急診PCI的急性心肌梗死患者外周血CD34＋、CD117＋及CD34/CD117＋干細(xì)胞的變化＊

陜西省人民醫(yī)院（西安710068） 鄧爭榮 張 穎 朱宏海 李尚儉 王軍奎 劉新宏 官功昌

本研究通過檢測行急診經(jīng)皮冠狀動脈介入（PCI）術(shù)的急性心肌梗死（A MI）患者外周血 CD34＋、CD117＋及CD34/CD117＋干細(xì)胞數(shù)，探討A MI患者干細(xì)胞自體動員情況及可能的影響因素。

對象和方法

1 研究對象 36例AMI患者，均在發(fā)病12h之內(nèi)并成功行急診PCI術(shù)，使梗死相關(guān)動脈血流TI MI3級，所有患者均給予低分子肝素、阿司匹林、氯吡格雷及他汀類調(diào)脂藥等標(biāo)準(zhǔn)治療。心?；颊邼M足中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會制定的2010年急性ST段抬高型心肌梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］。排除：近期患有急慢性感染性疾病，自身免疫性疾病，腫瘤，嚴(yán)重肝腎疾病，使用類固醇藥物。選擇15例經(jīng)冠狀動脈造影排除冠心病的患者為對照組，排除標(biāo)準(zhǔn)與心梗組一致。兩組一般資料比較見附表。兩組在年齡、性別、BMI，冠心病危險因素、尿酸及血脂水平方面均無明顯差別。A MI組入院時外周血白細(xì)胞及中性粒細(xì)胞數(shù)明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0．05）。

2 方 法 ①流式細(xì)胞儀檢測CD34＋、CD117＋及CD34/CD117＋干細(xì)胞的水平：A MI患者在入院12h內(nèi)，第3、5天凌晨，對照組患者于入院次日凌晨，均采集外周靜脈血5 ml，置入EDTA抗凝管內(nèi)，4h之內(nèi)行流式細(xì)胞儀分析。將100μl抗凝血加入流式試管內(nèi)，混勻后加入20μl雙標(biāo)同型對照、FITC－CD34熒光抗體及熒光素藻紅蛋白PE－CD117熒光抗體（購自美國Southern Biotech公司，Mouse Anti－Hu man CD34－FITC，CD117/C－kit－PE），室溫下避光保存20 min，加入紅細(xì)胞裂解液2 ml，渦旋混勻，避光待管內(nèi)液體透亮后離心棄去上清，加入2 ml PBS液，渦旋混勻離心后棄去上清。加入0．5 ml PBS液混勻，4℃避光上流式細(xì)胞儀檢測（BD FACSCalibur，BD公司）。檢測結(jié)果以占淋巴細(xì)胞亞群的百分率來表示。②其他指標(biāo)測定：A MI患者在入院12h內(nèi)行CK－MB、肌鈣蛋白I測定，所有入選患者均行血常規(guī)、血脂及血尿酸等檢測。A MI患者在心梗后第7天行心臟超聲測定，測定射血分值（EF）等值。

附表 兩組患者臨床基本情況

3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS15．0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。多組間比較用方差分析，計數(shù)資料的比較用χ2檢驗。兩變量之間的關(guān)系采用直線回歸和相關(guān)分析。一個變量與多個因素之間的關(guān)系采用多元回歸分析。檢測水平為雙側(cè)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

1 外周血CD34＋、CD117＋及CD34/CD117＋干細(xì)胞檢測結(jié)果 A MI患者入院12h內(nèi)的外周血CD34＋細(xì)胞為4．21±3．66%，對照組為8．47±5．29%，對照組明顯高于 AMI患者（P＜0．05）；A MI患者第3天及第5天的CD34＋細(xì)胞均有所升高，分別為9．98±5．36%及6．28±4．76%，第3天時最為明顯，明顯高于發(fā)病12h內(nèi)的CD34＋細(xì)胞（P＜0．05），但與對照組相比無明顯差異。A MI患者入院12h內(nèi)的外周血CD117＋細(xì)胞為1．16±0．77%，第3天和第5天均有所升高，分別為1．54±0．27%及1．4±1．05%，對照組為0．82±0．22%，第3天的CD117＋細(xì)胞明顯高于對照組（P＜0．05）。AMI患者在入院后各時間點的CD34/CD117＋細(xì)胞分別為0．30±0．33%，0．41±0．39%及0．39±0．31%，對照組為0．18±0．11%，A MI患者均略高于對照組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

2 急性心肌梗死患者外周血干細(xì)胞與心肌壞死標(biāo)志物及EF值的關(guān)系 通過相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)急性心肌梗死患者各時間點的外周血 CD34＋、CD117＋及CD34/CD117＋干細(xì)胞與發(fā)病12h內(nèi)的CK－MB水平、肌鈣蛋白水平及超聲EF值之間均無明顯相關(guān)性。

