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    凍瘡藥酒的藥理作用研究

    2012-08-29 13:18:20孫靜徐富培成都市婦女兒童中心醫(yī)院成都610091重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院重慶400016
    中國藥房 2012年19期
    關(guān)鍵詞:涂藥凍瘡藥酒

    孫靜,徐富培(1.成都市婦女兒童中心醫(yī)院,成都610091;2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院,重慶400016)

    凍瘡在我國西北和西南地區(qū)比較常見,在冬季潮濕寒冷的環(huán)境下,防寒不夠則易發(fā)生。常見于肢體末端和面部暴露的局部皮膚,常表現(xiàn)為局部紅腫、潰瘍、遇熱癢痛難忍,一旦發(fā)生,常難治愈;隨氣溫升高發(fā)生癢感,嚴(yán)重者傷及皮膚、肌肉,給工作和生活帶來不便。筆者根據(jù)民間驗方制備凍瘡藥酒,3年來,單用凍瘡藥酒共治愈188例不同部位的凍瘡患者,取得滿意療效。為探明凍瘡藥酒藥理作用,本研究選用高、低濃度進(jìn)行藥理學(xué)實驗,為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

    1 儀器與材料

    1.1 儀器

    721型分光光度計(天津市光學(xué)儀器廠)。

    1.2 試藥

    凍瘡藥酒(筆者自制);吲哚美辛搽劑(黑龍江省佳木斯晨星制藥廠,批號:20110530);磷酸組胺(分析純,中國科學(xué)院上海生物化學(xué)研究所,批號:8112104);潔爾陰洗液(中外合資成都恩威世亨制藥有限公司,批號:1109045);阿司匹林(南京白敬宇制藥有限公司,批號:110908)。

    1.3 動物

    昆明種小鼠120只,♀♂兼用,體重18~22g;Wistar大鼠40只,♀♂兼用,體重200~250g;豚鼠40只,♀♂兼用,體重200~280g,均由重慶醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供(動物使用許可證號:SCXK(渝)2002-0001)。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 凍瘡藥酒的制備

    按處方中的藥物比例,取適量紅花、制川烏、制草烏、紫草4味中藥置于適宜容器中,加適量白酒(含乙醇55%~60%),常溫下密閉浸漬,期間每天攪拌數(shù)次,約10d后濾過,濾液加適量冰片,溶解,攪勻,分裝,即得凍瘡藥酒。該制劑僅供局部敷患處使用,嚴(yán)禁口服。筆者分別制備了高、低濃度凍瘡藥酒,每1mL含原藥材分別為0.3(30%)、0.15g(15%)。

    2.2 抗炎作用(二甲苯小鼠耳廓腫脹法)

    [1,2],取小鼠40只,隨機分為模型(生理鹽水)、吲哚美辛(1.5%)和凍瘡藥酒高、低濃度(30%、15%)組。將二甲苯0.05mL涂于各組小鼠左耳前后兩面,右耳不涂藥作為對照。致炎后30min在致炎耳處連續(xù)2次分別涂相應(yīng)藥物,每次間隔30min。于4h后將小鼠頸椎脫臼處死,剪下左右耳,用打孔器取雙耳同等部位耳片,稱重。左右耳重量之差為腫脹度,分組統(tǒng)計,組間行t檢驗,按下列公式計算受試藥腫脹抑制率:腫脹抑制率=(模型組平均腫脹度-給藥組平均腫脹度)/模型組平均腫脹度×100%。

    與模型組比較,凍瘡藥酒高、低濃度組腫脹抑制率顯著增高(P<0.01),且呈劑量依賴性。結(jié)果表明,凍瘡藥酒能顯降低小鼠耳廓腫脹度。凍瘡藥酒的抗炎作用見表1。

    表1 凍瘡藥酒的抗炎作用(±s)Tab 1 Anti-inflammation effects of Chilblain medicinal liquo(r±s)

    表1 凍瘡藥酒的抗炎作用(±s)Tab 1 Anti-inflammation effects of Chilblain medicinal liquo(r±s)

    與模型組比較:*P<0.01vs.model group:*P<0.01

    n組別模型組吲哚美辛組凍瘡藥酒高濃度組凍瘡藥酒低濃度組藥物濃度/%-1.5301510101010腫脹度/mg 12.9±2.27.7±1.6*7.9±3.2*8.8±2.8*腫脹抑制率/%-40.3*38.8*31.8*

