飼料中亞麻籽替代部分大豆油對(duì)異育銀鯽魚苗生長(zhǎng)性能、肌肉組成及血清生化指標(biāo)的影響

顧夕章 高啟平* 謝 駿 張媛媛 蔣宗杰 劉 波 戈賢平 李云蘭

(1.通威股份有限公司技術(shù)中心水產(chǎn)研究所，成都 610041;2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，無錫 214081)

隨著飼料工業(yè)的快速發(fā)展，油脂類原料特別是大豆油的價(jià)格快速上漲，飼料生產(chǎn)企業(yè)和魚類營(yíng)養(yǎng)研究者正積極探討其他油脂部分或全部替代大豆油的可能性。亞麻是重要油料作物之一，居世界油料總產(chǎn)量的第7位。亞麻籽雖含有生氰糖甙、亞麻籽膠和抗維生素B6等，但油脂含量高達(dá)38%，亞麻籽油中的亞麻酸含量高達(dá)55%(大豆油中僅為8%)，粗蛋白質(zhì)含量為19.3%，賴氨酸和蛋氨酸含量分別為0.93%和0.37%。關(guān)于亞麻籽應(yīng)用的研究報(bào)道主要集中在牛、羊等反芻動(dòng)物及雞飼料方面［1－2］，或是亞麻籽油在魚飼料中的應(yīng)用研究，很少有在魚飼料中直接使用亞麻籽的報(bào)道。本試驗(yàn)開展了亞麻籽應(yīng)用于異育銀鯽飼料中的試驗(yàn)研究，旨在探討異育銀鯽飼料中亞麻籽的適宜用量，為異育銀鯽配合飼料節(jié)省原料成本提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

異育銀鯽(Carassius auratus gibelio)魚苗由中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心南泉養(yǎng)殖試驗(yàn)基地提供。經(jīng)15d暫養(yǎng)、馴化后，選擇體格健康、初均重(14.32±0.02)g的異育銀鯽336尾，隨機(jī)分為4個(gè)組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放魚28尾，以重復(fù)為單位放養(yǎng)于實(shí)驗(yàn)室可控溫流水循環(huán)系統(tǒng)中的12個(gè)圓形蓄養(yǎng)槽中。

1.2 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)以魚粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕為蛋白質(zhì)源，以大豆油為脂肪源配制基礎(chǔ)飼料，用亞麻籽替代部分大豆油配制3種與基礎(chǔ)飼料等氮、等能的試驗(yàn)飼料，用面粉和200型菜籽粕來調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)平衡。Ⅰ組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼料(大豆油含量為 5.4%)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別飼喂用 2.40%、4.80%和7.20%亞麻籽替代基礎(chǔ)飼料中16.67%、33.33%和50.00%大豆油的試驗(yàn)飼料。飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。飼料原料經(jīng)粉碎過40目篩，混合均勻后用SLP－45小型顆粒機(jī)(中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院漁業(yè)機(jī)械儀器研究所研制)加工成直徑1.5 mm、長(zhǎng)3～4 mm的顆粒飼料，電風(fēng)扇條件下干燥后置于冰箱中4℃密封保存。

表1 飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels ofdiets(air-dry basis) %

1.3 飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖設(shè)施為室內(nèi)控溫流水循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng)，單個(gè)圓形蓄養(yǎng)槽規(guī)格為820 mm×700 mm，以曝氣自來水為水源，使用自動(dòng)控電開關(guān)調(diào)節(jié)水溫度，日夜連續(xù)充氣增氧、控溫，定期測(cè)量水質(zhì)。整個(gè)試驗(yàn)期間水質(zhì)條件為:水溫 24.5～27.5℃、溶解氧在6 mg/L以上、氨氮在0.1 mg/L以下、亞硝酸鹽在0.1 mg/L 以下、pH 6.8 ～ 7.0。飼料于每天08:30、12:30、16:30各投喂1次，投喂量為各試驗(yàn)組魚體體重的3%～4%。

