苷酸(IMP)、鳥苷酸(GMP)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該混合核苷酸能顯著提高異育銀鯽幼魚的增重率和特定生長(zhǎng)率，降低飼料系數(shù)，改善魚體的脂肪代謝，提高魚體的非特異性免疫功能，同時(shí)還能提高魚體中各種消化酶的活性。也有采用有效成分含量為8.6%的酵母核苷酸(具體成分未公布)作為外源添加劑進(jìn)行研究的。例如:王廣軍等［9］在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加344 mg/kg時(shí)能顯著促進(jìn)對(duì)蝦生長(zhǎng)，提高機(jī)體抗應(yīng)激能力和免疫能力;周興華等［10］在錦鯉幼魚飼料中添加387 mg/kg時(shí)能顯著提高錦鯉幼魚增重率、特定生長(zhǎng)率，降低飼料系數(shù);魏文志等［11］在異育銀鯽飼料中添加344 mg/kg時(shí)能顯著促進(jìn)異育銀鯽的生長(zhǎng)，并降低飼料系數(shù)，添加172 mg/kg時(shí)能顯著提高異育銀鯽血清中溶菌酶和堿性磷酸酶活性。

目前國內(nèi)肌苷和鳥苷的發(fā)酵水平很高，以此為原料合成的IMP和GMP比較便宜［12］;而AMP、UMP、CMP仍只能從酵母中提取，提取成本較高。因此，添加純核苷酸會(huì)增加養(yǎng)殖成本，降低養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益;而8.6%的酵母核苷酸因有效成分含量低，不便于飼料配方的設(shè)計(jì)。鑒于此，本試驗(yàn)擬采用介于兩者之間的第3種劑型，即有效成分含量為70%的酵母核苷酸(具體成分參見材料與方法)，以我國淡水養(yǎng)殖的大宗品種——團(tuán)頭魴(俗稱武昌魚、鳊魚)為試驗(yàn)對(duì)象，研究該劑型核苷酸對(duì)魚體生長(zhǎng)性能和抗氧化功能的影響，同時(shí)采用嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒試驗(yàn)，研究該劑型核苷酸對(duì)魚體抗病力的影響，為核苷酸在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供更進(jìn)一步的理論依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用酵母核苷酸由江蘇省蘇微微生物研究有限公司提供，從酵母細(xì)胞中提取，有效成分含量為 70%(AMP 8.72%、GMP 9.67%、CMP 6.80%、UMP 8.11%、低聚核苷酸36.70%)。

1.2 試驗(yàn)飼料

基礎(chǔ)飼料參考我國水產(chǎn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SC/T 1074—2004配制，其組成及營養(yǎng)水平見表1。在基礎(chǔ)飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸(按照受試物的量計(jì)算，即1 kg基礎(chǔ)飼料中加入200 mg有效成分含量為70%的酵母核苷酸)作為試驗(yàn)飼料。各種原料分別粉碎過60目篩，先將磷酸二氫鈣、凹凸棒土、沸石粉、預(yù)混料等混勻，再加大料逐級(jí)充分混勻，后加適量水，用小型絞肉機(jī)制成粒徑為2.0 mm的濕顆粒飼料，晾干備用。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels ofthe basal diet(air－dry basis) %

1)維生素預(yù)混料為每千克飼料提供Vitamin premix provided the following per kg of diet:VC 150 mg，VE 100 mg，VK35 mg，VA 2 000 IU，VB110 mg，VB220 mg，VB610 mg，VB120.05 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 100 mg，葉酸 folic acid 5 mg，生物素 biotin 1 mg，肌醇 inositol 500 mg，煙酸 niacin 150 mg。

2)礦物質(zhì)預(yù)混料為每千克飼料提供Mineral premix provided the following per kg of diet:CuSO4·5H2O 52.5 mg，F(xiàn)eSO4·7H2O 28 mg，ZnSO4·7H2O 22 mg，MnSO4·4H2O 9 mg，Na2SeO30.045 mg，KI 0.026 mg，CoCl2·6H2O 0.1 mg。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)用團(tuán)頭魴由中國水產(chǎn)科學(xué)院淡水漁業(yè)研究中心漁場(chǎng)提供。選擇健康且規(guī)格、重量基本一致的團(tuán)頭魴300尾，個(gè)體初始體重為(31.46±0.07)g。將所選試驗(yàn)魚隨機(jī)分成2組(對(duì)照組和核苷酸組)，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾，以重復(fù)為單位放養(yǎng)于規(guī)格為1.00 m×1.00 m×1.00 m的網(wǎng)箱內(nèi)。對(duì)照組試驗(yàn)魚飼喂基礎(chǔ)飼料(核苷酸主要來自于魚粉，含量?jī)H為60 mg/kg左右)，核苷酸組試驗(yàn)魚飼喂試驗(yàn)飼料(基礎(chǔ)飼料+200 mg/kg酵母核苷酸)。

