天然藥物的藥代動力學(xué)研究進展

李煥平 楊 夏

（內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院，包頭014010）

天然藥物的藥代動力學(xué)是研究中藥或天然藥物中的有效成分、組分，或研究單味藥、復(fù)方制劑在體內(nèi)吸收、分布、代謝、排泄研究的動態(tài)變化規(guī)律及特點。它可為藥物的初步篩選、劑型設(shè)計、質(zhì)量評估及給藥方案的制訂提供依據(jù)，可合理地指導(dǎo)臨床用藥。同時藥動學(xué)研究對復(fù)方的組方、藥物作用機制及藥物相互作用等也可提供基礎(chǔ)和依據(jù)[1]。藥物動力學(xué)研究成果已在新藥設(shè)計，優(yōu)選給藥方案，改進藥物劑量，為臨床提供高效、速效、長效、低毒、低副作用的藥物等方面發(fā)揮重要作用。

1 藥代動力學(xué)研究方法

1.1 血藥濃度法 是藥動學(xué)研究的經(jīng)典方法，模仿化藥的研究方法，主要適用于有效成分明確的中藥。血藥濃度法包括同位素標記法、分光光度法、色譜法等。色譜法包括 HPL C、GC、HPLC-MS、GC-MS、LC-MS、LC-ESI-MS等，是目前最常用的方法[2]。如王雪峰等[3]采用高效液相色譜法研究小柴胡湯中黃芩苷在大鼠體內(nèi)藥動學(xué)參數(shù)，結(jié)果證實灌胃給藥后，黃芩苷在大鼠體內(nèi)的代謝符合二室模型，并發(fā)現(xiàn)黃芩苷在心、肝中含量最高。英錫相等[4]研究山里紅葉提取物及單體牡荊素-2｀｀-O-鼠李糖苷大鼠灌胃給藥繪制平均藥時曲線，牡荊素-2｀｀-O-鼠李糖苷在大鼠血漿中藥一時曲線符合二室模型的一級吸收(w=1/c)。

石琛等[5]采用高效液相色譜法(HPLC法)測定β一細辛醚靜注正常家兔體內(nèi)后在4，7，10，13，16，20，30，40，60，90，120，180，240，300min各時點的血漿中的藥物濃度，β一細辛醚在正常腦模型大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)過程均屬一級動力學(xué)過程的三室開放模型，并具有相似的特征：吸收、分布快，消除迅速，極易透過血腦屏障，大腦是其重要的分布器官。李坷佳[6]建立了靛玉紅血藥濃度簡便可靠的HPLC測定方法。靛玉紅可經(jīng)消化道吸收入血，但吸收緩慢，分布于與消化系統(tǒng)有關(guān)的組織，即膽、肝、胃、腸，腎的吸收率也較高。主要經(jīng)肝臟代謝后，大部分降解或脫落成斷片。靛玉紅從消化道消除較慢，主要以糞便排泄，為靛玉紅藥動學(xué)研究提供了一種簡便可靠的分析方法。

1.2 生物效應(yīng)法

1.2.1 藥理效應(yīng)法 以藥物效應(yīng)為指標，而藥理效應(yīng)代表著原形藥及其具有相同藥理活性的代謝產(chǎn)物所產(chǎn)生的藥物作用以及多種成分相互作用的綜合結(jié)果[7]。其基本原理和方法是假定藥物在體內(nèi)呈線行配置，藥物在作用部位的藥量Q(t)與藥物效應(yīng)強度(E)存在函數(shù)關(guān)系 Q(t)=f［E(t)］，而Q(t)又與給藥劑量（D）成正比[8]。

肇麗梅[9]等采用小鼠熱板致痛模型劑，以鎮(zhèn)痛效應(yīng)為指標，測定黃芩苷及清熱合劑的藥物動力學(xué)參數(shù)。結(jié)果黃芩苷及清熱合劑口服給藥后體存藥量的表觀動力學(xué)過程符合一室開放模型，中藥復(fù)方清熱合劑的達峰時間明顯慢于單方黃芩苷。

