microRNA和T細(xì)胞發(fā)育研究進(jìn)展

鐘國(guó)成，李小紅 綜述，朱 波校審

（第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍腫瘤研究所，重慶 400037）

隨著現(xiàn)代免疫學(xué)向分子水平的研究不斷深入，T淋巴細(xì)胞（T－lymphocyte，簡(jiǎn)稱T細(xì)胞）在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮的作用也越來(lái)越受到重視。T細(xì)胞是淋巴細(xì)胞的主要組分，在抗感染、抗腫瘤及自身免疫應(yīng)答中均發(fā)揮著關(guān)鍵作用。T細(xì)胞的發(fā)育成熟是一個(gè)反復(fù)篩選與淘汰的復(fù)雜過(guò)程，受到多種因素的精細(xì)調(diào)控。近年來(lái)，微RNA（microRNA，miRNA）的功能和作用正逐漸成為學(xué)者們關(guān)注的重點(diǎn)。借助對(duì)miRNA基因水平的研究，將有力地促進(jìn)闡明T細(xì)胞發(fā)育的調(diào)控機(jī)制［1］。本文就miRNA調(diào)控T細(xì)胞發(fā)育的相關(guān)研究進(jìn)展做一綜述，并探討miRNA對(duì)T細(xì)胞發(fā)育調(diào)控的特點(diǎn)和應(yīng)用前景。

1 T細(xì)胞發(fā)育概述

T細(xì)胞源于骨髓造血干細(xì)胞（hematopoietic stem cells，HSCs）。HSCs首先分化為多能祖細(xì)胞，然后經(jīng)淋巴途徑向淋巴祖細(xì)胞分化。淋巴祖細(xì)胞中T細(xì)胞祖細(xì)胞（Pro－T）經(jīng)血循環(huán)進(jìn)入胸腺發(fā)育成T細(xì)胞前體細(xì)胞（Pre－T），隨后發(fā)育成胸腺細(xì)胞。胸腺是T細(xì)胞主要的發(fā)育器官，摘除胸腺將導(dǎo)致嚴(yán)重的免疫缺陷。T細(xì)胞發(fā)育的胸腺依賴性提示胸腺為T細(xì)胞提供了適宜的微環(huán)境和發(fā)育信號(hào)［2］。

胸腺細(xì)胞始于CD4－CD8－雙陰性T細(xì)胞（double negative，DN），此時(shí)細(xì)胞表面已表達(dá)CD3和T細(xì)胞受體（T cell receptor，TCR），然后經(jīng)CD4＋CD8＋雙陽(yáng)性細(xì)胞（double positive，DP）發(fā)育為成熟的 CD4＋或 CD8＋單陽(yáng)性（single－positive，SP）細(xì)胞。發(fā)育過(guò)程中不能與自身主要組織細(xì)胞相容性復(fù)合體（major histocompatibility complex，MHC）結(jié)石的T細(xì)胞將被誘導(dǎo)凋亡，即陽(yáng)性選擇，它賦予T細(xì)胞MHC限制性（識(shí)別由自身MHC呈遞的抗原而不識(shí)別其他MHC呈遞的抗原）；而與自身MHC或自身抗原結(jié)合過(guò)強(qiáng)的T細(xì)胞也會(huì)被誘導(dǎo)凋亡，即陰性選擇，它賦予T細(xì)胞對(duì)自身抗原的耐受性［3］。胸腺每天能產(chǎn)生約1×107個(gè)胸腺細(xì)胞，最終僅有1%～3%的胸腺細(xì)胞能發(fā)育成SP細(xì)胞。

由此可見(jiàn)，T細(xì)胞發(fā)育是一個(gè)十分復(fù)雜的過(guò)程，需要一個(gè)龐大的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)參與，以確保成熟T細(xì)胞在數(shù)量上保持動(dòng)態(tài)平衡，同時(shí)正確執(zhí)行免疫功能，不會(huì)忽視抗原或是攻擊自身組織，維持適宜的免疫強(qiáng)度。miRNA是調(diào)控T細(xì)胞發(fā)育的一個(gè)重要因素，其調(diào)控作用已引起了研究者的濃厚興趣。

