胎傳梅毒的3種血清學(xué)檢測方法比較分析

張 丹

湖南省長沙市省兒童醫(yī)院皮膚科，湖南長沙 410000

胎傳梅毒(Congenital syphilis，CS)又稱先天梅毒，是梅毒螺旋體經(jīng)由母體胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)使胎兒受染而引起的新生兒、嬰兒和兒童梅毒[1]。為了及時落實干預(yù)措施，對其進(jìn)行早期診斷十分重要。目前在胎傳梅毒的診斷中，主要是以臨床癥狀和血清學(xué)結(jié)合的方法來進(jìn)行判別。因此，探索早期、敏感和特異的實驗室診斷策略就十分必要。本研究采用甲苯胺紅不加熱血清反應(yīng)素試驗(Toluidine red unheated serum test，TRUST)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(T.pallidum particle agglutination，TPPA)和梅毒螺旋體免疫吸附試驗 (T.pallidum enzyme－ linked i mmunosorbent assay，TPELISA)3種技術(shù)，對157例胎傳梅毒患兒血清進(jìn)行檢測，現(xiàn)將比較結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該院2009年1月—2011年8月共診斷出157例胎傳梅毒患兒，診斷符合《中國疾病預(yù)防控制中心統(tǒng)一性病診斷標(biāo)準(zhǔn)》。其中年齡最小1d，最大3月，男性92例，女性65例。

1.2 試劑和方法

非特異性梅毒螺旋體抗原血清試驗采用上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的TRUST試劑盒，特異性梅毒螺旋體抗原血清試驗借助日本富士瑞必歐株氏會社生產(chǎn)的TPPA試劑盒用被動血凝法檢測，以及上?？迫A生物工程股份公司生產(chǎn)的TP－IgMELISA試劑盒檢測IgM。所用試劑都在有效期內(nèi)，嚴(yán)格按照各試劑的說明書規(guī)范操作。

1.3 儀器

酶標(biāo)儀為 Bio－Rad MODEL680， 洗板機為 Bio－Rad MODEL1575，恒溫孵箱為廣州深華公司的GSP－9050MBE隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行，不同方法間的差異比較采用McNemar非參數(shù)檢驗，檢驗水準(zhǔn)α取0.05。

2 結(jié)果

所有樣本TPPA檢測均為陽性，3種血清學(xué)檢測全部為陽性者 93例。TRUST陽性檢出率為 59.24%， 與 TPPA、TP－IgMELISA檢測結(jié)果有明顯差異，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。而TP－IgM－ELISA和 TPPA2組方法檢測結(jié)果的符合率為 98.09%（154/157），其檢測結(jié)果間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 157例梅毒抗體陽性者TRUST、TPPA和TP-IgM-ELISA檢測結(jié)果

3 討論

從抗原抗體反應(yīng)原理上看，現(xiàn)階段廣泛用于實際工作中的梅毒血清學(xué)檢測手段主要分為非梅毒螺旋體抗原血清試驗和梅毒螺旋體抗原血清試驗2組。非梅毒螺旋體抗原血清試驗檢測的是由螺旋菌誘導(dǎo)胞膜損傷產(chǎn)生的抗磷脂抗體（即反應(yīng)素）。此類試驗操作簡單，成本低，是監(jiān)測療效的唯一推薦試驗。但由于抗磷脂抗體為非特異性抗體，存在假陽性問題，受檢樣本的抗體濃度過高，也可能存在前帶反應(yīng)即假陰性問題[2]。TRUST試驗就是其中一種，實際操作中在白色卡片上判讀紅色凝塊的陽性結(jié)果比較容易，操作簡便、快捷，文獻(xiàn)報道其檢出率和重復(fù)性強于快速血漿反應(yīng)素試驗（RPR）。本研究中TRUST的陽性檢出率為59.24%，漏檢率可見一斑。梅毒螺旋體抗原血清試驗是用梅毒螺旋體或其成分做抗原來檢測樣本中的抗螺旋體抗體，具有較高的敏感性和特異性。應(yīng)用此類方法檢測到抗梅毒螺旋體抗體表明受檢者曾有暴露，但陽性結(jié)果并不能反應(yīng)受檢者治療情況，因此尚不能用于治療效果的評價。TPPA和TP－IgM－ELISA即屬此類。TPPA是將特異性梅毒螺旋體抗原包被在明膠顆粒上，以排除非特異性反應(yīng)，有較高敏感性和特異性。本研究結(jié)果顯示TPPA的陽性檢測率為100%，提示其敏感性好，且目前已被參比實驗室用于確認(rèn)實驗，其特異性達(dá)到98%～100%[3]，較之具有同等敏感性熒光密螺旋體抗體吸收試驗（FTA－ABS），成本相對較低，操作簡單。但在實踐中發(fā)現(xiàn)，該方法所需試劑價格較貴，結(jié)果判讀不能自動化，依賴于肉眼觀察，不適合應(yīng)用于大規(guī)模的樣本檢測。TP－IgM－ELISA借助了酶放大系統(tǒng)，使其敏感性并不低于TPPA，本研究結(jié)果證實了二者的符合率高達(dá)98.09%，且差異不具統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。而且此法檢測的是血清TP－IgM水平，IgM相對分子量大，不能通過胎盤屏障，從理論上講，妊娠末3個月的胎兒如感染梅毒螺旋體，即可主動合成針對病原菌的IgM抗體。因此，此法不但可作為梅毒活動性感染的的監(jiān)測，且尤其適合早期胎傳梅毒的診斷。

綜上，本研究證實了TP－IgM－ELISA具有較高的診斷符合率，且操作便于標(biāo)準(zhǔn)化控制，實驗試劑相對低廉，可以取代TRUST和TPPA作為胎傳梅毒的首選血清學(xué)診斷方法。

[1]陳祥生.該國梅毒流行現(xiàn)狀及防治策略[J].國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志,2008,35(2):73－77.

[2]黃志明,周佳慧,羅榮華，等.妊娠梅毒 TRUST滴度及產(chǎn)前干預(yù)對先天梅毒發(fā)病的影響[J].中國熱帶醫(yī)學(xué),2009,8(9):1408－1410.

[3]陳祥生.該國梅毒流行現(xiàn)狀及防治策略[J].國際流行病學(xué)傳染病學(xué)雜志,2008,35(2):73－77.