    2.3 消腫作用

    參考文獻(xiàn)[3],取大鼠40只,分組與藥物濃度同“2.1”項。各組大鼠于實驗前按毛細(xì)血管放大測量法測定大鼠左后腳趾正常體積(cm3)。實驗當(dāng)天,各組大鼠分別于左后腳兩面涂相應(yīng)藥物0.1mL/只腳,涂藥2次,間隔1h;末次給藥后往左后腳注射蛋清0.1mL/只腳。各組大鼠分別于注射蛋清后1、2、4、6h測定左后腳體積,各大鼠注射蛋清前后腳趾體積差值為腫脹度,分組統(tǒng)計,組間行t檢驗。與模型組比較,凍瘡藥酒高、低濃度組腫脹度顯著減少(P<0.01)。結(jié)果表明,凍瘡藥酒有明顯的消腫作用。凍瘡藥酒的消腫作用見表2。

    表2 凍瘡藥酒的消腫作用(±s)Tab 2Effects of Chilblain medicinal liquo(r±s)

    表2 凍瘡藥酒的消腫作用(±s)Tab 2Effects of Chilblain medicinal liquo(r±s)

    與模型組比較:*P<0.01vs.model group:*P<0.01

    組別模型組吲哚美辛組凍瘡藥酒高濃度組凍瘡藥酒低濃度組濃度/%-1.53015 n 致炎前腳趾體積/cm3致炎后不同時間腳趾腫脹度/cm3 101010101.59±0.401.43±0.121.64±0.141.62±0.181h 0.76±0.190.39±0.22*0.38±0.22*0.39±0.19*2h 0.61±0.110.31±0.24*0.29±0.18*0.31±0.26*4h 0.45±0.160.27±0.19*0.22±0.13*0.25±0.10*6h 0.34±0.130.18±0.14*0.14±0.11*0.15±0.09*

    2.4 止癢作用

    取豚鼠40只,隨機分為模型(生理鹽水)、潔爾陰(100%)和凍瘡藥酒高、低濃度(30%、15%)組。實驗前24h將各組豚鼠左后腳背剃毛,然后涂藥1次,0.2mL/只腳。實驗當(dāng)天用砂紙磨擦腳背剃毛處,直至腳背皮膚有輕度滲血,再涂藥2次,每次間隔1h。于末次給藥后15min將0.01%磷酸組胺涂于擦傷的腳背表面,容量50μL/只腳,以后每3min依次涂0.02%、0.03%......遞增濃度,每次容量均為50μL/只腳,直至豚鼠回頭舔右腳為止,此時累加所給磷酸組胺總量為致癢閾。分組統(tǒng)計,組間行t檢驗。與模型組比較,凍瘡藥酒高、低濃度組止癢閾顯著上升(P<0.01)。結(jié)果表明,凍瘡藥酒有明顯的止癢作用。凍瘡藥酒的止癢作用見表3。

    表3 凍瘡藥酒的止癢作用(±s)Tab 3 Relieving itching effects of Chilblain medicinal liquor(±s)

    表3 凍瘡藥酒的止癢作用(±s)Tab 3 Relieving itching effects of Chilblain medicinal liquor(±s)

    與模型組比較:*P<0.01vs.model group:*P<0.01

    n 組別模型組潔爾陰組凍瘡藥酒高濃度組凍瘡藥酒低濃度組0.910030151010101031.2±26.3178.3±81.4*235.5±27.4*90.8±37.6*藥物濃度/%止癢閾/μg

    2.5 鎮(zhèn)痛作用(熱板法)

    參考文獻(xiàn)[1],取♀小鼠置于金屬熱板(55℃),以舔后腳為疼痛反應(yīng)指標(biāo),共測2次,每次不超過30s舔腳者為入選實驗動物,小鼠舔腳平均時間為給藥前痛閾值。選取合格小鼠40只,隨機分為4組,即模型(生理鹽水)、阿司匹林(1.1%,30mL·kg-1)和凍瘡藥酒高、低濃度(30%、15%)組。其中阿司匹林為陽性藥物對照,按人體動物等效劑量推算[3],應(yīng)為1.1%濃度,30mL·kg-1。阿司匹林ig給藥,而凍瘡藥酒組仍按后腳涂藥,共給藥3次,每次給藥間隔1h,末次給藥0.5h后開始測定痛閾值,分組進(jìn)行統(tǒng)計,與給藥前痛閾值比較,行t檢驗。與模型組比較,凍瘡藥酒高、低濃度組給藥前后痛閾值差顯著增加(P<0.01)。結(jié)果表明,凍瘡藥酒有明顯的鎮(zhèn)痛作用。凍瘡藥酒的鎮(zhèn)痛作用見表4。