2 miRNA概述

miRNA是一組進(jìn)化保守的調(diào)控性小分子RNA，無(wú)編碼蛋白質(zhì)作用，能通過(guò)干擾靶向信使RNA（messenger RNA，mRNA）的穩(wěn)定或翻譯而調(diào)節(jié)基因表達(dá)。miRNA先由RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄成含帽子結(jié)構(gòu)和多聚腺苷酸尾巴的初始RNA（primiRNA）。pri－miRNA經(jīng)胞核內(nèi) RNA聚合酶Ⅲ（RNaseⅢ）Drosha在雙鏈RNA－結(jié)合蛋白DGCR8／Paha的作用下加工成長(zhǎng)約70核苷酸（nt）的pre－miRNA。轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Exportin5依賴Ran－GTP將pre－miRNA從細(xì)胞核轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)，RNaseⅢ酶Dicer將pre－miRNA剪切成約22nt的雙鏈miRNA。兩條鏈迅速解螺旋，其中一條很快降解，而另一條鏈作為成熟miRNA形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物（RNA－induced silencing complex，RISC）而發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。當(dāng)miRNA與靶向mRNA的3′UTR完全互補(bǔ)時(shí)，RISC中的Argonaute2會(huì)降解mRNA而起到調(diào)節(jié)作用；如果部分互補(bǔ)將通過(guò)抑制mRNA翻譯來(lái)發(fā)揮調(diào)節(jié)功能［4］。

近年來(lái)，通過(guò)基因芯片和深度測(cè)序技術(shù)對(duì)T細(xì)胞成熟過(guò)程中不同階段miRNA的鑒定表明:確實(shí)有部分miRNA在T細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中出現(xiàn)顯著的變化，這種特定miRNA豐度的動(dòng)態(tài)變化可以作為界定各個(gè)發(fā)育階段的特異性指標(biāo)。

3 miRNA對(duì)T細(xì)胞發(fā)育過(guò)程的調(diào)控

miRNA對(duì)T細(xì)胞發(fā)育的調(diào)控可大致分為胸腺內(nèi)調(diào)控和胸腺外調(diào)控，其中前者是主要調(diào)控場(chǎng)所，是調(diào)控的上游，決定T細(xì)胞發(fā)育的命運(yùn)。在胸腺內(nèi)，參與T細(xì)胞發(fā)育調(diào)控的miRNA構(gòu)成了一個(gè)復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，彼此調(diào)節(jié)與制約，與胸腺內(nèi)環(huán)境形成緊密聯(lián)系，在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間精確控制T細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程。miRNA在胸腺內(nèi)的調(diào)控將參與產(chǎn)生SP細(xì)胞的數(shù)目，T細(xì)胞的MHC限制性、自身抗原耐受性、對(duì)抗原的親和力、存活時(shí)間以及增殖和應(yīng)答潛能；而miRNA在胸腺外的調(diào)控相對(duì)于胸腺內(nèi)簡(jiǎn)單，影響因素較少，可視為對(duì)胸腺內(nèi)調(diào)控的補(bǔ)充或細(xì)化，主要參與調(diào)控外周T細(xì)胞的增殖、分化方向以及執(zhí)行免疫功能的強(qiáng)弱。

3.1 Dicer酶 Dicer酶是一種類似RNaseⅢ的生成關(guān)鍵酶，它對(duì)于小分子干擾RNA和miRNA的產(chǎn)生是不可或缺的，Dicer酶能將miRNA前體（發(fā)夾RNA）加工為成熟的miRNA。缺乏Dicer酶將導(dǎo)致miRNA銳減（包括miRNA－150、miRNA－21、miRNA－103、miRNA－29、miRNA－155等）。研究發(fā)現(xiàn) T 細(xì)胞特異性Dicer酶的缺乏會(huì)顯著減少T細(xì)胞數(shù)量，盡管CD4＋與CD8＋T細(xì)胞的比例變化不大；Muljo等［5］發(fā)現(xiàn)，在小鼠的胸腺組織中去掉Dicer酶，將導(dǎo)致外周血T細(xì)胞發(fā)育嚴(yán)重障礙，細(xì)胞內(nèi)miRNA加工缺陷，面對(duì)抗原的刺激難以正常增殖，而且會(huì)迅速凋亡。缺乏Dicer酶的Th細(xì)胞會(huì)偏向分泌IFN－γ，傾向Th1方向分化，這提示Dicer對(duì)于抑制Th1細(xì)胞的分化是必需的。Dicer酶能夠有效誘導(dǎo)Foxp3（forkhead box P3）轉(zhuǎn)錄因子的生成，對(duì)于胸腺中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cells，Treg）的發(fā)育具有重要作用。缺乏Dicer酶將因?yàn)闊o(wú)法正常產(chǎn)生Foxp3而抑制轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（transforming growth factor，TGF）－β介導(dǎo)的Treg的產(chǎn)生，喪失抑制性調(diào)控功能，促使Treg高表達(dá)效應(yīng)性T細(xì)胞的表面分子，最終誘發(fā)致死性的自身免疫［6］。在這個(gè)過(guò)程中，具體有哪些miRNA參與的機(jī)制還不清楚，但可以明確miRNA－155和miRNA－27b在其中發(fā)揮了主要作用。此外，缺乏Dicer酶還會(huì)導(dǎo)致Th17（一種不同于Th1、Th2和Treg的CD4＋亞群細(xì)胞，主要分泌IL－17，參與自身免疫性腦脊髓炎的發(fā)生）無(wú)法誘導(dǎo)產(chǎn)生［7］。

