壯醫(yī)藥線點灸療法對痛經大鼠腦垂體β－內啡肽的影響※

湯紅麗 馬鈺婷 王建慧 班素梅(.廣西南寧市第四人民醫(yī)院，53003 .山西省人口計生委科學研究)

痛經是指行經前后或月經期出現(xiàn)下腹疼痛、墜脹，伴腰酸或其他不適，程度嚴重影響生活和工作質量，是婦科常見疾病，臨床將其分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩類[1]。壯醫(yī)藥線點灸療法治療原發(fā)性痛經具有良好效果[2～4]。本研究通過動物實驗，觀察經壯醫(yī)藥線點灸療法治療后痛經大鼠的扭體反應及腦垂體β－內啡肽(β－endorphin，β－EP)含量，探討壯醫(yī)藥線點灸療法治療痛經的效果及其作用機理，報道如下。

實驗材料

1.實驗動物：選擇健康、清潔級、雌性、未孕SD大鼠50只，鼠齡3個月，體重180～220g，由廣西醫(yī)科大學實驗動物中心提供，合格證號為SCXK桂2003－0003。飼料由廣西中醫(yī)學院實驗動物中心提供，適應性飼養(yǎng)1周。

按體質量隨機分為四組：正常對照組(正常組)，痛經模型組(模型組)、痛經模型＋壯醫(yī)藥線點灸組(藥線組)、痛經模型＋空線點灸組(空線組)。每組10只，剩余10只大鼠用于補充意外死亡的缺失，均給普通全價固體飼料、飲用自來水飼養(yǎng)。

2.主要實驗試劑和儀器：壯醫(yī)藥線由廣西中醫(yī)學院壯醫(yī)研究所門診部提供；己烯雌酚注射液由上海通用藥業(yè)有限公司生產，批號20071020；催產素注射液由上海禾豐制藥有限公司生產，批號20071015；2%戊巴比妥鈉由上海卓康生物技術有限公司生產，批號20071130；2%冰醋酸由重慶川江化學試劑廠出產，批號20060221；神經肽盒放射免疫試劑盒由上海朗頓生物技術有限公司提供。主要儀器：秒表，JJ300型精密電子天平(常熟雙杰測試儀器廠生產)，冷凍離心機(上海手術器械廠生產)。

造模

參照文獻[5]進行，除正常組外，其余組大鼠經股部皮下注射己烯雌酚注射液(人工造成動物處于相同的動情期，以便提高子宮平滑肌對催產素的敏感性)，連續(xù)10天給藥：第1天、第10天給藥0.8mg／只，第2～9天給藥0.4mg／只；于末次給藥24h、末次點灸0.5h后，經腹腔注射催產素注射液2U／只，觀察30min內大鼠扭體反應情況，出現(xiàn)扭體反應則提示原發(fā)性痛經大鼠造模成功。扭體反應標準：大鼠腹部收縮內凹，軀干與后肢伸展，臀部與一側肢體內旋。

方法

藥線組：施予壯醫(yī)藥線點灸療法。選用標準Ⅱ號藥線(直徑0.7cm，經多種藥材精制液浸泡而成的苧麻線)，實驗人員用左手抓取大鼠，使其保持仰臥位，用右手拇指、食指持藥線一端，露出線頭1～2cm，在備好的蠟燭上點燃，保留圓珠炭火，如有明火須熄滅，將線端炭火對準所選穴位，順應手腕和拇指屈曲動作，拇指指腹穩(wěn)健而敏捷地將有炭火的線頭直接點按于選定的穴位上，一按火滅即起為一壯，一穴灸一壯，穴位無須常規(guī)消毒。于藥線組造模的第5天開始，施灸穴位：中極、關元、地機、太沖、后三里(足三里)、三陰交，施灸第一天先在所選穴位處備皮，充分暴露以上穴位，每天點灸1次，連續(xù)7天。

其余組：空線組選用直徑為0.7mm的麻線，其余選穴、療程、操作步驟等均同藥線組。正常組、模型組不予任何處理。

觀察指標及檢測方法

1.扭體反應：大鼠腹腔注射催產素后，觀察30min內各組大鼠的扭體次數(shù)，按以下公式統(tǒng)計扭體抑制率。扭體抑制率(%)＝(模型組平均扭體次數(shù)－治療組平均扭體次數(shù))÷模型組平均扭體次數(shù)×100%。

