pH值對(duì)二苯碳酰二肼分光光度法測(cè)定六價(jià)鉻的影響

王海云，李敏銳，廖 濤，譚飛帆，鄧 杰

（三峽大學(xué)水利與環(huán)境學(xué)院，湖北宜昌 443002）

pH值對(duì)二苯碳酰二肼分光光度法測(cè)定六價(jià)鉻的影響

王海云，李敏銳，廖 濤，譚飛帆，鄧 杰

（三峽大學(xué)水利與環(huán)境學(xué)院，湖北宜昌 443002）

為獲得不同pH值對(duì)測(cè)定六價(jià)鉻（Cr（Ⅵ））的影響，以標(biāo)準(zhǔn)分析方法二苯碳酰二肼（C13H14N4O）分光光度法為基礎(chǔ)，選用2種體積濃度的水樣，分別加入不同的酸量，測(cè)定吸光度。經(jīng)EXCEL軟件對(duì)實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)分析，得出加酸量與吸光度具有緊密的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)吸光度隨著溶液pH值的減小而減小，酸度偏大，測(cè)定的實(shí)際結(jié)果比真實(shí)值小，pH值的不同對(duì)Cr（Ⅵ）測(cè)定結(jié)果具有影響。采用灰色系統(tǒng)模型GM（1，1）對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，推導(dǎo)出不同酸度下的吸光度直線方程式。經(jīng)t檢驗(yàn)和F檢驗(yàn)證明，計(jì)算出的吸光度值與測(cè)定值不存在顯著性差異，可幫助定量掌握不同酸度條件下對(duì)測(cè)定Cr（Ⅵ）產(chǎn)生影響具有一定的作用。

pH值；C13H14N4O光度法；測(cè)定Cr（Ⅵ）

Cr（Ⅵ）廣泛存在于化工生產(chǎn)過程之中，特別是工業(yè)廢水的排放，造成了嚴(yán)重的Cr（Ⅵ）污染。Cr（Ⅵ）化合物是有毒致癌物質(zhì)［1－2］，國際癌癥研究署（IARC）已將Cr（Ⅵ）分在第一組（致癌物質(zhì)）［3］。因此，Cr（Ⅵ）的監(jiān)測(cè)受到特別關(guān)注［4－7］。

二苯碳酰二肼分光光度法（GB7466—87）測(cè)定Cr（Ⅵ），是在酸性溶液中，利用二苯碳酰二肼作顯色劑與水樣中的Cr（Ⅵ）反應(yīng)生成紫紅色化合物來測(cè)定其含量，具有選擇性強(qiáng)和靈敏度強(qiáng)的特點(diǎn)，受到廣泛的運(yùn)用［8－9］。

但在實(shí)驗(yàn)操作過程中，六價(jià)鉻和碳酰二肼反應(yīng)顯色，要求水樣調(diào)至中性，控制在0.05～0.3 mol／LH SO），由于顯色時(shí)的操作、軟硬件條件等項(xiàng)原24因，難以控制在0.2 mol／L溫度15℃最佳狀態(tài)，造成酸度變化對(duì)Cr（Ⅵ）測(cè)定值的影響。為此，本文針對(duì)不同pH值溶液對(duì)六價(jià)鉻的測(cè)定結(jié)果造成何種影響進(jìn)行探討，分析其影響結(jié)果［10－11］。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀 器

DDSJ－308A型電導(dǎo)率儀，測(cè)量范圍0～1.999× 105μs／cm；SJ－4A型pH計(jì)，測(cè)量范圍pH 0.000～14.000，體積－1 999.9～1 999.9 mV；721型分光光度計(jì)。

1.2 試劑和標(biāo)準(zhǔn)溶液

鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱取于120℃干燥2h的重鉻酸鉀（K2Cr2O7，分析純）0.282 9 g，用水溶解后，移入1 000 mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。每毫升溶液含0.100 mg Cr（Ⅵ）。

鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（Ⅰ）：吸取5.00 mL鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置于500 mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。每毫升溶液含1.00μg Cr（Ⅵ）。

鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（Ⅱ）：吸取25.00 mL鉻標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，置于500 mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻。每毫升溶液含5.00μg Cr（Ⅵ）。

顯色劑：稱取C13H14N4O，0.2 g，溶于50 mL乙醇中，用水稀釋至100 mL。貯于棕色瓶置冰箱中保存。

硫酸溶液：配制（1＋9）的硫酸（ρ＝1.84 g／mL）400 mL。

實(shí)驗(yàn)用水：量取100 mL水樣，pH值為6.8。取400 mL水樣于錐形瓶中，電導(dǎo)率為0.457 ms／m。

水樣（1）：吸取20.00 mL鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（Ⅰ），置于200 mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻，每毫升溶液含5.00μg Cr（Ⅵ）。

水樣（2）：吸取10.00 mL鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液（Ⅱ），置于500 mL容量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻，每毫升溶液含1.00μg Cr（Ⅵ）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

通過向水樣中加入不同濃度的硫酸溶液，使用分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度，由吸光度的結(jié)果分析pH值對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法中測(cè)定清潔地表水時(shí)加入了2.5 mL顯色劑（在100 mL二苯碳酰二肼乙醇溶液中加入了400 mL（1＋9）硫酸配置而成），顯色劑與硫酸的比例是1∶4，即加入0.5 mL顯色劑和2.0 mL硫酸。按照公式（1）計(jì)算出加入2.0 mL硫酸對(duì)應(yīng)的酸度顯色為最佳狀態(tài)，因此

以2.0 mL為實(shí)驗(yàn)過程中界限增加或減少酸的用量，每增加1.0 mL酸一次，分別測(cè)定吸光度。由于pH計(jì)測(cè)定pH值最佳范圍為1～9，在酸度很大時(shí)無法準(zhǔn)確測(cè)定溶液的pH值，按照公式（1）計(jì)算出不同體積硫酸對(duì)應(yīng)的酸度，再求負(fù)對(duì)數(shù)得到pH值見表1。

表1 不同加酸量對(duì)應(yīng)的pH值Table1 Corresponding pH valuesw ith acid amounts

根據(jù)公式（2）計(jì)算出水樣（1）、水樣（2）加入2.0 mL硫酸后不同酸度的理論吸光度見表2、表3。

式中：A為吸光度；k為摩爾吸光系數(shù)，k＝4×104（L·mol－1·cm－1）；b為溶液層厚度，即比色皿厚度，b＝3 cm；c為溶液濃度。

取10支50 mL比色管，依次加入0.00，1.00，3.00，5.00，10.00，12.00，15.00，18.00，20.00，25.00 mL濃度0.50 mg／L水樣（1），并分別標(biāo)記為水樣1，2，3，4，5，6，7，8，9，10。先加入2.0 mL（1＋9）硫酸，0.5 mL顯色劑，立即搖勻，以免六價(jià)鉻被乙醇還原。用蒸餾水稀釋至標(biāo)線。5～10 min后，于540 nm波長處，用3 cm比色皿，以蒸餾水為參比，測(cè)定吸光度并做空白校正。測(cè)定的結(jié)果見表4。對(duì)測(cè)定結(jié)果計(jì)算回歸方程，回歸方程r＞0.999為有效數(shù)據(jù)。其后，每次增加1 mL的硫酸用量，直到加入13 mL硫酸。

對(duì)表4結(jié)果計(jì)算其相關(guān)回歸曲線方程，其相關(guān)系數(shù)表5。由表5得出R值大于0.999，表明測(cè)定的吸光度值滿足精度要求。

取8支50 mL比色管，一次加入0.00，1.00，5.00，8.00，10.00，15.00，20.00，25.00 mL濃度0.10 mg／L水樣（2），將它們分別標(biāo)記為水樣1，2，3，4，5，6，7。按同樣的步驟測(cè)定吸光度結(jié)果表6，對(duì)表6結(jié)果計(jì)算其相關(guān)回歸曲線方程，其相關(guān)系數(shù)如表7。由表7得出R值大于0.999，表明測(cè)定的吸光度值滿足精度要求。

