從豬繁殖與呼吸綜合征病毒的起源與進(jìn)化談豬繁殖與呼吸綜合征的防制

劉永宏，趙 麗，劉俊峰，王鳳龍，劉月煥

（1.塔里木大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院 新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 阿拉爾843300；2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特010018；3.北京市農(nóng)林科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，北京 海淀100097）

1 豬繁殖與呼吸綜合征概述

豬繁殖與呼吸綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起豬的一種高度接觸性傳染病，不同年齡、品種和性別的豬均可感染，以母豬流產(chǎn)、死胎、弱胎、木乃伊胎，以及仔豬的呼吸困難、敗血癥、高死亡率等為主要特征，常伴有混合感染和繼發(fā)感染。PRRS嚴(yán)重威脅著全球養(yǎng)豬業(yè)，給經(jīng)濟(jì)帶來巨大的損失。PRRSV是單股正鏈RNA病毒，屬尼多病毒目（Nidovirales），動脈炎病毒科（Artertivirus），動脈炎病毒屬，與其同屬的病毒有馬動脈炎病毒（equine arteritis virus，EAV），小鼠乳酸脫氫酶病毒（lactate dehydrogenase elevating virus，LDV）和猴出血熱病毒（simianhemorrhagic fever virus，SHFV）等［1］。PRRSV 基因組全長約15kb，至少編碼9個相互重疊的開放閱讀框架（open reading frame，ORF），即 ORF1a、ORF1b、ORF2a、ORF2b、ORF3、ORF4、ORF5、ORF6 和ORF7［2］，根據(jù)抗原性差異分為歐洲型（Ⅰ型）和北美洲型（Ⅱ型），其原型株分別為LV株和 VR－2332［2］。

2 豬繁殖與呼吸綜合征病毒的起源

近60年的動物病毒病，一般為病毒跨物種感染新宿主或預(yù)成病毒經(jīng)中間宿主變?yōu)榭筛腥酒渌麆游锖腿说牟《径纬桑?］。目前，普遍認(rèn)為PRRSV是LDV變異種經(jīng)中間宿主野豬獲得感染家豬的能力［3］。19世紀(jì)，LDV使得在野外破舊房內(nèi)的老鼠感染后發(fā)生突變，通過撕咬及傷口將LDV突變體傳給野豬產(chǎn)生了適應(yīng)野豬的突變體，即PRRSV前身病毒。1912年，野豬感染PRRSV后，在不同地域獨(dú)立進(jìn)化了70年，各自選擇了優(yōu)勢突變體，適應(yīng)了宿主和環(huán)境，飛速發(fā)展為兩個地理進(jìn)化支，即兩個不同的基因型［3］。恰逢當(dāng)時野豬遍及歐洲、北非和亞洲，以及1912年開始的野豬引種，動物園的野豬逃跑或野豬圈養(yǎng)，家豬逃出農(nóng)場或自由散養(yǎng)，使家豬和野豬具備發(fā)生雜交的環(huán)境和條件，為PRRSV在野豬和家豬之間傳播提供了充足的條件。其后，PRRSV進(jìn)一步在家豬中進(jìn)化，傳播到了世界多個國家。1986～1987年在美國和加拿大被證實(shí)，2～3年后在歐洲多個國家迅速發(fā)現(xiàn)，2007年瑞典首次發(fā)生PRRS［4］。目前，世上僅有瑞士、新西蘭、澳大利亞等［4］少數(shù)國家沒有報道該病的發(fā)生與流行。

3 豬繁殖與呼吸綜合征在中國的發(fā)生與流行

1991年，臺灣［5］首先報道發(fā)生 PRRS；1996年郭寶清等［6］分離到PRRSV CH－1a株，首次證實(shí)該病在我國大陸存在。此后，在國內(nèi)，各省市自治區(qū)，均有報道該病的發(fā)生與流行。2006年，我國暴發(fā)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征（highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome，HP－PRRS）［8］，代表株為JXA1株。HP－PRRS的發(fā)生與流行特征不同以往，由典型性轉(zhuǎn)變?yōu)榉堑湫托浴Ｔ摬〕蕪?fù)發(fā)性，污染區(qū)很難清除干凈，HP－PRRS在首次發(fā)病后數(shù)月再次流行，并傳到越南等周邊國家［4］。