3.2 miRNA－17～92簇 miRNA－17～92簇由一組多順?lè)醋有詍iRNA組成，位于人類染色體13q31，包括 miRNA－17，miRNA－18a、miRNA－19a、miRNA－20a、miRNA－196－1和 miRNA－92這6個(gè)miRNA，在組織結(jié)構(gòu)中高度保守。miRNA－17～92已被證實(shí)在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮重要作用。在淋巴細(xì)胞系中，miRNA－17～92于前體T細(xì)胞高表達(dá)，成熟之后表達(dá)減少。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，miRNA－17～92轉(zhuǎn)基因小鼠外周幾乎所有的淋巴細(xì)胞亞群都有擴(kuò)增，其中以CD4＋T細(xì)胞增生最為顯著［8］。miRNA－17～92高表達(dá)轉(zhuǎn)基因小鼠的T細(xì)胞在體外的增殖和存活能力都明顯提高，敲除miRNA－17～92將導(dǎo)致嚴(yán)重的T細(xì)胞發(fā)育障礙和迅速凋亡。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA－17～92作用的靶點(diǎn)（負(fù)調(diào)控）可能是PTEN（一種腫瘤抑制基因）和Bim（促凋亡因子），在miRNA－17～92高表達(dá)的T細(xì)胞中Bim明顯下調(diào)，但是聯(lián)合PTEN和Bim還不足以完全模擬miRNA－17～92過(guò)表達(dá)的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停虼朔治鲈谡{(diào)控T細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中可能有其他不同的靶位參與［9］。另外，miRNA－17～92對(duì)CD8T細(xì)胞的具體調(diào)控機(jī)制目前尚不清楚。

3.3 miRNA－142和 miRNA－223 miRNA－142定位于17號(hào)染色體中一個(gè)和侵襲性B淋巴細(xì)胞白血病相關(guān)的位點(diǎn)。Ramkissoon等［10］研究發(fā)現(xiàn)，miRNA－142在胸腺、脾臟及骨髓中高表達(dá)，而在其他組織中表達(dá)很低，其調(diào)控作用似乎僅限于造血細(xì)胞。目前研究認(rèn)為，miRNA－142對(duì)T細(xì)胞發(fā)育的調(diào)控主要發(fā)生在SP階段向初始T細(xì)胞發(fā)育的過(guò)程中，而在其他階段未發(fā)現(xiàn)有調(diào)控作用。過(guò)量表達(dá)的miRNA－142能顯著改變T細(xì)胞的分化發(fā)育，促進(jìn)初始T細(xì)胞增殖30%～40%以上，而對(duì)B淋巴細(xì)胞則無(wú)明顯影響［11］。miRNA－223主要表達(dá)于骨髓，單核細(xì)胞、粒細(xì)胞，在T細(xì)胞中低表達(dá)，它主要參與調(diào)控粒細(xì)胞的發(fā)育，但過(guò)表達(dá)的miRNA－223也能促進(jìn)T細(xì)胞的發(fā)育和增殖［12］。

3.4 miRNA－181a miRNA－181a在調(diào)控B淋巴細(xì)胞方面發(fā)揮重要作用，同時(shí)也參與T細(xì)胞的發(fā)育。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA－181a在骨髓、胸腺以及富含T細(xì)胞的一級(jí)淋巴組織中高表達(dá)。如果造血干細(xì)胞和祖細(xì)胞中高表達(dá)miRNA－181a，將導(dǎo)致外周CD8＋T細(xì)胞的明顯下降。在小鼠移植模型中，高表達(dá)的miRNA－181a將導(dǎo)致外周T細(xì)胞減少50%以上，其中CD8＋T細(xì)胞減少88%，這提示miRNA－181a對(duì)T細(xì)胞發(fā)育發(fā)揮重要作用。