1.2.2 藥物累積法 是將藥代動力學(xué)多點動態(tài)測定的原理與動物急性死亡率測定藥物蓄積性的方法相結(jié)合，求出不同時間體存百分率動態(tài)變化，以此計算藥動學(xué)參數(shù)。如李艷華等[10]采用藥物累積法對復(fù)方中藥在昆明系小鼠體內(nèi)的吸收、分布、消除的情況進行研究。本試驗對體存量-時間、數(shù)體存量-時間分別進行MCPKP擬合分析，其房室模型均符合一級吸收一室開放性模型。該藥腹腔注射后，在昆明系小鼠體內(nèi)代謝具有吸收快、消除慢的特點。

采用此法分別測定了九分散和疏風(fēng)定痛丸腹腔注射和口服后不同時間內(nèi)的體存率，并同時進行了兔體內(nèi)九分散濃度測定研究。結(jié)果表明兔體內(nèi)血藥濃度達峰時間在1.5～2.5E，達峰迅速，達峰后血藥濃度下降也迅速。故認為對一些毒劇藥，藥理作用迅速而明確時，用口服給藥進行體存率測定同樣可以取得滿意結(jié)果。疏風(fēng)定痛丸以蜂蜜作賦形劑，蜂蜜粘度大，可延緩藥物的吸收從而降低藥物的毒副作用[11]。

1.3 微生物法 其原理主要是含有試驗菌株的瓊脂平板中抗菌藥擴散產(chǎn)生的抑菌圈直徑大小與抗菌藥濃度的對數(shù)呈線性關(guān)系。具有抗菌活性的中藥復(fù)方制劑，如黃連解毒湯、清瘟敗毒飲、大黃牡丹皮湯劑等，可以利用微生物法測定體液樣品的濃度，然后擬合模型計算藥代動力學(xué)參數(shù)[12]。潘嘉等[13]采用抑菌效應(yīng)法測定川芎揮發(fā)油藥代動力學(xué)參數(shù)：

Ke=0.164h-1，Ka=1.1617h-1，T1/2(Ka)=0.60h，t1/2(Ke)=4.14，T(peak)=2.68h，C(max)=587.4534μg/ml，ACU=4861.68720(μg/ml)·h，結(jié)果表明:川芎揮發(fā)油的藥動學(xué)過程符合一室開放模型。

1.4 胃腸藥動學(xué) 即通過對代表方劑的有效成分在胃腸道內(nèi)溶出、分解、代謝和吸收的觀察，揭示其有效成分之間相互作用的規(guī)律，闡明其有效成分在胃腸內(nèi)的藥動學(xué)變化與藥效的相互關(guān)系，從而確定中藥胃腸藥動學(xué)內(nèi)涵，建立規(guī)范化技術(shù)方法和應(yīng)用領(lǐng)域[14]。彭拓華等[15]用薄層掃描法對灌胃給予九分散的小鼠用藥后不同時間的胃腸中士的寧的殘留量進行了測定。結(jié)果表明，士的寧在小鼠體內(nèi)的胃腸吸收符合一室藥動學(xué)模型，并求出了該制劑的主要動力學(xué)參數(shù)，此方法也揭示了用以研究其他以劇毒藥為主成分的方劑吸收變化規(guī)律。

1.5 “復(fù)方效應(yīng)成分動力學(xué)”假說 該假說認為，為了確定能代表母方的效應(yīng)成分，必須對中藥復(fù)方在體內(nèi)的化學(xué)成分進行定性定量，同時結(jié)合藥效學(xué)實驗，進行量-效關(guān)系研究。通過對于母方效應(yīng)相關(guān)的成分進行定性定量，是有可能揭示母方在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過程的[16]。如有學(xué)者研究犬靜脈注射復(fù)方川芎湯后血清中川芎嗪的藥動學(xué)規(guī)律及其藥效學(xué)的關(guān)系，復(fù)方川芎湯為九味中藥組成的大復(fù)方，而且是心房內(nèi)注射，研究者采用高效液相色譜法成功測定了血清中川芎嗪的濃度-時間曲線，呈現(xiàn)雙峰現(xiàn)象[17]，同時結(jié)合藥效學(xué)研究，發(fā)現(xiàn)此雙峰與母方的效應(yīng)密切有關(guān)，而川芎注射液靜脈注射后未出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象，說明配伍中其他成分影響了川芎嗪在體內(nèi)的處置。