4 豬繁殖與呼吸綜合征病毒進(jìn)化與變異分析

PRRSV與所有的RNA病毒一樣，具有高度的變異性，這種變異性不僅表現(xiàn)于兩個基因型之間，而且表現(xiàn)于同一基因型的不同分離株之間［4］。變異原因之一為PRRSV自身經(jīng)歷了高頻病毒重組［7］。北美洲型ZJJ07株ORF5是NH04株和SY0608株的重組體，415～431位為17nt的重疊區(qū)［8］；另外一個重組體93－15416株重疊區(qū)在核苷酸284～314位，重組可能隨機(jī)的發(fā)生在任何區(qū)域。變異原因之二為RNA病毒每個位置復(fù)制時核苷酸置換的錯配率為10－3～10－5［8］，HP－PRRSV的高變異也不是一次性突然的發(fā)生［9］，隨時間經(jīng)歷了一定的過程，HPPRRSV高毒力是多個突變位點(diǎn)累積效應(yīng)所致。如從VR－2332L39到JXA1I39發(fā)生了兩次突變，中間經(jīng)CH－1aF39，可能中國的祖先株CH－1a充當(dāng)北美洲型亞群Ⅰ和亞群Ⅱ的過度角色［9］；另外，HPPRRSV相對VR－2332在GP5蛋白和M蛋白增加了一個糖基化位點(diǎn)，這早在CH－1a株就已出現(xiàn)。更有說服力的是，早在2002年分離于上海的SH02株ORF5和JXA1ORF5同源性高達(dá)98.8%［8－9］；HPPRRSV NSP2連續(xù)缺失的29個Aa早在2005年的WJ－05和 HZ－05株已出現(xiàn)［9］。HP－PRRSV NSP2不連續(xù)缺失30個 Aa［4，7］，該區(qū)域是容易發(fā)生突變的，該區(qū)域的變異曾發(fā)生在多個毒株。迄今為止最短的2個有毒力的北美洲型毒株（MN184A、B）NSP2與VR－2332相比發(fā)現(xiàn)3個不連續(xù)的缺失區(qū)（111個 Aa、1個 Aa和19個 Aa）［10］；PRRSV 分離株HB2（sh）／2002是1個天然存在缺失的變異毒株，其NSP2存在12個氨基酸的連續(xù)缺失［11］；北美型SP株NSP2相對于VR－2332插入36個Aa；LV株在NSP2區(qū)域相對于VR－2332缺失17個Aa。編碼結(jié)構(gòu)蛋白區(qū)域，PRRSV歐洲型和北美洲型毒株相比ORF6最保守，ORF5和ORF3最易發(fā)生變異［4］，往往這些變異最大的區(qū)域?qū)膊〉脑\斷、預(yù)防和控制是至關(guān)重要的。

其次，弱毒活疫苗的商業(yè)價值，以及防控特點(diǎn)使其大量的使用，人工致弱的疫苗株是野外強(qiáng)毒株在適合的細(xì)胞系連續(xù)傳80代以上獲得的，當(dāng)疫苗株用于豬群在豬體內(nèi)多次傳代后，由于選擇壓力和生存環(huán)境改變的情況下，某些位點(diǎn)還會發(fā)生回復(fù)突變，導(dǎo)致疫苗株毒力返強(qiáng)［4］。因此，弱毒活疫苗的使用應(yīng)謹(jǐn)慎，也是PRRSV毒株復(fù)雜性的原因之一。1996年丹麥暴發(fā)的PRRS，被報告和使用弱毒活疫苗有關(guān)系［4］。在防控過程中有免疫原性的弱毒疫苗株若來自自然界，而不是人工致弱，可能會提高防控效力和安全性。另外，有報道疫苗株可通過免疫母豬感染非免疫母豬，從免疫豬群傳播給非免疫豬群，從而發(fā)生疫苗介導(dǎo)的繁殖失?。?2］。

PRRSV還具有持續(xù)感染和抗體依賴增強(qiáng)作用，它表現(xiàn)為機(jī)體低抗體滴度時，不僅不能保護(hù)豬群，還可使病毒的復(fù)制增強(qiáng)。表現(xiàn)為通過母源抗體獲得被動免疫的仔豬，一旦母源抗體水平下降至保護(hù)水平以下會增加仔豬的易感性；還會給疫苗的使用帶來麻煩，因?yàn)槿醵疽呙缯T導(dǎo)的抗體可能會增強(qiáng)野毒株在豬體內(nèi)的復(fù)制，而野毒株產(chǎn)生的抗體也可能會增強(qiáng)疫苗毒的復(fù)制［4］。

