PTEN和survivin在卵巢上皮性腫瘤中的表達水平及臨床意義

張國梅 (鄭州市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 鄭州 450007)

卵巢上皮性腫瘤是女性常見的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，死亡率在女性惡性腫瘤中最高。其發(fā)生發(fā)展是個復(fù)雜的過程，多種蛋白和相關(guān)因子在其中起重要作用。生存素(survivin)是凋亡蛋白抑制因子家族成員之一，與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程有密切關(guān)系〔1〕。有研究發(fā)現(xiàn)，同源性磷酸酶張力蛋白(PTEN)是一個多種腫瘤及癌前病變中容易發(fā)生突變或缺失的抑癌基因，與腫瘤密切相關(guān)〔2〕。本文旨在探討PTEN和survivin在卵巢上皮性腫瘤中的表達水平及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2007年1月至2010年1月我院手術(shù)切除的卵巢上皮性腫瘤110例，其中良性腫瘤38例，惡性腫瘤72例，另收集癌旁正常卵巢組織20例作為對照組?；颊吣挲g34～62〔平均(57.4±89.71)〕歲。手術(shù)切除的卵巢上皮性惡性腫瘤標本全部經(jīng)病理醫(yī)生確診，根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO，2000年)制定的標準進行病理分期:Ⅰ期10例、Ⅱ15例、Ⅲ期21例、Ⅳ期26例;根據(jù)WHO分類標準進行組織學分型:漿液型42例，黏液型20例，透明細胞癌4例，子宮內(nèi)膜樣癌6例;病理分級:高分化18例，中分化26例，低分化28例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移42例。所有患者臨床資料保存完整，術(shù)前未經(jīng)放、化療治療。

1.2 方法 石蠟包埋組織切片采用SABC免疫組化法(武漢博士德)進行PTEN和survivin檢測(Abcam)，其中空白對照采用磷酸鹽緩沖液(PBS)置換一抗，陽性對照采用已知陽性標本。PTEN以胞質(zhì)或胞核出現(xiàn)棕色顆粒為陽性;survivin以胞質(zhì)或胞膜出現(xiàn)棕色顆粒為陽性。在高倍鏡下(×200)每張切片隨機選取5個視野，計數(shù)視野中陽性細胞數(shù)和腫瘤細胞的總細胞數(shù)，陽性細胞數(shù)占總細胞數(shù)比例＜1%為陰性，1% ～10%為弱陽性，11%～50%為中度陽性，＞50%為強陽性，其中弱陽性、中度陽性和強陽性視為陽性表達。

1.3 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗。相關(guān)性用配對資料的關(guān)聯(lián)分析，用Pearson列聯(lián)系數(shù)表示。

2 結(jié)果

2.1 PTEN和survivin蛋白在正常卵巢、良性腫瘤及惡性腫瘤的表達比較 PTEN在正常卵巢、良性腫瘤及惡性腫瘤組織的陽性表達分別為 20例(100%)、35例(92.1%)、28例(38.9%)，PTEN在惡性腫瘤組織的陽性表達明顯低于正常卵巢和良性腫瘤組織(P＜0.01)，在正常卵巢和良性腫瘤組織的表達差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。survivin在正常卵巢、良性腫瘤及惡性腫瘤組織的陽性表達分別為0、1例(2.6%)、48例(66.7%)，survivin在惡性腫瘤的陽性表達明顯高于正常卵巢和良性腫瘤組織(P＜0.01)，在正常卵巢和良性腫瘤組織的表達差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

2.2 卵巢上皮性惡性腫瘤不同臨床病理特征與PTEN和survivin蛋白表達的關(guān)系 PTEN在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達率與FIGO分期、病理分級正相關(guān)(P＜0.05，P＜0.01)，與組織分型以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P＞0.05)。survivin在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達率與FIGO分期、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)(P＜0.05，P＜0.01)，與組織分型無關(guān)(P＞0.05)。見表1。

表1 卵巢上皮性惡性腫瘤不同臨床病理特征與PTEN和survivin蛋白表達的關(guān)系〔n(%)〕

2.3 PTEN和survivin蛋白在惡性腫瘤表達的相關(guān)性 在惡性腫瘤組織中，PTEN和survivin雙陽性表達10例，雙陰性表達10例，僅PTEN陽性18例，僅survivin陽性34例，PTEN和survivin蛋白在惡性腫瘤表達負相關(guān)(r=－0.415 6，P=0.000 4)。