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在中國水產(chǎn)科學(xué)院淡水漁業(yè)研究中心無錫南泉試驗(yàn)基地完成。團(tuán)頭魴在網(wǎng)箱馴養(yǎng)30 d后開始投喂試驗(yàn)飼料，投飼率為魚體重的2% ～4%，每天投喂 2次，在 08:00—08:30、16:00—16:30各投喂1次。試驗(yàn)期間每天08:00和16:00各測(cè)水溫1次，每周測(cè)1次水質(zhì)，保持水溫在(25.0±1.5)℃，溶氧≥6 mg/L，氨氮≤0.1 mg/L，pH 6.8～7.0。每天觀察魚攝食及死亡情況，并根據(jù)實(shí)際情況每隔1周增加投飼量。正式試驗(yàn)時(shí)間為56 d。

1.5 攻毒試驗(yàn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，分別從對(duì)照組和核苷酸組中選擇大小基本一致的魚30尾進(jìn)行攻毒試驗(yàn)，每組分3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)均為10尾魚。病原菌為浙江省淡水水產(chǎn)研究所提供的嗜水氣單胞菌BSK－10株。按王文博等［13］所述方法，將2次活化后的嗜水氣單胞菌用無菌生理鹽水稀釋，使其終濃度約為2×108個(gè)/mL。根據(jù)每100 g魚腹腔注射菌液1.0 mL的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行注射(例如:50 g魚，注射0.5 mL;40 g魚，注射0.4 mL)，注射后以重復(fù)為單位放養(yǎng)于容積為200 L的玻璃缸中，并保證充足的氧氣，每天觀察魚體死亡情況，觀察1周，統(tǒng)計(jì)不同時(shí)間點(diǎn)的累積死亡率。

1.6 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.6.1 生長(zhǎng)和形體指標(biāo)的測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，稱量每個(gè)網(wǎng)箱團(tuán)頭魴總重，以計(jì)算生長(zhǎng)指標(biāo)。在每個(gè)網(wǎng)箱中隨機(jī)抽取3尾魚，量取體長(zhǎng)、體重以及肝臟重，以計(jì)算形體指標(biāo)。1.6.2 血液生理生化指標(biāo)的測(cè)定

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)取3尾魚，將魚迅速撈起并立即投入濃度為200 mg/L的3－氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽溶液中快速深度麻醉;將2 mL注射器管壁用肝素潤濕，尾靜脈采血;血樣在4℃冰箱靜置1～2 h，于4℃、3 000 r/min下離心10 min制備血漿，血漿移入－20℃保存?zhèn)錅y(cè)。

血漿總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、葡萄糖(GLU)含量均采用比色法測(cè)定，試劑盒購自衛(wèi)生部上海生物制品研究所;甘油三酯(TG)、膽固醇(CHO)含量均采用酶法測(cè)定，試劑盒購自上海名典生物工程有限公司;谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和堿性磷酸酶(AKP)活性均采用比色法測(cè)定，試劑盒購自駿實(shí)生物科技(上海)有限公司;抗超氧陰離子水平采用比色法測(cè)定，試劑盒購自南京建成生物工程研究所。上述指標(biāo)均使用美國貝克曼Cx－4型全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行測(cè)定。

1.6.3 相關(guān)指標(biāo)的計(jì)算公式

存活率(SR，%)=100×(初始魚尾數(shù)－

死亡魚尾數(shù))/初始魚尾數(shù);攝食率(FR，%/d)=100×干物質(zhì)攝入量/［試驗(yàn)天數(shù)×(初始體重+終末體重)/2］;

特定生長(zhǎng)率(SGR，%/d)=100×(ln初始體重－ln終末體重)/試驗(yàn)天數(shù);

蛋白質(zhì)效率(PER，%)=100×(初始體重－

終末體重)/蛋白質(zhì)攝入量;