5 豬繁殖與呼吸綜合征的預(yù)防和控制

根據(jù)PRRSV起源和進(jìn)化分析PRRSV的發(fā)展是非常迅速的，遺傳進(jìn)化顯示一個高毒力毒株的出現(xiàn)需要一定時間過程和環(huán)境條件，應(yīng)針對PRRSV以上特點(diǎn)通過分子生物學(xué)技術(shù)監(jiān)測毒株的變化，對檢測抗原或抗體的選擇，以及毒株發(fā)展趨向做預(yù)測和針對性措施。目前，PRRS沒有特效療法，沒有哪個發(fā)生PRRS的國家成功的消滅PRRSV［12］。針對PRRS的預(yù)防和控制大體思路為養(yǎng)重于防，防重于滅；一旦發(fā)生，全部或部分淘汰，控制豬只暴露和跟蹤監(jiān)控［12］。

5.1 PRRS平時預(yù)防措施 （1）堅持自繁自養(yǎng)，禁止到疫區(qū)購豬，做好檢疫工作；引種前60～90d對血清反應(yīng)陰性的后備母豬進(jìn)行疫苗接種；利用陰性哨兵豬監(jiān)測豬群PRRSV污染情況；采用多點(diǎn)式生產(chǎn)系統(tǒng)，將易感后代與繁育群分開飼養(yǎng)。（2）堅持定期針對性消毒，滅鼠，殺蟲，切斷傳播途徑。（3）提高機(jī)體抵抗力和免疫力，降低易感性，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少誘因。（4）若發(fā)現(xiàn)疑似病例或疫情，應(yīng)立即上報相關(guān)部門確診。（5）定期檢疫，非免疫豬群抗體陽性則該感染豬隔離處理，免疫群監(jiān)測抗體水平的同時，要對野毒株進(jìn)行監(jiān)測排除，同時監(jiān)測所用試劑要根據(jù)當(dāng)?shù)囟局甓ǎ悦饨徊嫘圆粡?qiáng)而出現(xiàn)假陰性。（6）地域性控制首先做好特定小區(qū)域控制，小區(qū)域控制首先要抓好后備母豬PRRS的控制是必要的，以及育種群的控制，保證斷奶陰性豬才是控制程序的最初目標(biāo)。（7）疫苗免疫以及與其他豬病疫苗的免疫程序按照國家有關(guān)部門規(guī)定執(zhí)行，考慮疫苗之間的相互影響；同時陰性場最好避用弱毒活苗而用滅活苗；做好免疫后抗體水平的監(jiān)測，以免為下次感染提供便利。（8）做好季節(jié)性和地區(qū)性防御，中國以北美洲型為主，監(jiān)測邊境地區(qū)俄羅斯流行的歐洲型毒株。（9）污染場延長斷奶時間，斷奶時體重達(dá)標(biāo)。（10）豬場周圍做好野生動物的控制，野豬也是PRRSV的天然敏感宿主，目前認(rèn)為鴨也能感染PRRSV。（11）宣傳PRRS暴發(fā)的危害，飼養(yǎng)泔水豬的危險性，培養(yǎng)公眾意識。

5.2 PRRS發(fā)生時緊急預(yù)防措施 （1）及時發(fā)現(xiàn)，迅速診斷，盡早查明受感染及可能受感染豬場，上報疫情。（2）受感染及可能受感染豬場迅速隔離，環(huán)境隨時消毒，立即停止豬只流動，并由當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)部門嚴(yán)格按照規(guī)定作妥善處理；一般，受感染豬群較小且與其他豬群隔離較好，高密度飼養(yǎng)區(qū)域的第一宗病例或半徑1km范圍內(nèi)有多個易感豬群，堅決采取撲殺；沒有必要撲殺豬場內(nèi)的其他動物。（3）限制感染場供應(yīng)的豬肉及加工成的熟食產(chǎn)品，合理處理病豬及尸體，掩埋或煉油無害化處理。（4）通過采取撲滅或改良型撲滅措施對繁育豬場和待宰豬場進(jìn)行有條件淘汰。（5）迅速劃定有效管轄控制地區(qū)，防止帶毒豬或潛在帶毒豬的運(yùn)輸。（6）劃分受感染場所（IPs）、危險接觸場所（DCPs）和可疑生產(chǎn)場所（SP），他們之間或與易感陰性場之間的流動應(yīng)嚴(yán)格控制，包括多點(diǎn)式生產(chǎn)不同生產(chǎn)點(diǎn)之間的流動，以及胴體的流動；同時劃定禁止區(qū)（RA）和控制區(qū)（CA），以便執(zhí) 行撲滅措施。（7）緊急免疫，藥物預(yù)防。（8）終末消毒，采取嚴(yán)格凈化措施，做好豬肉及其他副產(chǎn)品的處理。（9）做好對感染場和疑似場的回顧性和超前性追蹤措施，以便找出潛在受威脅場。（10）監(jiān)測經(jīng)追蹤尚未確定的所有受威脅場。

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