Neilson等［13］系統(tǒng)研究了 T 細(xì)胞在 DN1、DN2、DN3、DN4、DP、SP等不同發(fā)育階段miRNA－181a的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miRNA－181a在DN和DP階段表達(dá)量最高，而在之后其他階段逐漸下調(diào)。miRNA－181a在胸腺細(xì)胞DP階段的豐度，是成熟T細(xì)胞中的10倍以上。高表達(dá)的miRNA－181a能增強(qiáng)TCR的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，促進(jìn)DN，DP階段不成熟T細(xì)胞與胸腺M(fèi)HC分子結(jié)合，保證陽(yáng)性選擇和陰性選擇的順利完成。熒光素酶實(shí)驗(yàn)顯示，在DP階段，miRNA－181a能夠抑制一些淋巴細(xì)胞成熟過(guò)程中參與陽(yáng)性選擇的基因表達(dá)，比如bcl－2、CD69和TCR。Li等［14］發(fā)現(xiàn)，在成熟T細(xì)胞高表達(dá) miRNA－181a會(huì)提高TCR與抗原的親和力，如果抑制未成熟T細(xì)胞miRNA－181a的表達(dá)將降低T細(xì)胞對(duì)抗原肽的敏感性，并破壞T細(xì)胞陽(yáng)性選擇和陰性選擇，這與miRNA－181a在DN和DP高表達(dá)，而在T細(xì)胞成熟過(guò)程中下調(diào)一致。事實(shí)上，miRNA－181a對(duì)TCR與抗原的親和力具有重要的調(diào)節(jié)作用，它能調(diào)控多個(gè)靶標(biāo)，主要包括抑制TCR信號(hào)通路中在下游起負(fù)性調(diào)節(jié)作用中的酪氨酸蛋白磷酸酯酶（如SHP－2，PTPN22，DUSP5和DUSP6），通過(guò)磷酸化作用激活兩個(gè)TCR信號(hào)通路分子，即淋巴細(xì)胞特異性蛋白酪氨酸激酶（lymphocyte－specific tyrosine kinase，LCK）和細(xì)胞外信號(hào)調(diào)控激酶（extracellular signal regulated kinase，ERK）進(jìn)而增強(qiáng)TCR的信號(hào)強(qiáng)度。另一方面，TCR的信號(hào)通路能負(fù)反饋抑制miRNA－181a的表達(dá)，TCR與抗原結(jié)合后1h內(nèi)，miRNA－181a的表達(dá)會(huì)迅速下調(diào)。通過(guò)miRNA－181a對(duì)胸腺T細(xì)胞發(fā)育的這種精細(xì)調(diào)控機(jī)制，使成熟初始T細(xì)胞的TCR針對(duì)不同抗原具有適宜的親和力［15］。

3.5 miRNA－155 miRNA－155具有類似癌基因的特性，與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切，是目前人類淋巴瘤中發(fā)現(xiàn)的惟一獨(dú)立致癌miRNA，最初被命名為B細(xì)胞整合簇。Georgantas等［16］發(fā)現(xiàn)，miRNA－155在造血干細(xì)胞中有一定的表達(dá)，而成熟造血細(xì)胞的miRNA－155卻明顯下降，但在一些血液系統(tǒng)惡性腫瘤中高表達(dá)。研究證實(shí)，miRNA－155高表達(dá)能使T細(xì)胞在小鼠骨髓內(nèi)的增殖紊亂，而敲除miRNA－155的CD4＋T細(xì)胞雖然在增殖方面沒(méi)有明顯變化，但發(fā)育的T細(xì)胞識(shí)別抗原后無(wú)法分泌正常的IL－2和IFN－γ，而且容易發(fā)生凋亡，嚴(yán)重削弱Treg維持自身動(dòng)態(tài)平衡的能力和增殖潛能。FOXP3是Treg發(fā)育和功能所必需的轉(zhuǎn)錄因子，可以直接控制miRNA－155的表達(dá)。miRNA－155在Treg中的表達(dá)水平要高于其他T細(xì)胞亞群，一般認(rèn)為，miRNA－155對(duì)于維持Treg存活、分泌抑制性細(xì)胞因子是非常重要的，它通過(guò)作用靶點(diǎn)細(xì)胞因子信號(hào)抑制物1（suppressor of cytokine signalling 1，SOCS1。該通路能通過(guò)IL－2、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)尿激活因子5，STAT5信號(hào)傳導(dǎo)通路促進(jìn)細(xì)胞增殖）發(fā)揮作用［17－18］。