飼料系數(shù)(FCR)=飼料消耗量/魚體增重量;肝體比(HSI，%)=100×肝臟重/魚體重;內(nèi)臟比(VSI，%)=100×內(nèi)臟重/魚體重;肥滿度(CF，%)=100×魚體重/魚體長(zhǎng)3;累積死亡率(CMR，%)=100×(初始魚尾數(shù)－

終末魚尾數(shù))/初始魚尾數(shù)。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，采用Student氏t檢驗(yàn)法比較組間的差異性，P＜0.05表示差異顯著。所有結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，核苷酸組的特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率顯著提高(P＜0.05)，分別比對(duì)照組提高了9.52%和14.72%;飼料系數(shù)顯著降低(P＜0.05)，比對(duì)照組降低了10.99%;攝食率雖有所降低，但差異不顯著(P＞0.05)。這說明，飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸后能促進(jìn)魚體生長(zhǎng)，提高飼料利用率。

表2 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of yeast nucleotide on growth performance of buntnose black bream

同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P＜0.05)，相同小寫字母表示差異不顯著(P＞0.05)。下表同。

In the same column，values with different small letter superscripts mean significant difference(P＜0.05)，while with the same small letter superscripts mean no significant difference(P＞0.05).The same as below.

2.2 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴形體指標(biāo)和存活率的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，核苷酸組在各項(xiàng)形體指標(biāo)(肝體比、內(nèi)臟比、肥滿度)以及存活率上均未發(fā)生顯著變化(P＞0.05)，說明飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸后不會(huì)造成團(tuán)頭魴形體的改變，不會(huì)影響團(tuán)頭魴的存活率。

表3 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴形體指標(biāo)和存活率的影響Table 3 Effects of yeast nucleotide on body indices and survival rate of bluntnose black bream %

2.3 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴血液生理生化指標(biāo)的影響

2.3.1 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴免疫和抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，核苷酸組的血漿堿性磷酸酶活性無顯著變化(P＞0.05)，但有微弱的增加(增加幅度為6.97%)。核苷酸組的血漿抗超氧陰離子水平與對(duì)照組相比有了顯著提高(P＜0.05)，提高幅度達(dá)41.29%，說明飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸能顯著地增強(qiáng)團(tuán)頭魴的抗氧化功能。

表4 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴免疫和抗氧化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of yeast nucleotide on immune and antioxidant indices of bluntnose black bream U/L

2.3.2 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴肝功能指標(biāo)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，核苷酸組的各項(xiàng)肝功能指標(biāo)均未產(chǎn)生顯著變化(P＞0.05)，說明200 mg/kg的酵母核苷酸添加量不影響團(tuán)頭魴的肝功能。

表5 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴肝功能指標(biāo)的影響Table 5 Effects of yeast nucleotide on liver function indices of bluntnose black bream

2.3.3 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴血脂和血糖指標(biāo)的影響

由表6可知，與對(duì)照組相比，核苷酸組的血脂和血糖指標(biāo)均未產(chǎn)生顯著變化(P＞0.05)，說明200 mg/kg的酵母核苷酸添加量不影響團(tuán)頭魴的血脂和血糖代謝。

表6 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴血脂和血糖指標(biāo)的影響Table 6 Effects of yeast nucleotide on blood lipid and glucose indices of bluntnose black bream mmol/L

2.4 酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴抗病力的影響

*表示與對(duì)照組相比差異顯著(P＜0.05)。* means significant difference compared with the control group(P＜0.05).圖1 酵母核苷酸對(duì)嗜水氣單胞菌攻毒團(tuán)頭魴累積死亡率的影響Fig.1 Effects of yeast nucleotide on cumulative mortality rate of bluntnose black bream challenged with Aeromonas hydrophila

3 討論

3.1 核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性能的影響

國內(nèi)學(xué)者已證實(shí)了核苷酸對(duì)錦鯉［10］、異育銀鯽［11］、梭鱸［14］、斑點(diǎn)叉尾［15］、尖吻鱸［16］等魚種的促生長(zhǎng)作用，雖其適宜添加量因配方背景、魚種及核苷酸劑型不同而有很大差異，但一般在100～700 mg/kg范圍內(nèi)。本文選用團(tuán)頭魴作為試驗(yàn)對(duì)象，按照酵母核苷酸200 mg/kg的添加量進(jìn)行試驗(yàn)，也得到了類似的結(jié)果。其作用機(jī)理主要是:外源核苷酸能提供魚體快速生長(zhǎng)時(shí)細(xì)胞復(fù)制所需的核苷酸［17］;可使代謝酶活性增強(qiáng)，誘導(dǎo)激素或酶的合成［18］;能提高腸道消化酶活性，刺激胰蛋白酶分泌［8］;能使魚類腸皺壁基底膜厚度和腸道表面積增加，腸道折疊高度提高［19］。本文僅設(shè)計(jì)了200 mg/kg的酵母核苷酸添加量，該添加量是綜合了已有的文獻(xiàn)報(bào)道，并結(jié)合添加成本等因素決定的，結(jié)果表明該添加量能促進(jìn)團(tuán)頭魴的生長(zhǎng)，但未能得到該劑型核苷酸針對(duì)團(tuán)頭魴的最佳添加量，因此還需要做進(jìn)一步研究。

