吉祥草根莖化學(xué)成分研究

王 倩 郭志勇 鄒 坤

（三峽大學(xué) 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院 天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 宜昌 443002）

吉祥草為百合科吉祥草屬植物吉祥草Reineckia carnea（Andr）Kunth的全草，別名觀音草、松壽蘭、小葉萬年青，是百合科植物中的單種屬植物［1].吉祥草主要分布在華東、中南、西南各省區(qū)，是我國西南苗族地區(qū)常用的傳統(tǒng)草藥之一.全草入藥，能潤肺止咳、平喘、祛風(fēng)、接骨、治肺結(jié)核咳嗽，也可用于補(bǔ)腎壯腰、咯血、慢性支氣管炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，外用可治跌打損傷［2].現(xiàn)代藥理研究表明吉祥草具有良好的抗真菌［3]、溶血、止血、化痰、抗炎［4]、及抗腫瘤［5]等藥理活性.為充分利用湖北長陽地區(qū)豐富的吉祥草資源，本文對(duì)其乙醇提取物進(jìn)行系統(tǒng)分離，得到并鑒定了6個(gè)化合物，分別為nicotianoside B（1），胡蘿卜苷（2），βecdysone（2β，3β，14α，20R，22R，25－h(huán)exahydroxy－5βcholest－7－en－6－one）（3），槲皮素（4），蘆丁（5）.其中化合物3為首次從該屬植物中分離獲得.

1 儀器和試劑

多功能強(qiáng)制滲漉罐，溫州鴻馳化工醫(yī)藥設(shè)備有限公司；高效液相色譜儀，Varian公司；中壓制備色譜柱YMC（20mm×250mm，5μm），半制備色譜柱YMC（10mm×250mm，5μm），分析型色譜柱 YMC（4.6mm×250mm，5μm）；質(zhì)譜用Finnigin電噴霧質(zhì)譜儀測定；核磁共振用Bruker A－400核磁共振儀測定，TMS為內(nèi)標(biāo)，氘代試劑作溶劑；反相硅膠為進(jìn)口YMC RP－C18；高效液相用甲醇、乙腈均為色譜純，水為三蒸水.

實(shí)驗(yàn)用吉祥草采自湖北長陽，經(jīng)三峽大學(xué)化學(xué)與生命學(xué)院陳發(fā)菊博士和王玉兵老師鑒定為吉祥草屬植物吉祥草Reineckiacarnea（Andr）Kunth的根莖，標(biāo)本保存于三峽大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院天然產(chǎn)物研究與開發(fā)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，標(biāo)本編號(hào)為KNPD220060628.

2 提取與分離

將吉祥草根莖烘干粉碎（4.0kg），以90%的乙醇用多功能強(qiáng)制滲漉罐加熱回流提取3次，合并提取液，濃縮成浸膏，用水懸浮，分別以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，得各部位浸膏分別為130g、112g、550g.取乙酸乙酯部位浸膏經(jīng)硅膠柱色譜，以氯仿－甲醇（15∶1）洗脫，然后用丙酮重結(jié)晶，得到化合物1和2.取正丁醇部位浸膏經(jīng)氯仿－甲醇硅膠柱層析得到50個(gè)流份（Fr 1－50），其中Fr 35－40合并經(jīng)中壓制備高效液相（乙腈／水（V／V）＝20∶80，檢測波長203nm）得到化合物3，F(xiàn)r12－15合并經(jīng)半制備高效液相（甲醇／水（V／V）＝30∶70，檢測波長350nm）得到化合物4－5.

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色針晶（甲醇），mp240～242℃，分子式 C39H64O12.ESI－MS m／z 747［M＋Na]＋.1HNMR（CD3OD，400MHz）：δ0.79（3H，s，H－18），δ 1.10（3H，s，H－19），0.98（3H，d，J＝6.9Hz，H－27），1.08（3H，d，J＝7.1Hz，H－21），3.78（1H，m，H－3）.13C－NMR（CD3OD，100MHz）：δ34.4（C－1），27.6（C－2），77.2（C－3），27.1（C－4），43.4（C－5），27.0（C－6），36.7（C－7），41.2（C－8），57.4（C－9），32.8（C－10），22.2（C－11），41.6（C－12），40.2（C－13），66.1（C－14），32.7（C－15），82.3（C－16），63.7（C－17），18.2（C－18），14.7（C－19），43.2（C－20），16.4（C－21），111.1（C－22），27.1（C－23），26.7（C－24），28.5（C－25），67.1（C－26），17.0（C－27），101.9（glc，C－1），78.6（glc，C－2），77.7（glc，C－3），71.8（glc，C－4），74.3（glc，C－5），68.9（glc，C－6），98.5（Rha，C－1），71.8（Rha，C－2），70.2（Rha，C－3），71.9（Rha，C－4），70.2（Rha，C－5），19.5（Rha，C－6）.通過與文獻(xiàn)［6]數(shù)據(jù)比較，與化合物nicotianoside B的波譜數(shù)據(jù)一致，因而確定化合物1為nicotianoside B.

化合物2：無色針晶（甲醇），mp291～292℃.1H，13C－NMR（Py－d5，400MHz）數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7]報(bào)道的胡蘿卜苷一致.將化合物與胡蘿卜標(biāo)準(zhǔn)品作TLC對(duì)照，經(jīng)不同溶劑系統(tǒng)展開，其Rf值一致，故鑒定該化合物為胡蘿卜苷.

