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    復(fù)方中草藥對西伯利亞鱘親魚血清生化指標(biāo)的影響

    2012-08-08 12:23:44劉曉勇劉紅柏張永旺張洪玉孫大江
    關(guān)鍵詞:中草藥水產(chǎn)復(fù)方

    齊 茜,劉曉勇,劉紅柏,張 穎,張永旺,張洪玉,彭 翔,孫大江

    (1.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院鱘魚繁育技術(shù)工程中心,北京 100070;2.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所,哈爾濱 150070;3.中國水產(chǎn)科學(xué)研究院,北京 100141)

    鱘魚屬亞冷水性魚類[1-2]。我國的鱘魚養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速,隨著養(yǎng)殖規(guī)模的擴大,夏季高溫季節(jié)親魚發(fā)病率升高,保護(hù)親魚安全度夏顯得尤為重要。中草藥相對于抗生素與化學(xué)藥物,具有毒副作用小、無殘留、安全性好、不會造成環(huán)境污染等特點,逐漸成為預(yù)防和治療動物疾病的理想選擇[3]。采用中草藥作為飼料添加劑增強鱘親魚免疫力和抗病力,最大限度地減少魚病發(fā)生,是生產(chǎn)綠色無公害水產(chǎn)品發(fā)展的需要,也是養(yǎng)殖戶為保證養(yǎng)殖效益經(jīng)常采取的措施?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)200多種中草藥具有免疫促進(jìn)作用[4],關(guān)于中草藥促進(jìn)鱘魚機體免疫力提高的研究較多,劉紅柏等針對施氏鱘(Acipenser schrenkii)進(jìn)行多種復(fù)方及單方研究[5-8],但此方面未見西伯利亞鱘的相關(guān)研究報道。本文基于生產(chǎn)實際,針對夏季養(yǎng)殖戶可能采取的鱘親魚疾病預(yù)防措施,以我國重要的繁殖養(yǎng)殖品種之一西伯利亞鱘(Acipenser baeri)為研究對象,初步研究常用清熱解毒類中草藥板藍(lán)根和甘草復(fù)方對西伯利亞鱘親魚血液生化指標(biāo)的影響,旨在為高溫季節(jié)鱘親魚的疾病預(yù)防提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    實驗用中草藥來自北京鑫洋水產(chǎn)高新技術(shù)有限公司。健康非免疫狀態(tài)下的西伯利亞鱘親魚來自中國水產(chǎn)科學(xué)研究院鱘魚繁育技術(shù)工程中心,魚齡為7+齡,平均體重為9~11 kg。

    1.2 方法

    1.2.1 中草藥方劑及添加方式

    復(fù)方中草藥由甘草和板藍(lán)根原材料微粉按照1:1的比例組成,以1%的劑量用520淀粉粘合劑添加入全價配合飼料,對照組投喂普通全價配合飼料。

    1.2.2 試驗魚的養(yǎng)殖

    試驗在生產(chǎn)條件下進(jìn)行,試驗用池為4個半徑4 m的圓形水泥池,每組2個平行,每組120尾。養(yǎng)殖水源為河水、井水混合水,水溫25~28℃,pH 7.8。每天按魚體重的0.5%投喂,一天2次。試驗期為24 d。

    1.2.3 樣品采集

    投喂24 d后,分別在對照組和試驗組隨機挑選雌雄魚各6尾于尾動(靜)脈處采集肝素抗凝血,4℃下以3 500 r·min-1離心20 min,取血清。將血清立即置-40℃保存。

    1.2.4 生化指標(biāo)的檢測

    白蛋白、溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、丙二醛、過氧化氫酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶檢測采用南京建成生產(chǎn)的試劑盒,總膽固醇和甘油三脂檢測采用長春回力生產(chǎn)的試劑盒。

    1.2.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理

    試驗數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件中的單因子方差分析進(jìn)行統(tǒng)計。