3.2 核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴免疫功能的影響

外源添加核苷酸能增強(qiáng)魚類的免疫功能，是因?yàn)轸~體的免疫細(xì)胞缺乏通過從頭合成途徑合成核苷酸的能力，必須依靠已經(jīng)合成好的外源核苷酸［20－21］。向 梟 等［6］研 究 表 明，飼 料 中 添 加519.85～774.00 mg/kg核苷酸能提高鯉魚血清溶菌酶、超氧化歧化酶和過氧化氫酶的活性;王銳等［7］研究表明，飼料中添加500 mg/kg核苷酸能提高異育銀鯽幼魚的非特異性免疫功能;魏文志等［11］研究表明，飼料中添加172 mg/kg核苷酸能提高異育銀鯽血清中堿性磷酸酶和溶菌酶活性。本研究表明，飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴血漿堿性磷酸酶活性雖無顯著影響，但

由圖1可知，在嗜水氣單胞菌攻毒試驗(yàn)中，在發(fā)生應(yīng)激12 h后，2組試驗(yàn)魚均開始出現(xiàn)死亡。在12～24 h，對(duì)照組試驗(yàn)魚的累積死亡率明顯高于核苷酸組，且死亡率的增加趨勢(shì)也明顯快于核苷酸組;48 h后，核苷酸組累積死亡率不再增加，而對(duì)照組累積死亡率的增加一直持續(xù)到96 h時(shí)。在整個(gè)攻毒試驗(yàn)期間，對(duì)照組試驗(yàn)魚12～168 h的累積死亡率為55.56%～72.22%(平均值為61.66%)，核苷酸組試驗(yàn)魚12～168 h的累積死亡率為16.671% ～44.44%(平均值為28.33%)。96～168 h的累積死亡率，對(duì)照組與核苷酸組之間存在顯著差異(P＜0.05)，說明添加量為200 mg/kg的酵母核苷酸可增強(qiáng)團(tuán)頭魴對(duì)嗜水氣單胞菌感染的抵抗能力。有增加趨勢(shì)。本研究結(jié)果與上述研究結(jié)果存在一定差異，這是否與試驗(yàn)魚種、飼料組成、試驗(yàn)條件、核苷酸的劑量及劑型不同有關(guān)，還需要進(jìn)一步研究。

3.3 核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴抗氧化功能的影響

動(dòng)物體內(nèi)存在有一定數(shù)量的超氧陰離子自由基，其不發(fā)生化學(xué)變化時(shí)對(duì)動(dòng)物體無害，但與羥基(—OH)結(jié)合后的產(chǎn)物會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞DNA被損壞，進(jìn)而破壞機(jī)體功能?？钩蹶庪x子能清除超氧陰離子自由基，使超氧陰離子自由基的產(chǎn)生與消除處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，從而減少超氧陰離子自由基對(duì)機(jī)體自身的損傷［9］。本試驗(yàn)研究表明，飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸顯著提高了團(tuán)頭魴血漿中抗超氧陰離子水平，說明團(tuán)頭魴的抗氧化功能得到增強(qiáng)。但關(guān)于核苷酸增強(qiáng)團(tuán)頭魴抗氧化功能的作用機(jī)理還不十分清楚，有待進(jìn)一步深入研究。

3.4 核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴形體、肝功能以及血脂和血糖指標(biāo)的影響

