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    急診PCI的急性心肌梗死患者外周血CD34+、CD117+及CD34/CD117+干細(xì)胞的變化*

    2012-07-21 06:52:42陜西省人民醫(yī)院西安710068鄧爭榮朱宏海李尚儉王軍奎劉新宏官功昌
    陜西醫(yī)學(xué)雜志 2012年10期
    關(guān)鍵詞:心梗動員外周血

    陜西省人民醫(yī)院(西安710068) 鄧爭榮 張 穎 朱宏海 李尚儉 王軍奎 劉新宏 官功昌

    本研究通過檢測行急診經(jīng)皮冠狀動脈介入(PCI)術(shù)的急性心肌梗死(A MI)患者外周血 CD34+、CD117+及CD34/CD117+干細(xì)胞數(shù),探討A MI患者干細(xì)胞自體動員情況及可能的影響因素。

    對象和方法

    1 研究對象 36例AMI患者,均在發(fā)病12h之內(nèi)并成功行急診PCI術(shù),使梗死相關(guān)動脈血流TI MI3級,所有患者均給予低分子肝素、阿司匹林、氯吡格雷及他汀類調(diào)脂藥等標(biāo)準(zhǔn)治療。心?;颊邼M足中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會制定的2010年急性ST段抬高型心肌梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。排除:近期患有急慢性感染性疾病,自身免疫性疾病,腫瘤,嚴(yán)重肝腎疾病,使用類固醇藥物。選擇15例經(jīng)冠狀動脈造影排除冠心病的患者為對照組,排除標(biāo)準(zhǔn)與心梗組一致。兩組一般資料比較見附表。兩組在年齡、性別、BMI,冠心病危險因素、尿酸及血脂水平方面均無明顯差別。A MI組入院時外周血白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞數(shù)明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

    2 方 法 ①流式細(xì)胞儀檢測CD34+、CD117+及CD34/CD117+干細(xì)胞的水平:A MI患者在入院12h內(nèi),第3、5天凌晨,對照組患者于入院次日凌晨,均采集外周靜脈血5 ml,置入EDTA抗凝管內(nèi),4h之內(nèi)行流式細(xì)胞儀分析。將100μl抗凝血加入流式試管內(nèi),混勻后加入20μl雙標(biāo)同型對照、FITC-CD34熒光抗體及熒光素藻紅蛋白PE-CD117熒光抗體(購自美國Southern Biotech公司,Mouse Anti-Hu man CD34-FITC,CD117/C-kit-PE),室溫下避光保存20 min,加入紅細(xì)胞裂解液2 ml,渦旋混勻,避光待管內(nèi)液體透亮后離心棄去上清,加入2 ml PBS液,渦旋混勻離心后棄去上清。加入0.5 ml PBS液混勻,4℃避光上流式細(xì)胞儀檢測(BD FACSCalibur,BD公司)。檢測結(jié)果以占淋巴細(xì)胞亞群的百分率來表示。②其他指標(biāo)測定:A MI患者在入院12h內(nèi)行CK-MB、肌鈣蛋白I測定,所有入選患者均行血常規(guī)、血脂及血尿酸等檢測。A MI患者在心梗后第7天行心臟超聲測定,測定射血分值(EF)等值。

    附表 兩組患者臨床基本情況

    3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。多組間比較用方差分析,計數(shù)資料的比較用χ2檢驗。兩變量之間的關(guān)系采用直線回歸和相關(guān)分析。一個變量與多個因素之間的關(guān)系采用多元回歸分析。檢測水平為雙側(cè),P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    結(jié) 果

    1 外周血CD34+、CD117+及CD34/CD117+干細(xì)胞檢測結(jié)果 A MI患者入院12h內(nèi)的外周血CD34+細(xì)胞為4.21±3.66%,對照組為8.47±5.29%,對照組明顯高于 AMI患者(P<0.05);A MI患者第3天及第5天的CD34+細(xì)胞均有所升高,分別為9.98±5.36%及6.28±4.76%,第3天時最為明顯,明顯高于發(fā)病12h內(nèi)的CD34+細(xì)胞(P<0.05),但與對照組相比無明顯差異。A MI患者入院12h內(nèi)的外周血CD117+細(xì)胞為1.16±0.77%,第3天和第5天均有所升高,分別為1.54±0.27%及1.4±1.05%,對照組為0.82±0.22%,第3天的CD117+細(xì)胞明顯高于對照組(P<0.05)。AMI患者在入院后各時間點的CD34/CD117+細(xì)胞分別為0.30±0.33%,0.41±0.39%及0.39±0.31%,對照組為0.18±0.11%,A MI患者均略高于對照組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 急性心肌梗死患者外周血干細(xì)胞與心肌壞死標(biāo)志物及EF值的關(guān)系 通過相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死患者各時間點的外周血 CD34+、CD117+及CD34/CD117+干細(xì)胞與發(fā)病12h內(nèi)的CK-MB水平、肌鈣蛋白水平及超聲EF值之間均無明顯相關(guān)性。

    3 影響A MI患者外周血干細(xì)胞的因素 應(yīng)用多元回歸分析年齡、冠心病危險因素個數(shù)(包括吸煙、高血壓及糖尿?。⒐诿}病變支數(shù)、外周血白細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、CK-MB及肌鈣蛋白與心梗后各時間點的CD34+、CD117+及CD34/CD117+干細(xì)胞之間的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)冠心病危險因素個數(shù)與心梗12h內(nèi)的CD34+干細(xì)胞數(shù)有明顯相關(guān)性(Beta=0.457,P=0.019),余變量之間均無明顯相關(guān)性。