2.腦垂體β－EP測定：腹腔注射催產素1h后，采取頸椎脫臼處死法將其處死，迅速剝離腦垂體，將其稱重記錄后，加到1ml 100℃生理鹽水中，煮沸5min后，迅速冷卻，用2%冰醋酸制成勻漿，置4℃環(huán)境中1～2h后，離心 2400r／min，15min 后取出上清液，置 于－20℃冰箱保存?zhèn)溆谩２捎蒙窠涬姆派涿庖咴噭┖袡z測腦垂體β－EP含量。

結果

各組大鼠扭體反應情況見表1。

表1 四組大鼠扭體次數(shù)及扭體抑制率比較(±s)

表1 四組大鼠扭體次數(shù)及扭體抑制率比較(±s)

注：與模型組比較＊P＜0.05，與空線組比較△P＜0.01

組 別 扭體次數(shù) 扭體抑制率(%)正常組 0.0 0＋0.0 0△3 6.2 4%1 0 0%模型組 2 9.8 0＋3.0 1 0空線組 2 7.4 0＋2.0 1＊ 8.0 5%藥線組 1 9.0 0＋3.5 9＊△

實驗結果顯示：與模型組、空線組比較，藥線組扭體次數(shù)均明顯減少(P＜0.01)。

各組大鼠腦垂體β－EP含量測定結果見表2。

表2 四組大鼠腦垂體β－EP含量比較(±s，ng／ml)

表2 四組大鼠腦垂體β－EP含量比較(±s，ng／ml)

注：與模型組比較＊P＜0.01，與空線組比較☆P＜0.01

組 別 只數(shù) 腦垂體β－E P 含量正常組 1 0 3 7 9 8.1 0＋5 1 0.6 1＊模型組 1 0 2 2 6 8.5 0＋3 0 0.2 2空線組 1 0 3 7 0 9.3 0＋6 0 2.3 3＊藥線組 1 0 7 3 6 1.7 0＋1 2 0 6.9 5＊☆

實驗結果顯示：正常組、空線組、藥線組大鼠腦垂體β－EP含量均顯著高于模型組(P＜0.01)；且藥線組大鼠腦β－EP含量高于空線組(P＜0.01)。

討論

壯醫(yī)藥線點灸療法是壯醫(yī)獨具特色的醫(yī)療技法之一，點灸所用的藥線是由苧麻搓成線，經特制壯醫(yī)藥水浸泡加工而成，其氣味芳香、辛散，具有止痛、活血化瘀的作用。本實驗采用催產素致痛制作原發(fā)性痛經大鼠模型，根據(jù)中醫(yī)經絡選穴原則，選取中極、關元、地機、太沖、后三里、三陰交等調經、理氣、活血之穴，用壯醫(yī)藥線灼灸刺激穴位，靠其火粹迅速地發(fā)揮藥效，疏調機體兩路(龍路、火路)氣機，刺激機體經絡腧穴系統(tǒng)，調理“噓勒”(氣血)。實驗結果表明：與對照組比較，壯醫(yī)藥線點灸療法能對抗催產素所致的大鼠扭體反應(P＜0.01)，提示壯醫(yī)藥線點灸療法對痛經具有較好的止痛效果。

β－EP是一種神經內分泌激素，屬于一類具有嗎啡樣活性的神經多肽，具有內源性鎮(zhèn)痛作用[6]。李繼俊[7]認為子宮是β－EP的靶器官，參與子宮功能活動的調節(jié)，黃體期β－EP水平降低，以致子宮功能活動失常，成為疼痛的原因之一。本實驗運用壯醫(yī)藥線點灸治療后，痛經大鼠β－EP含量明顯升高，與模型組、空線組比較，差別有顯著意義，提示壯醫(yī)藥線點灸療法有效治療原發(fā)性痛經的機理可能與升高腦垂體β－EP含量有關。

[1]樂杰.婦產科學.第6版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：347－348.

[2]梁翀華.藥線點灸治療痛經50例小結.甘肅中醫(yī)，2002，15(1)：11.

[3]劉芳.壯醫(yī)藥線點灸治療痛經.中國臨床醫(yī)生，2003，31(7)：46－47.

[4]盧英翔.壯醫(yī)藥線點灸合中藥外敷治療原發(fā)性痛經37例.廣西中醫(yī)學院學報，2004，7(4)：23－24.

[5]楊美春，湯紅麗，方剛.壯醫(yī)藥線點灸療法對催產素致痛大鼠血液流變學的影響.中國民間療法，2009，6(17)：40－41.

[6]徐曉娟，金沈銳.芍藥甘草湯不同配伍比例對痛經大鼠β－內啡肽的影響研究.中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志，2004，10(6)：40－41.

[7]李繼俊.婦產科領域中的β－內啡肽.實用婦科與產科雜志，1990，6(3)：155－156.