1.4 樣品采集與分析

1.4.1 生物學(xué)指標(biāo)的測(cè)定方法

飼養(yǎng)試驗(yàn)第63天每缸隨機(jī)抽取3尾魚測(cè)定體重、體長(zhǎng)、內(nèi)臟重、肝臟重，用于肥滿度、內(nèi)臟比、肝體比的測(cè)定。采樣前停喂24 h，對(duì)每缸分別進(jìn)行稱重，測(cè)定每缸魚的總體重和尾數(shù)，計(jì)算特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)。

1.4.2 常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定方法

1.4.2.1 樣品制備

每缸隨機(jī)抽取3尾魚，每組采集9尾魚。自魚體兩側(cè)頭蓋骨后至尾鰭前取體背肌肉樣品，剪碎、混勻后一部分用于常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定;另一部分冷凍干燥，用于脂肪酸的測(cè)定。

1.4.2.2 營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定

魚體肌肉水分含量測(cè)定采用105℃烘干法;粗蛋白質(zhì)含量測(cè)定采用微量凱氏定氮法;粗脂肪含量測(cè)定采用全脂肪法;粗灰分含量測(cè)定采用小火炭化后馬福爐560℃灼燒法。

1.4.2.3 脂肪酸的測(cè)定

每缸隨機(jī)抽取3尾魚，每組采集9尾魚，每3尾魚作1個(gè)混合樣本，每組脂肪酸分析3個(gè)樣本。總脂肪酸的測(cè)定采用馮大偉等［3］的方法，氯仿∶甲醇∶H2O=2∶2∶1 抽提總脂肪，分別用 1 mol/L 氫氧化鉀－甲醇和0.5 mol/L硫酸甲醇溶液使脂肪酸甲酯化，再用正庚烷萃取脂肪酸甲酯。樣品皂化甲酯化后，直接上氣相色譜－質(zhì)譜儀進(jìn)行分析。檢索美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院(NIST)質(zhì)譜圖庫(kù)，比較樣品質(zhì)譜圖與圖庫(kù)中標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖，以確定樣品中脂肪酸種類，各脂肪酸相對(duì)含量的確定采用面積歸一化法計(jì)算。

1.4.3 血清生化指標(biāo)測(cè)定

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后分別從每個(gè)缸隨機(jī)取異育銀鯽3尾，每組9尾魚，麻醉后用紗布擦干尾部，采用一次性注射器尾靜脈采血，于4℃冰箱中靜置3 h后，10 000 r/min、4 ℃離心 5 min，提取血清，置于－70℃冰箱中保存?zhèn)溆?，用于血清生化指?biāo)的測(cè)定。堿性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)活性采用駿實(shí)生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的試劑盒在美國(guó)貝克曼Cx－4型自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定。血清葡萄糖(glucose，Glu)含量用葡萄糖氧化酶－過氧化物酶終點(diǎn)比色法(美國(guó)貝克曼Cx－4型自動(dòng)生化分析儀)測(cè)定，試劑盒購(gòu)自衛(wèi)生部上海生物制品研究所。血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase，AST) 活性及膽固醇(cholesterol，CHOL)、甘油三酯(triglyceride，TG)、總蛋白(total protein，TP)、白蛋白(albumin，AP)、球蛋白(globin，GP)含量采用比色法(美國(guó)貝克曼Cx－4型自動(dòng)生化分析儀)測(cè)定，試劑盒購(gòu)自上海名典生物工程公司。血清皮質(zhì)醇(cortisol，COR)含量采用放射免疫法(RIA)測(cè)定，試劑盒購(gòu)自北京北方生物技術(shù)研究所。

1.5 相關(guān)指標(biāo)計(jì)算公式

特定生長(zhǎng)率(specific growth rate，SGR，%/d)=100×(ln末均重－ln初均重)/飼養(yǎng)天數(shù);

飼料系數(shù)(feed conversion ratio，F(xiàn)CR)=每個(gè)缸投喂飼料總量/每個(gè)缸魚體總增重量;

肝體比(hepatosomatic index，HIS，%)=100 ×試驗(yàn)?zāi)~體肝重/試驗(yàn)?zāi)~體重;

肥滿度(condition factor，CF，%)=100 ×試驗(yàn)?zāi)~體重/試驗(yàn)?zāi)~體長(zhǎng)度3;