    討 論

    急性心肌梗死時,心肌細(xì)胞缺血壞死,發(fā)生炎性反應(yīng),刺激機(jī)體釋放大量的炎性因子及細(xì)胞因子,這些因子會促使自身干細(xì)胞的動員。心梗后升高的CD34+等細(xì)胞有益于梗死后心室重塑[2],與左室功能有正相關(guān)關(guān)系[3]。不僅心梗后干細(xì)胞數(shù)量升高,而且可表達(dá)早期心肌、肌肉及內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)志[4]??梢娂毙孕募」K勒T發(fā)的自身干細(xì)胞的動員是機(jī)體自身修復(fù)的機(jī)制之一。

    目前,有許多研究探討了急性心肌梗死后干細(xì)胞的動員情況及影響因素,但是結(jié)果各有不同[5-6]。本研究發(fā)現(xiàn)接受急診PCI的心?;颊咄庵苎狢D34+、CD117+及CD34/CD117+干細(xì)胞在心梗后亦逐漸升高,在第3天最為明顯。提示心肌細(xì)胞缺血壞死所引起的干細(xì)胞動員可能需要一定時間才能使干細(xì)胞在外周血中達(dá)到高峰。急診PCI是否會影響干細(xì)胞動員高峰時間或可使其動員高峰前移還需進(jìn)一步的觀察。本研究還發(fā)現(xiàn)急診PCI的心梗患者12h的CD34+細(xì)胞低于對照組,CD117+、CD117/CD34+與對照組無明顯差異。

    急性心肌梗死時冠狀動脈斑塊破裂,局部血栓形成阻斷血流,造成心肌細(xì)胞缺血壞死,及時盡早行PCI治療可使罪犯血管再通,減少梗死面積。支架的置入會損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞繼之會修復(fù)并覆蓋支架的表面,支架置入損傷內(nèi)皮及內(nèi)皮修復(fù)的過程可能會消耗循環(huán)中的內(nèi)皮前體細(xì)胞。同時血管再通后亦有更多的干細(xì)胞到達(dá)缺血心肌局部,這都會使之在外周血中降低。另外,心肌缺血壞死及急診PCI后的再灌注損傷會釋放大量的促炎及抗炎因子,這些因子是否會損傷干細(xì)胞目前還不得而知。這可能是急診PCI術(shù)的心?;颊咄庵苎狢D34+細(xì)胞減少的原因。

    有許多因素影響心梗后干細(xì)胞的動員。年齡是常被研究的因素。Turan等[7]發(fā)現(xiàn)心?;颊唠S著年齡的增長,外周血CD34/45+及CD133/45+細(xì)胞有明顯的降低。Chang等[8]發(fā)現(xiàn)年輕健康者的干細(xì)胞數(shù)明顯高于急性心?;颊摺9谛牟∥kU因素也常與動員的干細(xì)胞有關(guān),Turan等[7]研究提示心梗患者冠心病危險因素的多少與外周血中的干細(xì)胞成負(fù)相關(guān)關(guān)系,但本研究的結(jié)果與之相反。本研究只分析了3個危險因素,是否因素過少,還是急診PCI的影響,亦或存在其他因素的影響,目前還須探討。急性心肌梗死患者常并存多種疾病及應(yīng)用多種藥物,各種因素之間互相影響,這可能都會影響干細(xì)胞的動員情況。

    本研究發(fā)現(xiàn)行急診PCI的急性心肌梗死患者外周血CD34+及CD117+干細(xì)胞動員高峰時間在心梗后第3天,急診PCI后短期內(nèi)的CD34+干細(xì)胞低于健康對照患者,提示接受急診PCI的心?;颊吒杉?xì)胞的動員情況不同于未行急診PCI的患者。

    [1]中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會,中華心血管病雜志編輯委員會.急性ST段抬高型心肌梗死診斷及治療指南[J].中華心血管病雜志,2010,38(8):675-687.

    [2]Leone A M,Rutella S,Bonanno G,et al.Mobilization of bone marrow-derived ste m cells after myocar dial infarction and left ventricular function[J].Eur Heart J,2005,26(12):1196-1204.

    [3]Wojakowski W,Tendera M,Zebzda A,et al.Mobilization of CD34(+),CD117(+),CXCR4(+),c-met(+)stem cells is correlated with left ventricular ejection fraction and plas ma NT-pro BNP levels in patients with acute myocardial infarction[J].Eur Heart J,2006,27(3):283-289.

    [4]Wojakowski W,Tendera M,Michalowska A,et al.Mobilization of CD34/CXCR4+,CD34/CD117+,c-met+ste m cells,and mononuclear cells expressing early cardiac,muscle,and endothelial mar kers into peripheral blood in patients with acute myocardial infarction[J].Circulation,2004,110(20):3213-3220.

    [5]Shintani S,Murohara T,Ikeda H,et al.Mobilization of endothelial progenitor cells in patients with acute myocardial infarction[J].Circulation,2001,103(23):2776-2779.

    [6]Grund mann F,Scheid C,Braun D,et al.Differential increase of CD34,KDR/CD34,CD133/CD34 and CD117/CD34 positive cells in peripheral blood of patients with acute myocar dial infarction[J].Clin Res Car diol,2007,96(9):621-627.

    [7]Turan RG,Breh m M,.Koestering M,et al.Factors influencing spontaneous mobilization of CD34+and CD133+progenitor cells after myocardial infarction[J].Eur J Clin Invest,2007,37(11):842-851.

    [8]Chang LT,Yuen CM,Sun CK,et al.Role of stro mal cellderived factor-1alpha,level and value of circulating interleukin-10 and endothelial progenitor cells in patients with acute myocardial infarction under going pri mar y coronar y angioplasty[J].Circ J,2009,73(6):1097-1104.

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