    探索建立積極有效的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究激勵機制,充分調(diào)動和發(fā)揮藥品生產(chǎn)企業(yè)和科研機構(gòu)的積極性,有效借助各方力量、鼓勵多方投資參與,加大藥品標(biāo)準(zhǔn)的研究力度,促進(jìn)藥品標(biāo)準(zhǔn)提高和藥品質(zhì)量提升。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 死亡率

    試驗期間,西伯利亞鱘親魚的死亡率為0。

    2.2 中草藥對血清ALB、TG和CHOL含量影響

    由表1可知,試驗組西伯利亞鱘雌、雄親魚血清ALB、CHOL和TG較對照組差異不顯著(P>0.05)。

    2.3 中草藥對血清LSZ及AKP活性變化影響

    由表2可知,試驗組西伯利亞鱘雌、雄親魚血清溶菌酶和堿性磷酸酶較對照組顯著升高(P<0.05),LSZ分別升高71.80%、459.28%,AKP升高62.61%、33.33%。

    2.4 中草藥復(fù)方對血清MDA、SOD和CAT含量影響

    由表3可知,試驗組西伯利亞鱘雌、雄親魚血清中SOD含量較對照組稍有降低,差異不顯著;血清MDA含量較對照顯著升高(P<0.05);血清CAT含量較對照組顯著降低(P<0.05)。

    表1 中草藥對血清白蛋白、甘油三酯和總膽固醇含量的影響Table 1 Effects of Chinese herb on the ALB、TG and CHOL contents in serum of Acipenser baeri

    表2 中草藥對血清溶菌酶和堿性磷酸酶含量的影響Table 2 Effects of Chinese herb on the LSZ and AKP contents in serum of Acipenser baeri

    表3 中草藥對血清丙二醛、超氧化物歧化酶及過氧化氫酶含量的影響Table 3 Effects of Chinese herb on the MDA、SOD and CAT contents in serum of Acipenser baeri

    2.5 中草藥復(fù)方對血清GOT和GPT含量的影響

    結(jié)果見表4。

    由表4可知,試驗組雌、雄西伯利亞鱘親魚血清中的GOT和GPT較對照組顯著升高(P<0.05),雄魚較對照組分別升高了144.79%、47.95%,雌魚較對照組分別提高了76.07%、18.20%。

    表4 中草藥對血清谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量的影響Table 4 Effects of Chinese herb on the GOT and GPT contents in serum of Acipenser baeri

    3 討論與結(jié)論

    生物體內(nèi)血液生理指標(biāo)與魚體的新陳代謝、營養(yǎng)狀況以及疾病有密切關(guān)系,當(dāng)魚體受到外界因子影響而發(fā)生生理生化或病理變化時,必定會在血液生理生化指標(biāo)中反映出來[9-10]。研究表明,板藍(lán)根含有吲哚類生物堿、芥子苷類化合物等化學(xué)成分,具有抗菌、抗病毒、抗內(nèi)毒素、免疫促進(jìn)等作用,甘草含有100多種化學(xué)成份,可以調(diào)和諸藥,具有抗炎癥、抗病毒、解毒等功效[11-12]。本試驗選取甘草和板藍(lán)根作為復(fù)方添加劑預(yù)防夏季疾病,結(jié)果顯示1%的甘草和板藍(lán)根對機體血液生化指標(biāo)具有一定的調(diào)節(jié)作用。

    3.1 中草藥復(fù)方對血清免疫指標(biāo)的影響

    溶菌酶在魚類的非特異性免疫中起著重要的作用,對革蘭氏陰性菌有強烈的殺菌作用[1]。本研究中,試驗組的溶菌酶較對照組顯著提高,在一定程度上增強了機體的免疫力,這與劉紅柏等對施氏鱘[7]、梁擁軍等對寶石鱸(Scortum barcoo)[14]、周顯清等對中華鱉(Pelodiscus sinensis)[15]研究一致,中草藥成份增強了細(xì)胞分泌溶菌酶的能力,進(jìn)而提高了血清溶菌酶活力。堿性磷酸酶是高等動物體內(nèi)巨噬細(xì)胞溶酶體的標(biāo)志酶,在體內(nèi)直接參與磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移和代謝,是機體生長代謝,維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,維持機體健康所必需的酶,受營養(yǎng)狀況、環(huán)境變化、疾病及生長狀況的影響[16]。本研究中,試驗組堿性磷酸酶活性較對照組升高,進(jìn)一步在一定程度說明受中草藥復(fù)方影響機體的免疫力提高。板藍(lán)根具有增強免疫力的作用[11],因此本試驗中機體免疫力的提高可能主要與板藍(lán)根有關(guān),具體機理需要進(jìn)一步試驗驗證。