化合物3：白色粉末，mp238～240℃，分子式C27 H44O7.1H－NMR（CD3OD，400MHz）：δ0.89（3H，s，H－19），0.96（3H，s，H－18），1.19（3H，s，H－21）.13C－NMR（CD3OD，100MHz）：δ37.3（C－1），68.7（C－2），68.5（C－3），32.8（C－4），51.8（C－5），206.4（C－6），122.1（C－7），168.0（C－8），35.1（C－9），39.3（C－10），21.5（C－11），32.5（C－12），49.6（C－13），85.2（C－14），31.8（C－15），21.5（C－16），50.5（C－17），18.1（C－18），24.4（C－19），77.9（C－20），21.1（C－21），78.4（C－22），27.3（C－23），42.4（C－24），71.3（C－25），29.7（C－26），29.0（C－27）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8]報(bào)道基本一致，故鑒定為β－ecdysone（2β，3β，14α，20R，22R，25－h(huán)exahydroxy－5β－cholest－7－en－6－one），此化合物為首次從吉祥草中分離得到的蛻皮甾酮類化合物.

化合物4：黃色針狀結(jié)晶（甲醇），mp314～316℃，分子式 C15H10O7.1H －NMR（MDSO－d6，400MHz）顯示5個(gè)活潑酚羥基質(zhì)子信號(hào)，分別為δ12.5（1H，s），10.11（1H，s），9.37（3H，s），其中δ12.5（1H，s）為黃酮類化合物5位酚羥基的特征信號(hào).另較高場處顯示出5個(gè)芳香質(zhì)子信號(hào)，δ6.43（1H，d，J＝2.0 Hz）和δ6.21（1H，d，J＝2.0Hz）分別為黃酮A環(huán)8位和6位質(zhì)子信號(hào)，δ7.70（1H，d，J＝2.2Hz），7.56（1H，dd，J＝8.5，2.2Hz），6.91（1H，d，J＝8.5Hz）呈明顯的 ABX自旋偶合系統(tǒng)，為B環(huán)2′，6′和5′質(zhì)子信號(hào).其1H－NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9]中槲皮素的數(shù)據(jù)基本一致，與槲皮素對(duì)照品共薄層，二者Rf值一致，故鑒定為化合物4為槲皮素.

化合物5：淡黃色粉末，mp187～190℃，分子式C27H30O16.1H（DMSO－d6，400MHz）：δ7.66（1H，s，H－2′），7.62（1H，d，J＝8.4Hz，H－6′），6.86（1H，d，J＝8.4Hz，H－5′），6.37（1H，s，H－8），6.19（1H，s， H－6）.13C－NMR （MDSO－d6，100 MHz）：δ156.3（C－2），133.2（C－3），177.2（C－4），161.1（C－5），100.6（C－6），156.5（C－7），100.6（C－8），156.5（C－9），103.8（C－10），121.5（C－1′），115.1（C－2′），148.3（C－3′），144.6（C－4′），116.1（C－5′），121.0（C－6′），103.8（glc，C－1），73.9（glc，C－2），76.3（glc，C－3），70.2（glc，C－4），75.8（glc，C－5），66.9（glc，C－6），98.5（Rha，C－1），69.8（Rha，C－2），70.4（Rha，C－3），71.7（Rha，C－4），68.1（Rha，C－5），17.6（Rha，C－6）.以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10]報(bào)道的蘆丁一致.將化合物與蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品作TLC對(duì)照，經(jīng)不同溶劑系統(tǒng)展開，其Rf值一致，故鑒定該化合物為蘆丁.

［1]徐 鑫，付宏征.吉祥草的化學(xué)成分研究［J].中國中藥雜志，2008，20（33）：2347－2350.

［2]邱德文，杜 江.中華本草·苗藥卷［M].貴陽：貴州科技出版社，2005：145－157.

［3]陳昌祥，周 俊.蜘蛛抱蛋根莖中的甾體皂苷［J].云南植物研究，1994.16（4）：397－400.

［4]張 元，杜 江，許建陽，等.吉祥草總皂苷溶血、止咳、化痰、抗炎作用的研究［J].武警醫(yī)學(xué)，2006，17（4）：282－284.

［5]王麗娟，王 巖，陳聲武，等.薯預(yù)皂苷元體內(nèi)外的腫瘤作用［J].中國中藥雜志，2002，27（10）：777－779.

［6]Shvets S A，Kintya P K，Gutsu O N.Steroid Glycosides of Nicotiana Tabacum Seeds I.The Structures of Nicotianosides A，B，and E ［J].Chem.Nat.Comp.1994，30（6）：684－688.

［7]Peng Xian，Tan Li，Yao Bing，et al.Studies on the Chemical Constituents from the Rhizoma of A Lism a Gram Ineum ［J].J Chin Pharma Sci，1999（3）：173－175.

［8]姚春所，許云龍.撥毒散中的蛻皮激素［J].云南植物研究，2000，22（4）：503－506.

［9]王藝純，張春玲，等.觀音草的化學(xué)成分研究［J].中國藥物化學(xué)雜志，2010，20（2）：119－124.

［10]張培成，徐綏緒.山楂葉化學(xué)成分研究［J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2001，36（10）：754－757.