表2 水樣（1）的理論吸光度Table2 Theoretical absorbances of water sample（1）of different volumes

表3 水樣（2）的理論吸光度Table3 Theoretical absorbances of water sample（2）of different volumes

表4 不同加酸量下水樣（1）的吸光度Table4 Absorbances of water samp le（1）w ith different acid amounts

表5 水樣（1）吸光度直線方程Table5 Linear equations of the absorbances of water sample（1）of different volumes

表6 不同加酸量下水樣（2）的吸光度Table6 Absorbances of water sample（2）w ith different acid amounts

表7 水樣（2）吸光度直線方程Table7 Linear equations of the absorbances of water sample（2）of different volumes

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

采用數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法，利用EXCEL軟件對(duì)表4、表6中的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，得到水樣（1）、水樣（2）加酸量與吸光度的相關(guān)性圖1、圖2。由圖1、圖2看出隨著硫酸加入量的不斷增加，酸度不斷升高，即pH值不斷降低，吸光度值隨之降低，表明pH值對(duì)Cr（Ⅵ）吸光度測(cè)定的影響。這是因?yàn)樗蠧r（Ⅵ）很容易水解，當(dāng)Cr（Ⅵ）溶液的濃度低于500 mg／L的時(shí)候，Cr（Ⅵ）主要以H2CrO4和的形式存在（??H＋＋），它們二者之間的平衡反應(yīng)取決于pH值的大小。

圖1 水樣（1）加酸量與吸光度關(guān)系Fig.1 Relation between acid amount and absorbance in water sample（1）

圖2 水樣（2）加酸量與吸光度關(guān)系Fig.2 Relation between acid amount and absorbance in water sam ple（2）

當(dāng)pH值較低時(shí)H2CrO4是占主導(dǎo)地位的陰離子，pH值較高時(shí)則大量存在。另一方面，其它種類的Cr（Ⅵ）陰離子會(huì)在酸性溶液中同時(shí)存在，例如，等。Cr（Ⅵ）與氫離子的反應(yīng)主要通過以下幾種方式發(fā)生：

從以上3個(gè)反應(yīng)式看出，當(dāng)pH值減小的時(shí)候，溶液的酸度增加，H＋的濃度增大，平衡反應(yīng)會(huì)向右進(jìn)行從而導(dǎo)致Cr（Ⅵ）的含量下降，Cr（Ⅲ）的含量則升高，因此吸光度值降低。

2.2 結(jié)果分析

采用灰色系統(tǒng)模型的一階一維模型GM（1，1）對(duì)已知實(shí)驗(yàn)序列數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。設(shè)

將試驗(yàn)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行一次累加，以3.0 mL的水樣為例，步驟如下：X（0）＝［0.07，0.068，0.064，0.055，0.058，0.047，0.049，0.047，0.049，0.04，0.034，0.03，0.03，0.019］；對(duì)X（0）作一次累加生成數(shù)列

以加酸量為橫坐標(biāo)，X（1）數(shù)列為縱坐標(biāo)，使用EXCEL作圖，并通過計(jì)算得到直線方程組公式（3）：

采用公式（3）計(jì)算出的3.0 mL水樣在不同酸度下的吸光度分別為：0.07，0.067，0.064，0.051，0.058，0.054，0.050，0.046，0.042，0.038，0.034，0.030，0.026，0.022。該數(shù)據(jù)與X（0）作t檢驗(yàn)和F檢驗(yàn)，檢驗(yàn)其是否存在顯著性差異。

F檢驗(yàn)：通過比較2組數(shù)據(jù)的方差S2，以確定他們的精密度是否有顯著性差異。樣本標(biāo)準(zhǔn)偏差的平方，即S2＝∑（X－X平均）2／（n－1）。計(jì)算所得S1為0.014 716，S2為0.014 739，F(xiàn)＝＝1.001 563，查F表得F0.05（12，12）＝2.69，則F＜F0.05（12，12），說明2組數(shù)據(jù)無顯著性差異，精密度較好。

t檢驗(yàn)：2樣本含量分別為n1，n2，經(jīng)計(jì)算t＝1.795，查t值表得t0.05（26）＝2.056，因此，｜t｜＜2.056，說明根據(jù)公式計(jì)算所得數(shù)據(jù)的系統(tǒng)誤差較小，準(zhǔn)確度良好。