    3.2 中草藥復(fù)方對血清抗氧化能力的影響

    機體的抗氧化能力強弱與健康程度存在著密切關(guān)系。超氧化物歧化酶(SOD)能清除超氧陰離子自由基,保護(hù)細(xì)胞免受損傷,對機體的氧化與抗氧化水平起至關(guān)重要作用。丙二醛(MDA)是機體被自由基氧化后的產(chǎn)物。在正常生理狀態(tài)下,機體自由基的產(chǎn)生和清除處于動態(tài)平衡。因此,動態(tài)檢測SOD、MDA能比較準(zhǔn)確地反映機體內(nèi)自由基的代謝狀況,對判斷魚體健康狀況具有重要價值[14]。本試驗表明,試驗組西伯利亞鱘親魚血清的SOD均值較對照組降低,差異不顯著,MDA較對照組升高,差異顯著,二者在一定程度反映機體抗氧化能力的下降。

    CAT廣泛存在于需氧微生物和動植物細(xì)胞中,在細(xì)胞內(nèi)主要與線粒體及過氧化物結(jié)合,是一種與D-氨基酸氧化酶等一系列需氧脫氫酶相偶聯(lián)的酶,它能將細(xì)胞代謝產(chǎn)生的毒性物質(zhì)分解為水和氧。在健康的魚體內(nèi),當(dāng)CAT活性降低時,魚體內(nèi)自由基過多,可破壞體內(nèi)一些重要生化過程,導(dǎo)致代謝混亂[17]。本試驗中,CAT的含量較對照組顯著降低,這和MDA含量升高的結(jié)果一致,進(jìn)一步說明機體的抗氧化能力下降。

    3.3 中草藥復(fù)方對血清生化指標(biāo)的影響

    血漿中白蛋白、甘油三酯、總膽固醇等的含量反應(yīng)機體營養(yǎng)和代謝狀態(tài)。有研究表明甘草具有減少甘油三酯積聚,降低膽固醇作用[11]。但是本試驗中,甘草和板藍(lán)根復(fù)方對西伯利亞鱘親魚血漿中白蛋白、甘油三酯和總膽固醇含量的影響不顯著,一方面可能和試驗周期及試驗品種的生長階段有關(guān),另一方面可能和中草藥的使用方法有關(guān),本實驗采用微粉直接添加,不利于有效藥物發(fā)揮作用,同時可能和鱘魚腸道較短有關(guān),不利于有效藥物的吸收利用,具體機理需進(jìn)一步單方試驗。

    3.4 藥物副作用評價

    谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)等血清中的酶類主要分布于機體的肝和腎等組織細(xì)胞,在正常情況下,血清中這些酶活性低而且含量相對穩(wěn)定,而患病魚血清中的含量則顯著高于健康魚。一般認(rèn)為,這是病魚的肝、腎等組織受到損傷的表現(xiàn)[18-21]。本試驗中,試驗組這兩種酶較對照組相比顯著升高,與劉紅柏等對大黃加甘草的復(fù)方研究結(jié)果一致[9],說明某些中藥會對肝功能產(chǎn)生負(fù)面影響,但是具體作用機理尚需進(jìn)一步深入研究。這與吉紅等對黃芩素對鯉魚健康及生長的研究一致[22]。

    綜上,中草藥并非絕對安全,其作用可能是雙向的,在增強免疫力的同時,也會給肝臟造成一定負(fù)擔(dān)。因此在使用中草藥時一定要慎重,以免使用不當(dāng)造成危害。本試驗對于夏季鱘親魚疾病防控和生產(chǎn)指導(dǎo)具有重要意義。

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