3 討論

PTEN基因是抑癌基因，由多功能磷酸酶編碼，作為磷酸酶在胞質(zhì)信號傳遞中起著復(fù)雜和重要的作用，在多種腫瘤及癌前病變中容易發(fā)生突變或缺失，主要參與細胞生長調(diào)節(jié)，具有誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡以及抑制腫瘤細胞生長、侵襲轉(zhuǎn)移等功能〔3〕。有研究發(fā)現(xiàn)，PTEN蛋白低表達參與前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌等多種惡性腫瘤的演進過程〔4〕。本研究發(fā)現(xiàn)，PTEN蛋白在卵巢上皮性惡性腫瘤中陽性表達水平明顯低于良性卵巢腫瘤和正常卵巢組織，PTEN在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達率與FIGO分期、病理分級正相關(guān)，提示PTEN失活在卵巢癌極為常見，在控制卵巢癌發(fā)生發(fā)展過程負性調(diào)控中起一定作用。因此，它可能與卵巢癌的演進有密切關(guān)系。

研究發(fā)現(xiàn)，survivin基因是作用最強的凋亡抑制基因，在正常成熟的器官、組織、細胞中測不到survivin的表達，選擇性表達于常見的惡性腫瘤和胚胎組織中，如乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、白血病、腎癌、淋巴瘤等，與腫瘤的惡性程度、侵襲性、預(yù)后及腫瘤的耐藥作用有關(guān)。其生物學功能主要包括參與細胞周期的調(diào)控、抑制細胞凋亡和參與血管形成，參與腫瘤發(fā)生和發(fā)展的作用機制。本文發(fā)現(xiàn)，survivin在正常卵巢組織和卵巢良性上皮性腫瘤組織中基本無表達，在惡性上皮性腫瘤組織陽性表達率明顯升高，而且survivin在卵巢上皮性惡性腫瘤的陽性表達率與FIGO分期、病理分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)，提示survivin基因可能通過抑制卵巢癌細胞凋亡而對卵巢癌的發(fā)生發(fā)展、轉(zhuǎn)移起重要作用〔5〕。

通過相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，PTEN和survivin蛋白在惡性腫瘤的表達負相關(guān)，可能因為是PTEN基因失活，失去磷酸酶的作用，使得survivin蛋白維持34位點蘇氨酸的磷酸化，從而抑制細胞凋亡，促進卵巢癌的發(fā)生〔6〕。提示survivin基因的表達與PTEN基因的失活在卵巢癌的發(fā)生中有協(xié)同作用。同時，在卵巢癌中出現(xiàn)PTEN陽性和survivin陽性共表達現(xiàn)象，提示在卵巢癌的發(fā)生過程中可能有其他分子生物學機制參與，有待進一步研究。因此，聯(lián)合檢測PTEN和survivin蛋白表達對于評價卵巢癌的惡性程度、轉(zhuǎn)移和預(yù)后具有重要臨床價值。

1 耿海燕，邵淑麗.Survivin和p53蛋白在卵巢上皮性腫瘤中的表達、相關(guān)性及意義〔J〕.中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2010;4(3):8-9.

2 Ang S，Chen H，Hirota K，et al.Disruption of oxygen homeostasis underlies congenital Chuvash polythemia〔J〕.Nat Geney，2002;32(4):614-21.

3 李鎖嚴，楊薇薇，溫秋婷，等.上皮性卵巢癌中PTEN和HIF-1的表達及其相關(guān)性〔J〕.臨床與實驗病理學雜志，2009;25(4):361-3.

4 Waite KA，Eng C.Proteain PTEN:form and function〔J〕.AmJ Hum Genet，2002;70(4):829-44.

5 Sui L，Dong Y，Ohno M，et al.Survivin expression and its correlation with cell proliferation and prognosis in epithelial ovarian tumors〔J〕.Int J Oncol，2002;21(2):315-20.

6 朱巧英，沈宇飛，胡建銘，等.卵巢上皮性腫瘤中PTEN和survivin的表達及意義〔J〕.實用醫(yī)學雜志，2009;25(18):3009-10.