3.6 其他miRNA的調(diào)控作用 與miRNA－181a相似，miRNA－350在T細(xì)胞發(fā)育的DP階段高表達(dá)，而在之后的發(fā)育過(guò)程中急劇下降。miRNA－16在單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和CD8＋T、CD4＋T等多數(shù)細(xì)胞和組織中高表達(dá)，推測(cè)其在調(diào)控細(xì)胞周期上具有重要的作用。miRNA－150可能通過(guò)作用靶位轉(zhuǎn)錄因子c－Myb，而參與調(diào)控 T細(xì)胞發(fā)育。另外，miRNA－669c和miRNA－297在CD4＋T細(xì)胞階段特異性高表達(dá)；miRNA－15b、miRNA－150、miRNA－24和 miRNA－27在 CD8＋T 細(xì)胞特異性高表達(dá)［19］；而 miRNA－223和 miRNA－146在 Treg高表達(dá)［20］，考慮這些miRNA更多地參與T細(xì)胞分化的調(diào)控，其具體的作用機(jī)制尚需要進(jìn)一步探討。

4 miRNA在對(duì)T細(xì)胞發(fā)育調(diào)控的特點(diǎn)和應(yīng)用前景

miRNA對(duì)T細(xì)胞發(fā)育過(guò)程的調(diào)控機(jī)制非常復(fù)雜。每一種miRNA具有多個(gè)潛在的作用靶點(diǎn)（如miRNA－17～92可以達(dá)到上百種），在適宜的時(shí)間發(fā)揮不同的作用；同時(shí)miRNA還受到其他多種分子的調(diào)控和反饋，在完成某一階段的調(diào)控任務(wù)后會(huì)及時(shí)停止。T細(xì)胞的發(fā)育需要多種miRNA在不同時(shí)間共同作用，單一miRNA很難與T細(xì)胞發(fā)育的特定階段嚴(yán)格對(duì)應(yīng)，參與調(diào)控的miRNA之間并非獨(dú)立工作，而是互相影響，既可以發(fā)揮疊加作用，也可以彼此拮抗。正是由于這種多元化調(diào)控機(jī)制，才能實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞發(fā)育的精細(xì)與準(zhǔn)確，保證發(fā)育成熟的T細(xì)胞不會(huì)攻擊自身組織，而是正確識(shí)別感染和腫瘤抗原后予以消滅，并在清除抗原后及時(shí)控制免疫強(qiáng)度，避免免疫升級(jí)而傷害自身組織，最終保持整個(gè)免疫系統(tǒng)的穩(wěn)定和平衡。

T細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中獲得的MHC限制性與自身耐受、自身免疫疾病、過(guò)敏性疾病、免疫缺陷病以及腫瘤發(fā)生密切相關(guān)，深入研究miRNA對(duì)于T細(xì)胞發(fā)育的調(diào)控并進(jìn)行干預(yù)將為這些疾病的防治提供良好的應(yīng)用前景，如改變miRNA－181a的表達(dá)而調(diào)控TCR的親和力，將有助于加強(qiáng)T細(xì)胞對(duì)自身抗原的耐受，有利于自身免疫病的治療。當(dāng)前，針對(duì)miRNA的研究需要人們了解其確切的信號(hào)通路，找到特定miRNA具體作用的上下游靶分子，包括不同組織不同階段的多個(gè)靶位，各自的生物學(xué)功能并加以證實(shí)［21］。此外，鑒于miRNA網(wǎng)絡(luò)調(diào)控的特點(diǎn)，嘗試有效進(jìn)行多個(gè)miRNA基因操作，并建立進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的技術(shù)方法也是今后研究的重點(diǎn)。

5 展 望

目前，miRNA的研究還處于理論和基礎(chǔ)水平上，迄今所知miRNA對(duì)T細(xì)胞發(fā)育的調(diào)控很可能只是miRNA網(wǎng)絡(luò)中的滄海一粟，而miRNA在調(diào)控過(guò)程中的具體分子作用機(jī)制，也有待于進(jìn)一步探索［22］。這些miRNA的研究將是對(duì)T細(xì)胞發(fā)育調(diào)控理論的創(chuàng)新，也將為與T細(xì)胞發(fā)育有關(guān)的臨床疾病提供新的治療方向。

［1］Liston A，Linterman M，Lu LF.MicroRNA in the adaptive immune system，in sickness and in health［J］.J Clin Immunol，2010，30（3）:339－346.

