口蹄疫病毒3ABC抗體檢測結(jié)果分析

侯生庫

（青海省果洛州瑪沁縣獸醫(yī)站，青海 瑪沁814000）

口蹄疫（FMD）是一種高度接觸性傳染病，對國際貿(mào)易具有深遠的影響，世界動物衛(wèi)生組織（OIE）和聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）將口蹄疫列為A類烈性傳染病之首?？刂坪拖麥鏔MD策略包括疫苗免疫和屠宰可疑畜群?？梢尚笕壕褪潜籉MDV感染動物和帶毒動物。只有將感染動物和隱性帶毒動物與疫苗免疫動物加以區(qū)分才能為FMD的控制和消滅提供科學的依據(jù)。3ABC－I－ELISA方法不但可以檢測隱性感染動物而且可以區(qū)分感染動物和免疫動物。

1 材料與方法

1.1 待檢血清 血清來源地多年用口蹄疫O型、亞洲Ⅰ型二價滅活疫苗春秋兩季注射成年牦牛。秋季注苗后21d采血高倍離心后提取血清，達日46份，久治30份。

1.2 檢測試劑 口蹄疫O型正向血凝抗原，批號：100408，來源于中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所。檢測牛血清專用的口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體檢測ELISA試劑盒，由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所國家口蹄疫參考實驗室研制，中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號：2010012208。

1.3 檢測方法 按照青海省動物疫病實驗室檢測技術(shù)培訓班教材中的O型口蹄疫正向間接血凝試驗中的操作進行。按檢測牛血清專用的口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體檢測ELISA試劑盒使用說明書進行。

2 檢測結(jié)果

2.1 正向間接血凝試驗 在對照孔合格的前提下，待檢血清免疫抗體效價達到1∶32呈現(xiàn)“＋＋”凝集判定為免疫合格，血清合格率為100%。

2.2 3ABC抗體檢測ELISA試驗 通過試驗得到標準陰性血清OD值為0.488，標準陽性血清OD值為0.053 5。按照判定標準公式：樣品OD值＜0.2（陽性OD值－陰性OD值）＋陰性OD值（即0.140 3）為陰性；樣品OD值＞0.3（陽性OD值－陰性OD值）＋陰性OD值（即0.183 85）為陽性；它們之間為可疑。對76份為被檢血清OD值進行了比對。結(jié)果共檢出陽性血清4份，可疑血清14份，陰性血清58份。

3 結(jié)果分析

用兩種試驗檢測免疫牛血清76份，正向間接血凝試驗血清免疫合格率100%，說明被檢血清來源的牛能夠抵御FMDV的侵襲，不再是帶毒動物。3ABC抗體檢測ELISA試驗檢出陽性血清4份，陽性率5.2%，可疑血清14份，說明有4份血清來源的牛已經(jīng)感染了FMDV或曾經(jīng)感染過FMDV并產(chǎn)生了抗體；其他陰性血清來源的牛已被進行了疫苗預防，得到了合格的免疫抗體。

4 討論及建議

對正向間接血凝試驗陽性率為100%，血清通過口蹄疫病毒非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測試驗，出現(xiàn)陽性血清4份，其原因：一是注射疫苗后感染了FMDV；二是長期注射疫苗且劑量過大，疫苗中殘留的非結(jié)構(gòu)蛋白抗體有所顯現(xiàn)；三是血清來源于感染FMDV后已消滅了病毒的動物；四是動物正處于隱性感染期。建議加強本地區(qū)檢疫防疫工作，排查FMDV的帶毒動物，嚴防對傳染源留有死角。另一方面改進血清學試驗，使其能夠可靠地確定動物是否已感染了FMD病毒，不管它們是否注射過疫苗。最好還應當能把感染后已經(jīng)消滅了病毒的動物與形成持續(xù)性感染的動物區(qū)分開。