內(nèi)臟比(viserosomatic index，VSI，%)=100 ×(試驗(yàn)?zāi)~內(nèi)臟重/試驗(yàn)?zāi)~體重)。

1.6 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 13.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan氏法多重比較檢驗(yàn)組間差異，數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，以P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中亞麻籽替代部分大豆油對(duì)異育銀鯽魚苗生長(zhǎng)性能的影響

由表2可見，各組間魚體特定生長(zhǎng)率、飼料系數(shù)沒有顯著差異(P＞0.05)。各組鯽魚的末均重依次為Ⅱ組＞Ⅲ組＞Ⅳ組＞Ⅰ組，Ⅱ組鯽魚的增重最大。Ⅲ、Ⅳ組鯽魚特定生長(zhǎng)率相當(dāng)(P＞0.05)。以上結(jié)果說明，飼料中使用亞麻籽替代部分大豆油對(duì)鯽魚的生長(zhǎng)性能沒有顯著影響。

2.2 飼料中亞麻籽替代部分大豆油對(duì)異育銀鯽魚苗形體指標(biāo)及肌肉成分的影響

由表3可見，與對(duì)照組相比，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的魚體肥滿度顯著提高(P＜0.05)，Ⅲ組的魚體內(nèi)臟比顯著提高(P＜0.05)。各組異育銀鯽的肝體比無顯著差異(P＞0.05)。由表4可見，各組魚體肌肉水分、粗脂肪、粗灰分含量差異不顯著(P＞0.05);與對(duì)照組相比，Ⅲ、Ⅳ組魚體肌肉粗蛋白質(zhì)含量顯著降低(P＜0.05)。以上結(jié)果說明，飼料中使用一定水平的亞麻籽有利于提高魚體的肥滿度，但魚體肌肉中粗脂肪、粗蛋白質(zhì)含量會(huì)下降，尤其是肌肉粗蛋白質(zhì)含量會(huì)較對(duì)照組顯著下降。

由表5可見，隨著亞麻籽水平增加，魚體肌肉中亞麻酸水平相應(yīng)增加，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組魚體肌肉中亞麻酸含量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其他脂肪酸含量與對(duì)照組無顯著差異(P＞0.05)。這說明飼料中使用亞麻籽會(huì)顯著提高魚體肌肉中亞麻酸含量。

表2 異育銀鯽的生長(zhǎng)性能Table 2 The growth performance of allogynogenetic silver crucian carp(n=3)

表3 異育銀鯽的肝體比、肥滿度和內(nèi)臟比Table 3 The HSI，CF and VSI of allogynogenetic silver crucian carp(n=9) %

表4 異育銀鯽肌肉成分Table 4 The muscle composition of allogynogenetic silver crucian carp(n=9)

表5 異育銀鯽肌肉的脂肪酸組成Table 5 The fatty acid composition of allogynogenetic silver crucian carp(n=3) %

2.3 飼料亞麻籽替代部分大豆油對(duì)異育銀鯽魚苗血清生化指標(biāo)的影響

由表6可見，各組之間血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活性及甘油三酯、皮質(zhì)醇、總蛋白、白蛋白、球蛋白含量沒有顯著差異(P＞0.05)。I組異育銀鯽血清葡萄糖含量顯著高于Ⅲ、Ⅳ組(P＜0.05);Ⅲ、Ⅳ組異育銀鯽血清膽固醇含量顯著高于Ⅰ、Ⅱ組(P ＜0.05)。

表6 異育銀鯽的血清生化指標(biāo)Table 6 The serum biochemical indices of allogynogenetic silver crucian carp(n=9)