    表4 凍瘡藥酒的鎮(zhèn)痛作用(±s)Tab 4 Analgesic effect of Chilblain medicinal liquor on mice(±s)

    表4 凍瘡藥酒的鎮(zhèn)痛作用(±s)Tab 4 Analgesic effect of Chilblain medicinal liquor on mice(±s)

    與模型組比較:*P<0.01vs.model group:*P<0.01

    給藥前后痛閾值差/s 1.26±0.2637.40±3.88*8.68±2.32*5.47±2.26*組別模型組阿司匹林組凍瘡藥酒高濃度組凍瘡藥酒低濃度組n藥物濃度/%0.91.1301510101010

    2.6 抑制毛細(xì)血管通透性作用

    取小鼠40只,分組與給藥濃度同“2.4”項,各組給予相應(yīng)藥物涂于小鼠腹部皮膚,0.5mL/只,共3次,給藥時間間隔1h。于末次給藥15min后經(jīng)尾iv 1%伊文思藍(lán)生理鹽水0.05mL·10g-1,給藥后30min處死小鼠,用生理鹽水反復(fù)沖洗腹腔至6mL,收集于燒杯,加0.1moL·L-1的NaOH 0.2mL,混勻,離心300r·min-1,590nm波長處比色測定各組小鼠吸光度(A)值。與模型組比較,凍瘡藥酒高、低濃度組A值顯著下降(P<0.01)。結(jié)果表明,凍瘡藥酒能明顯抑制血管的通透性。凍瘡藥酒抑制小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性作用見表5。

    3 討論

    凍瘡的發(fā)病機制不明,可能與皮膚血管對寒冷過敏有關(guān)。凍瘡患者出現(xiàn)較粗的皮膚小動脈持久性痙攣收縮,較小的表淺血管持久性擴張產(chǎn)生血瘀,局部組織缺血缺氧,導(dǎo)致組織細(xì)胞受損[3]。目前對凍瘡多采用擴血管藥物、抗組胺藥物或活血化瘀等藥物治療,局部外用,以改善微循環(huán),待氣溫回升而愈。

    表5 凍瘡藥酒抑制小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性作用(±s)Tab 5 Inhibition effects of Chilblain medicinal liquor on permeability of abdominal capillary in mic(e±s)

    表5 凍瘡藥酒抑制小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性作用(±s)Tab 5 Inhibition effects of Chilblain medicinal liquor on permeability of abdominal capillary in mic(e±s)

    與模型組比較:*P<0.01vs.model group:*P<0.01

    n組別模型組潔爾陰組凍瘡藥酒高濃度組凍瘡藥酒低濃度組0.91003015101010100.24±0.030.15±0.06*0.12±0.02*0.14±0.04*藥物濃度/%A值

    凍瘡藥酒具有活血、止痛、化瘀、消炎作用,按西醫(yī)的說法是具有改善局部循環(huán)和組織缺血缺氧。方中紫草活血化瘀;冰片防腐生?。患t花中的紅花苷和紅花素有活血通經(jīng)、祛瘀止痛,消散瘡瘍之效;制川烏、制草烏止痛消炎。本研究結(jié)果表明,高、低濃度凍瘡藥酒可消除模型小鼠耳廓腫脹度,消除大鼠腳趾腫脹度,提高磷酸組胺止癢閾,提高模型小鼠給藥前后痛閾值差,抗炎消腫、改善血管通透性作用明顯。

    綜上所述,凍瘡藥酒配制簡單,價格低廉,能抗炎止痛、活血化瘀,值得試用。

    參考文獻(xiàn)

    [1] 徐叔云,卞如謙,陳 修,等.藥理實驗方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:916、885.

    [2] 周遠(yuǎn)大,江 舟,何海霞,等.野馬追對大、小鼠實驗性高脂血癥的防治作用[J].中國藥房,2007,18(3):178.

    [3] 趙 辨.臨床皮膚病學(xué)[M].第2版.南京:江蘇科學(xué)技術(shù)出版社,1990:479.

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