利用GM（1，1）模型計(jì)算得到水樣不同加酸量吸光度直線方程式見表8，經(jīng)顯著性檢驗(yàn)后符合要求。

表8 不同加酸量的吸光度公式Table8 Equations of absorbancesw ith different acid amounts

3 結(jié) 論

（1）二苯碳酰二肼分光光度法測(cè)定六價(jià)鉻，吸光度隨著溶液pH值的減小而減小，酸度過大，測(cè)定的實(shí)際結(jié)果比真實(shí)值小，表明不同pH值對(duì)Cr（Ⅵ）測(cè)定具有影響。

（2）當(dāng)pH值減小的時(shí)候，溶液的酸度增加，H＋的濃度增大，平衡反應(yīng)會(huì)向右進(jìn)行從而導(dǎo)致Cr（Ⅵ）的含量下降，Cr（Ⅲ）的含量則升高，因此吸光度值降低。

（3）采用灰色系統(tǒng)模型的一階一維模型GM（1，1）對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，可推導(dǎo)出不同酸度下的吸光度直線方程式，經(jīng)t檢驗(yàn)和F檢驗(yàn)證明經(jīng)計(jì)算出的吸光度與測(cè)定值不存在顯著性差異，可幫助我們定量掌握不同酸度條件下對(duì)測(cè)定Cr（Ⅵ）產(chǎn)生影響的程度。

［1］ 朱建華，王莉莉.不同價(jià)態(tài)鉻的毒性及其對(duì)人體影響［J］.環(huán)境與開發(fā)，1997，（3）：46－48.（ZHU Jian-hua，WANG Li-li.The Toxicity of Different Valence Chromium and Effect on Human Body［J］.Environmentand Exploitation，1997，（3）：46－48.（in Chinese））

［2］ 魯 丹，劉雅萍.印染廢水中鉻（Ⅵ）的流動(dòng)注射在線分離富集電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法測(cè)定痕量六價(jià)鉻［J］.環(huán)境與健康雜志，2008，（9）：819－821.（LU Dan，LIU Ya-ping.Determination of Trace Chromium（Ⅵ）by Flow Injection On-line Separation and Preconcentration with Inductively Coupled Plasma-atomic E-mission Spectrometry［J］.Journal of Environment and Health，2008，（9）：819－821.（in Chinese））

［3］ World Health Organization.Guidelines for Drinking-Water Quality［K］.Geneva：World Health Organization，2004：334－335.

［4］ 劉新江，楊曉琴，王力民.改良顯色劑測(cè)定飲用水中六價(jià)鉻的方法及因素分析，［J］，現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2009，（10）：139－147.（LIU Xin-jiang，YANG Xiao-qin，WANG Li-min.Analysis of Improved Color of Hexavalent Chromium in Drinking Water［J］.Modern Preventive Medicine，2009，（10）：139－147.（in Chinese））

［5］ 嚴(yán) 敏，劉 軍.花溪河水中鉻（Ⅵ）污染分析［J］.河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，（4）：88－89.（YAN Min，LIU Jun.Chromium（Ⅵ）Pollution in Huaxi River［J］.Journal of Hebei Agricultural Sciences，2008，（4）：88－89.（in Chinese））

［6］ 王 琪，晉麗麗.二苯碳酰二肼分光光度法測(cè)定六價(jià)鉻方法的改進(jìn)［J］.化工環(huán)保，2004，（增1）：289－390.（WANGQi，JIN Li-li.Improvementof Diphenylcarbazide Spectrophotometry Applied to Determine Hexavalent Chromium［J］.Environmental Protection of Chemical Industry，2004，（Sup.1）：289－390.（in Chinese））