3 討論

淡水魚能很好地利用n-3和n-6短鏈脂肪酸，它們能夠?qū)⑦@些短鏈脂肪酸延長(zhǎng)和去飽和，變成代謝所需的長(zhǎng)鏈脂肪酸［3］。姜召山等［4］的研究結(jié)果表明，基礎(chǔ)飼料中添加亞麻酸能提高鯽魚的增長(zhǎng)率和特定生長(zhǎng)率，降低飼料系數(shù)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在飼料中使用少量的亞麻籽替代大豆油對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能沒有顯著影響，說明在異育銀鯽飼料中可使用亞麻籽替代部分大豆油，這可能跟亞麻籽能直接在飼料中提供亞麻酸有關(guān)。亞麻籽在動(dòng)物飼料中使用受制約的因素主要有:1)含有生氰糖甙，可引起動(dòng)物氫氰酸中毒。生氰糖甙在進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體后，在體內(nèi)酶的作用下，被水解為劇毒的氫氰酸，氫氰酸和氰化物容易經(jīng)消化道或呼吸道被吸收，氫基根和體內(nèi)組織細(xì)胞含有的細(xì)胞色素氧化酶中的鐵結(jié)合，使細(xì)胞色素氧化酶的正常生物氧化過程不能進(jìn)行，造成組織細(xì)胞缺氧，引起動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)機(jī)能嚴(yán)重障礙，發(fā)生興奮、痙攣、抑郁、迅速死亡;2)亞麻籽種子體積小、外皮堅(jiān)實(shí)、脂肪含量高，增加了飼料生產(chǎn)工藝上的粉碎難度;3)亞麻籽含有亞麻籽膠和抗維生素B6，對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生有害作用［5－7］。

為期63d的異育銀鯽養(yǎng)殖試驗(yàn)過程中沒有發(fā)現(xiàn)添加亞麻籽后對(duì)魚體生長(zhǎng)有明顯的負(fù)面影響。這可能是與亞麻籽含量，尤其是亞麻籽中的氫氰酸含量不高有關(guān)。從養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)魚體血清生化指標(biāo)的檢測(cè)數(shù)據(jù)來看，添加亞麻籽飼料組魚體的血清生化指標(biāo)中葡萄糖、膽固醇發(fā)生了一定程度的變化，而皮質(zhì)醇、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、甘油三酯等指標(biāo)沒有明顯變化。這表明使用亞麻籽后對(duì)異育銀鯽苗種生理上產(chǎn)生了一定程度的影響，但對(duì)肝功能沒有造成明顯的負(fù)面影響。通過通威檢測(cè)中心檢測(cè)，亞麻籽中氫氰酸的含量為140 mg/kg，折算到飼料中因其所帶來的氫氰酸最高含量為10.02 mg/kg，這遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(氫氰酸含量小于350 mg/kg;豬雞飼料中小于50 mg/kg)。Abd-Aleem 等［8］的研究表明，鯉魚飼料中當(dāng)生氰糖甙含量為379 mg/kg的亞麻籽餅用量不超過8%時(shí)不會(huì)明顯影響魚體生長(zhǎng)，該試驗(yàn)亞麻籽餅的適宜用量較高，分析認(rèn)為可能是與該試驗(yàn)飼料的原料組成有關(guān)。

研究表明，亞麻籽在飼料中的應(yīng)用可以提高肉雞［9］、反芻動(dòng)物［10］等肉品質(zhì)。姜召山等［4］的研究也表明，飼料中添加亞麻酸能顯著提高魚體蛋白質(zhì)和脂肪的含量。本試驗(yàn)中亞麻籽的使用能顯著提高異育銀鯽肌肉中亞麻酸含量。這可能是因?yàn)閬喡樽阎泻衼喡樗?，提高了異育銀鯽肌肉中的亞麻酸含量，這與王利華等［11］在蛋雞、郎婧等［12］在豬方面的研究結(jié)果一致。但是如果使用過多的亞麻籽，如在異育銀鯽飼料中使用4.80%、7.20%的亞麻籽替代大豆油時(shí)，顯著降低了肌肉粗蛋白質(zhì)含量。分析認(rèn)為這可能與亞麻籽中的毒素含量有關(guān)，具體還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

① 飼料中使用 2.40%、4.80%、7.20% 亞麻籽替代部分大豆油對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)性能無顯著影響，并提高了肌肉亞麻酸含量。

②育銀鯽飼料中使用過多的亞麻籽(4.80%、7.20%)替代大豆油時(shí)可顯著降低肌肉粗蛋白質(zhì)含量，降低血清葡萄糖含量，增加血清膽固醇含量。

③綜合分析可知，異育銀鯽魚苗飼料中亞麻籽替代大豆油以不超過2.40%為宜。

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