目前，國內(nèi)外關(guān)于核苷酸的研究多集中于其對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)性能、免疫功能、應(yīng)激、消化功能和體組成方面的影響。本文針對(duì)核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴形體(主要為肝體比、內(nèi)臟比、肥滿度)以及肝功能、血脂和血糖指標(biāo)的影響進(jìn)行了初探性研究，結(jié)果表明飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸對(duì)上述指標(biāo)均未產(chǎn)生顯著影響。核苷酸是生物體內(nèi)本身含有的物質(zhì)，不被生物體排斥。有學(xué)者認(rèn)為，動(dòng)物攝入過多的核酸類物質(zhì)會(huì)造成核酸代謝紊亂，血液中尿酸濃度上升，引起痛風(fēng)?。?］;但也有學(xué)者認(rèn)為，魚類肝臟中含有較高濃度的尿酸酶，可將尿酸轉(zhuǎn)化為尿囊素，再降解為尿素和乙醛酸并從尿中排泄出去，所以能耐受較高劑量的核苷酸［1］。關(guān)于魚類飼料中核苷酸的添加量到底多少才合適，還需要做更詳細(xì)地試驗(yàn)，本研究的結(jié)果僅證明酵母核苷酸200 mg/kg的添加量不會(huì)影響團(tuán)頭魴的形體發(fā)育、肝功能以及血脂和血糖代謝。

3.5 核苷酸對(duì)團(tuán)頭魴抗病力的影響

核苷酸作為免疫增強(qiáng)劑，通過刺激水生動(dòng)物非特異性免疫反應(yīng)達(dá)到預(yù)防傳染性疾病的目的［22－24］。本研究通過對(duì)團(tuán)頭魴進(jìn)行嗜水氣單胞菌攻毒試驗(yàn)，證明飼料中添加200 mg/kg酵母核苷酸能明顯降低團(tuán)頭魴的累積死亡率;并且核苷酸組的累積死亡率延續(xù)時(shí)間明顯比對(duì)照組縮短(大約縮短了48 h)，這種時(shí)間上的縮短可能與外源添加核苷酸后使團(tuán)頭魴的免疫功能和抗病力迅速增強(qiáng)有關(guān)。國外有研究用鰻弧菌、傳染性鮭魚貧血病毒(ISAV)、鮭魚立克次體、海洋寄生蟲分別感染大西洋鮭魚，結(jié)果發(fā)現(xiàn)飼料中添加300 mg/kg核苷酸能顯著降低大西洋鮭魚的累積死亡率［25］。本研究所得結(jié)果與國外的研究結(jié)果是相近的，至于添加量的差異，可能與試驗(yàn)魚種、飼料組成和試驗(yàn)條件不同有關(guān)，還需要進(jìn)一步研究。

3.6 關(guān)于酵母核苷酸劑型的選擇

將5種純核苷酸(純度≥90%)等量混合的劑型，其中的AMP、UMP、CMP需從酵母核酸的酶解液中經(jīng)繁瑣的提取工藝才能得到，生產(chǎn)成本較高，增加了添加成本;而8.6%酵母核苷酸劑型，不需經(jīng)過核苷酸的提純工藝，生產(chǎn)成本低廉，但有效成分含量低，影響?zhàn)B殖效果，也不便于飼料配方的設(shè)計(jì)。本研究采用的是有效成分(單體核苷酸+低聚核苷酸)含量達(dá)70%的酵母核苷酸，其中含有的低聚核苷酸被認(rèn)為具有特殊的生理保健功效［26］，其生產(chǎn)成本介于前2種劑型之間。但究竟何種劑型既能使養(yǎng)殖效果最好，又能使經(jīng)濟(jì)效益最顯著，還需進(jìn)行更詳細(xì)的對(duì)比研究。

4 結(jié)論

飼料中添加200 mg/kg的酵母核苷酸能在一定程度上促進(jìn)團(tuán)頭魴的生長(zhǎng)，增強(qiáng)魚體的抗氧化功能和抗病力，且不會(huì)影響魚體肝功能以及血脂和血糖代謝。

［1］ 李建武.生物化學(xué)［M］.北京:北京大學(xué)出版社，1990:79－92.

［2］ 蔡文杰，李劍波.外源核苷酸的營養(yǎng)作用及其研究進(jìn)展［J］.養(yǎng)殖與飼料，2005(4):20－24.

［3］ 趙華，王康寧.外源核苷酸營養(yǎng)生理作用研究進(jìn)展［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2003，15(4):7 －11.

［4］ 王友明.核苷酸對(duì)動(dòng)物的營養(yǎng)作用及其在飼料中應(yīng)用前景分析［J］.中國畜牧雜志，2002，38(5):49－51.

［5］ 許群，王安利.核苷酸對(duì)動(dòng)物攝食、生長(zhǎng)與免疫功能的影響［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2004，16(4):13－17.