［2］Koelsch U，Schraven B，Simeoni L，et al.SIT and TRIM determine T cell fate in the thymus［J］.J Immunol，2008，181（9）:5930－5939.

［3］Ashton－Rickardt PG.Studying T－cell repertoire selection using fetal thymus organ culture［J］.Methods Mol Biol，2007（380）:171－184.

［4］Anglicheau D，Muthukumar T，Suthanthiran M.MicroRNAs:small RNAs with big effects［J］.Transplantation，2010，90（2）:105－112.

［5］Muljo SA，Ansel KM，Kanellopoulou C，et al.Aberrant T cell differentiation in the absence of Dicer［J］.J Exp Med，2005，202（2）:261－269.

［6］Zhou X，Jeker LT，F(xiàn)ife BT，et al.Selective mRNA disruption in T reg cells leads to uncontrolled autoimmunity［J］.J Exp Med，2008，205（9）:1983－1991.

［7］Liston A，Lu LF，O′Carroll D，et al.Dicer－dependent microRNA pathway safeguards regulatory T cell function［J］.J Exp Med，2008，205（9）:1993－2004.

［8］Lu LF，Liston A.MicroRNA in the immune system，microRNA as an immune system［J］.Immunology，2009，127（3）:291－298.

［9］Lykken EA，Li QJ.microRNAs at the regulatory frontier:an investigation into how microRNAs impact the development and effector functions of CD4Tcells［J］.Immunol Res，2011，49（1／3）:87－96.

［10］Ramkissoon SH，Mainwaring LA，Ogasawara Y，et al.Hema－topoietic－specific microRNA expression in human cells［J］.Leuk Res，2006，30（5）:643－647.

［11］Shivdasani RA.MicroRNAs:regulators of gene expression and cell differentiation［J］.Blood，2006，108（12）:3646－3653.

［12］Merkerova M，Vasikova A，Belickova M，et al.MicroRNA expression profiles in umbilical cord blood cell lineages［J］.Stem Cells Dev，2010，19（1）:17－26.

［13］Neilson JR，Zheng GX，Burge CB，et al.Dynamic regulation of miRNA expression in ordered stages of cellular development［J］.Genes Dev，2007，21（5）:578－589.

［14］Li QJ，Chau J，Ebert PJ，et al.miR－181ais an intrinsic modulator of T cell sensitivity and selection［J］.Cell，2007，129（1）:147－161.

［15］Tsitsiou E，Lindsay MA.microRNAs and the immune response［J］.Curr Opin Pharmacol，2009，9（4）:514－520.

［16］Georgantas RW，Hildreth R，Morisot S，et al.CD34＋hematopoietic stem－progenitor cell microRNA expression and function:a circuit diagram of differentiation control［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2007，104（8）:2750－2755.

［17］Rodriguez A，Vigorito E，Clare S，et al.Requirement of bic／microRNA－155for normal immune function［J］.Science，2007，316（5824）:608－611.

［18］O′Connell RM，Kahn D，Gibson WS，et al.microRNA－155promotes autoimmune inflammation by enhancing inflammatory T cell development［J］.Immunity，2010，33（4）:607－619.

［19］Merkerova M，Belickova M，Bruchova H.Differential expression of microRNAs in hematopoietic cell lineages［J］.Eur J Haematol，2008，81（4）:304－310.

［20］Cobb BS，Hertweck A，Smith J，et al.A role for Dicer in immune regulation［J］.J Exp Med，2006，203（11）:2519－2527.

［21］Pauley KM，Chan EK.MicroRNAs and their emerging roles in immunology［J］.Ann N Y Acad Sci，2008，1143（1）:226－239.

［22］Baltimore D，Boldin MP，O′Connell RM，et al.MicroRNAs:new regulators of immune cell development and function［J］.Nat Immunol，2008，9（8）:839－845.