［7］ 閆 明，楊鐵金，馬偉光，等.微萃取原子吸收法檢測(cè)水中微量鉻［J］.齊齊哈爾大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2010，（3）：64－67.（YAN Ming，YANG Tie-jin，MA Wei-guang，et al.Determination of Trace Chromium by Combination of Dispersive Liquid Microextraction with Flame Atomic Absorption Spectrometry［J］.Journal of Qiqihar University（Natural Science Edition），2010，（3）：64－67.（in Chinese））

［8］ 陳育翔.二苯碳酰二肼分光光度法測(cè)定電鍍廢水中六價(jià)鉻的改進(jìn)研究［J］.化學(xué)工程與裝備，2008，（6）：109－111.（CHEN Yu-xiang.Improvement of Diphenylcarbazide Spectrophotometry Applied to Determine Hexavalent Chromium in Electroplating Wastewater［J］.Chemical Engineering＆Equipment，2008，（6）：109－111.（in Chinese））

［9］ 蘇文海.二苯碳酰二肼分光光度法測(cè)定六價(jià)鉻方法的改進(jìn)［J］.環(huán)境科學(xué)導(dǎo)刊，2009，28（5）：77－79.（SU Wen-hai.Improvement of Diphenylcarbohydrazide Spectrophotometric Method used to Determine Hexavalent Chromium in the Water［J］.Environmental Science Survey，2009，28（5）：77－79.（in Chinese））

［10］譚紅艷，張國棟.分光光度法測(cè)定廢水中六價(jià)鉻不確定度評(píng)定［J］.環(huán)境科技，2010，（11）：65－71.（TAN Hong-yan，ZHANG Guo-dong.Evaluation of Uncertainty for Determination of Chromium（Ⅵ）in Wastewater by Spectrophotometric Method［J］.Environmental Science and Technology，2010，（11）：65－71.（in Chinese））

［11］高小龍.離子交換樹脂分離富集Cr（Ⅵ）和Cr（Ⅲ）的研究和應(yīng)用［J］.廣東化工，2010，（11）：64－66.（GAO Xiao-long.The Optimum Condition of Separation and Collection of Cr（Ⅵ）and Cr（Ⅲ）［J］.Guangdong Chemical Industry，2010，（11）：64－66.（in Chinese） ）

（編輯：趙衛(wèi)兵）

Influence of pH Value on the Determ ination of Hexavalent Chrom ium by Diphenylcarbazide Spectrophotometry

WANG Hai-yun，LIMin-rui，LIAO Tao，TAN Fei-fan，DENG Jie
（College of Hydraulic and Environmental Engineering，China Three Gorges University，Yichang 443002，China）

Based on the 1，5-diphenylcarbazide spectrophotometry，we researched on the influence of pH value on the determination of hexavalent chromium.By adding different amounts of acid into twowater sampleswith different volumes and concentrations，wemeasured the absorbances of the solutions so as to determine the hexavalent chromium.Through analysis by EXCEL on themeasured data，we found that the absorbance reduced with the decrease of pH value.In the presence of high acidity，which means small pH value，themeasured hexavalent chromium was smaller than the original value before adding acid.Therefore，the variation of pH value had an impact on themeasurement of hexavalent chromium.Moreover，we employed the gray system model GM（1，1）to process the experimental data，and derived a linear equation for the absorbance under different acidities.Through t test and F test，

no significant differencewas found between calculated absorbance and measured absorbance.This research is helpful to quantitatively looking into the influence of pH value on hexavalent chromium determination.

pH value；diphenylcarbazide（C14H14N4O）spectrophotometry；determination of hexavalent chromium（Cr（Ⅳ））

X832

A

1001－5485（2012）09－0022－05

10.3969／j.issn.1001－5485.2012.09.006

2011－07－09；

2011－08－18

三峽大學(xué)人才基金（KJ2009B005）

王海云（1956－）男，河南林州人，教授，博士，主要從事環(huán)境監(jiān)測(cè)與污染治理方面的研究，（電話）13972027886（電子信箱）wanghaiyun＠ctgu.edu.cn。