1.6 血清藥理學(xué) 是指在動物經(jīng)口給藥后一定時間采血，分離血清，用含此藥物成分的血清進行體外實驗。血清藥理實驗方法具有體外實驗條件可控性強、藥物效應(yīng)易于檢測、可深入揭示藥物作用機理等優(yōu)點，并能反映中藥在胃腸道消化吸收、產(chǎn)生藥理效應(yīng)的過程。自80年代末日本學(xué)者提出“血清藥理學(xué)”概念以來，國內(nèi)學(xué)者對這一新方法進行了深入探討、研究。王寧生等[18]以LC/MS聯(lián)用檢測技術(shù)及與標準品對照的方法，分離檢測健康志愿者口服丹參滴丸后血清中與丹參相關(guān)的一些水溶性成分及代謝產(chǎn)物。結(jié)果血清中未檢測到原兒茶酸，但測得有香草酸，這可能與原兒茶酸在體內(nèi)較快代謝（甲基化）成為香草酸有關(guān)。本研究只是從一級質(zhì)譜的分子離子峰及根據(jù)藥物在體內(nèi)代謝一般規(guī)律推測丹參素及原兒茶醛體內(nèi)產(chǎn)生的結(jié)合物。這些活性成分在體內(nèi)的代謝變化，僅用一級質(zhì)譜檢定分析是不夠的，應(yīng)進一步用多級質(zhì)譜（MSn）加以檢測和確認。

給藥劑量普遍認為是血清藥理學(xué)的重點和難點，王力倩等[19]提出以給藥劑量等于臨床用量乘以動物等體表面積系數(shù)、再乘以培養(yǎng)基內(nèi)血清稀釋度的公式計算制備含藥血清的給藥劑量較為合理。

1.7 “辨證藥動學(xué)”假說[20]其目的就是探討中醫(yī)“證”的生理病理狀態(tài)對藥物動力學(xué)的作用規(guī)律。對同一藥物的不同證的藥動學(xué)參數(shù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，參數(shù)的差別明顯影響藥物療效和毒副作用。以“證治藥動學(xué)”思想為指導(dǎo)，研究中藥及復(fù)方的體內(nèi)藥動學(xué)研究是當今探討體內(nèi)過程和闡明藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機制的前沿?zé)狳c領(lǐng)城，也為深層診釋中醫(yī)藥科學(xué)內(nèi)涵、中醫(yī)藥理論的現(xiàn)代創(chuàng)新以及中藥制藥產(chǎn)業(yè)樁的現(xiàn)代化提供了有效的途徑。

2 研究方法的評價

目前天然藥物藥動學(xué)研究中的生物效應(yīng)法和藥物濃度法均存在著缺陷，難以滿足天然藥物現(xiàn)代化研究的需要。且由于天然藥物復(fù)方藥代動力學(xué)的研究所存在的問題，使得對復(fù)方多組分在體內(nèi)的動態(tài)變化及規(guī)律、多組分之間相互作用特點的認識更少。也正是由于天然藥物復(fù)方藥代動力學(xué)研究方法學(xué)上的困難，不僅難以較全面地指導(dǎo)臨床合理用藥，而且還使得開展方劑整方生物利用度的評價存在難度，不能提示藥物制備工藝中存在的問題，阻礙了中藥新藥的研制和與國際接軌[21]。

3 展望

天然藥物的藥代動力學(xué)的研究尚處于探索階段，在藥學(xué)領(lǐng)域中占有著越來越重要的地位，其基本分析方法已經(jīng)滲透到生物藥劑學(xué)、臨床藥理學(xué)、藥理學(xué)及毒理學(xué)等多種科學(xué)領(lǐng)域中，并推動著這些學(xué)科的蓬勃發(fā)展[22]。通過多學(xué)科的共同努力，在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，對中藥復(fù)方藥動學(xué)開展系統(tǒng)研究，以期實現(xiàn)復(fù)方動力學(xué)研究方法學(xué)上的突破，建立合理的復(fù)方整方藥代動力學(xué)分析方法，對推動中藥藥動學(xué)的發(fā)展，促進中藥現(xiàn)代化和中藥走向世界具有極為重要的意義。同時，藥物動力學(xué)的發(fā)展對新藥設(shè)計，改進藥物劑型，提供高效、速效、長效、低毒副作用的制劑，特別是對于臨床指導(dǎo)合理用藥，具有重大的現(xiàn)實意義。

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