［6］ 向梟，周興華，陳建，等.酵母核苷酸對(duì)鯉生長(zhǎng)性能、體組成及血清免疫指標(biāo)的影響［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2011，23(1):171 －178.

［7］ 王銳，莊建橋，朱慧玲，等.外源核苷酸對(duì)異育銀鯽幼魚非特異性免疫的影響［J］.水生態(tài)學(xué)雜志，2009，2(3):96 －99.

［8］ 王銳，王春維，李星燕，等.外源核苷酸對(duì)異育銀鯽幼魚消化酶活性的影響［J］.中國水產(chǎn)，2008(3):70－72.

［9］ 王廣軍，朱旺明，譚永剛，等.酵母核苷酸對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、免疫以及抗應(yīng)激影響的研究［J］.飼料工業(yè)，2006，27(8):29 －32.

［10］ 周興華，石蕓，羅孟川，等.酵母核苷酸對(duì)錦鯉幼魚生長(zhǎng)、體組成及飼料利用影響［J］.糧食與飼料工業(yè)，2009(2):36－40.

［11］ 魏文志，羅方妮，楊成，等.酵母核苷酸對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)和免疫酶活性的影響［J］.淡水漁業(yè)，2007，37(4):57－60.

［12］ 蔡顯鵬，儲(chǔ)炬，莊英萍，等.芽孢桿菌生產(chǎn)嘌呤核苷研究進(jìn)展［J］.中國生物工程雜志，2002，22(5):9 －14.

［13］ 王文博，汪建國，李愛華，等.擁擠脅迫后鯽魚血液皮質(zhì)醇和溶菌酶水平的變化及對(duì)病原的敏感性［J］.中國水產(chǎn)科學(xué)，2004，11(5):408 －412.

［14］ 王廣軍，龐世勛，黃建華.飼料中添加核苷酸對(duì)梭鱸生長(zhǎng)的影響［J］.廣東飼料，2008，17(11):21－22.

［15］ 王銳，李琴，朱惠玲，等.外源核苷酸對(duì)斑點(diǎn)叉尾生長(zhǎng)及腸道組織發(fā)育的影響［J］.水產(chǎn)科學(xué)，2010，29(12):718－720.

［16］ 王廣軍.核苷酸對(duì)尖吻鱸生長(zhǎng)的影響［J］.水產(chǎn)科技，2008，35(2):40 －41.

［17］ 孟現(xiàn)成，邵慶均.外源核苷酸在魚類飼糧中的應(yīng)用［J］.中國飼料，2007(4):39 －42.

［18］ 咎林森，邱懷.關(guān)于核苷酸與家禽生長(zhǎng)之調(diào)控［J］.甘肅畜牧獸醫(yī)，1994(5):27－28.

［19］ BURRELLS C，WILLIAMS P D，SOUTHGATE P J.Dietary nucleotides:a novel supplement in fish feeds 2.Effects on vaccination，salt water transfer，growth rates and physiology of Atlantic salmon［J］.Aquaculture，2001，199:171 －184.

［20］ 譚永剛.外源核苷酸的生理功能［J］.中國飼料，2002(13):22－23.

［21］ LOW C，WADSWORTH S，BURRELLS C，et al.Expression of immune genes in turbot(Scophthalmus maximus)fed a nucleotide－supplemented diet［J］.Aquaculture，2003，221:23 －40.

［22］ 王友明，鄒曉庭，胡彩虹.日糧核苷酸對(duì)動(dòng)物免疫功能的影響研究進(jìn)展［J］.畜牧獸醫(yī)雜志，2001，20(1):11－15.

［23］ 牟彬，鄧濤.魚類的核苷酸營養(yǎng)研究進(jìn)展［J］.飼料廣角，2006(17):41－43.

［24］ PENG L，DONALD H L，DELBERT M，et al.Dietary oligonucleotides from yeast RNA influence immune responses and resistance of hybrid striped bass(Morone chrysops × Morone saxatilis)to Streptococcus iniae infection［J］.Fish ＆ Shellfish Immunology，2004，16:561－569.

［25］ BURRELLS C，WILLIAMS P D，F(xiàn)ORNO P F.Dietary nucleotides:a novel supplement in fish feeds 1.Effects on resistance to diseases in salmonids［J］.Aquaculture，2001，199(1/2):159 －169.

［26］ 張艷，惠伯棣.日本功能性食品發(fā)展近況與未來展望［J］.中國食品添加劑，2006(2):74－78.