3 影響A MI患者外周血干細(xì)胞的因素 應(yīng)用多元回歸分析年齡、冠心病危險因素個數(shù)（包括吸煙、高血壓及糖尿?。⒐诿}病變支數(shù)、外周血白細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、CK－MB及肌鈣蛋白與心梗后各時間點的CD34＋、CD117＋及CD34/CD117＋干細(xì)胞之間的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)冠心病危險因素個數(shù)與心梗12h內(nèi)的CD34＋干細(xì)胞數(shù)有明顯相關(guān)性（Beta＝0．457，P＝0．019），余變量之間均無明顯相關(guān)性。

討 論

急性心肌梗死時，心肌細(xì)胞缺血壞死，發(fā)生炎性反應(yīng)，刺激機(jī)體釋放大量的炎性因子及細(xì)胞因子，這些因子會促使自身干細(xì)胞的動員。心梗后升高的CD34＋等細(xì)胞有益于梗死后心室重塑［2］，與左室功能有正相關(guān)關(guān)系［3］。不僅心梗后干細(xì)胞數(shù)量升高，而且可表達(dá)早期心肌、肌肉及內(nèi)皮細(xì)胞的標(biāo)志［4］?？梢娂毙孕募」Ｋ勒T發(fā)的自身干細(xì)胞的動員是機(jī)體自身修復(fù)的機(jī)制之一。

目前，有許多研究探討了急性心肌梗死后干細(xì)胞的動員情況及影響因素，但是結(jié)果各有不同［5－6］。本研究發(fā)現(xiàn)接受急診PCI的心?；颊咄庵苎狢D34＋、CD117＋及CD34/CD117＋干細(xì)胞在心梗后亦逐漸升高，在第3天最為明顯。提示心肌細(xì)胞缺血壞死所引起的干細(xì)胞動員可能需要一定時間才能使干細(xì)胞在外周血中達(dá)到高峰。急診PCI是否會影響干細(xì)胞動員高峰時間或可使其動員高峰前移還需進(jìn)一步的觀察。本研究還發(fā)現(xiàn)急診PCI的心梗患者12h的CD34＋細(xì)胞低于對照組，CD117＋、CD117/CD34＋與對照組無明顯差異。

急性心肌梗死時冠狀動脈斑塊破裂，局部血栓形成阻斷血流，造成心肌細(xì)胞缺血壞死，及時盡早行PCI治療可使罪犯血管再通，減少梗死面積。支架的置入會損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞繼之會修復(fù)并覆蓋支架的表面，支架置入損傷內(nèi)皮及內(nèi)皮修復(fù)的過程可能會消耗循環(huán)中的內(nèi)皮前體細(xì)胞。同時血管再通后亦有更多的干細(xì)胞到達(dá)缺血心肌局部，這都會使之在外周血中降低。另外，心肌缺血壞死及急診PCI后的再灌注損傷會釋放大量的促炎及抗炎因子，這些因子是否會損傷干細(xì)胞目前還不得而知。這可能是急診PCI術(shù)的心?；颊咄庵苎狢D34＋細(xì)胞減少的原因。

有許多因素影響心梗后干細(xì)胞的動員。年齡是常被研究的因素。Turan等［7］發(fā)現(xiàn)心?；颊唠S著年齡的增長，外周血CD34/45＋及CD133/45＋細(xì)胞有明顯的降低。Chang等［8］發(fā)現(xiàn)年輕健康者的干細(xì)胞數(shù)明顯高于急性心?；颊摺９谛牟∥ｋU因素也常與動員的干細(xì)胞有關(guān)，Turan等［7］研究提示心梗患者冠心病危險因素的多少與外周血中的干細(xì)胞成負(fù)相關(guān)關(guān)系，但本研究的結(jié)果與之相反。本研究只分析了3個危險因素，是否因素過少，還是急診PCI的影響，亦或存在其他因素的影響，目前還須探討。急性心肌梗死患者常并存多種疾病及應(yīng)用多種藥物，各種因素之間互相影響，這可能都會影響干細(xì)胞的動員情況。

本研究發(fā)現(xiàn)行急診PCI的急性心肌梗死患者外周血CD34＋及CD117＋干細(xì)胞動員高峰時間在心梗后第3天，急診PCI后短期內(nèi)的CD34＋干細(xì)胞低于健康對照患者，提示接受急診PCI的心?；颊吒杉?xì)胞的動員情況不同于未行急診PCI的患者。

［1］中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會，中華心血管病雜志編輯委員會．急性ST段抬高型心肌梗死診斷及治療指南［J］．中華心血管病雜志，2010，38（8）：675－687．

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［5］Shintani S，Murohara T，Ikeda H，et al．Mobilization of endothelial progenitor cells in patients with acute myocardial infarction［J］．Circulation，2001，103（23）：2776－2779．

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［7］Turan RG，Breh m M，．Koestering M，et al．Factors influencing spontaneous mobilization of CD34＋and CD133＋progenitor cells after myocardial infarction［J］．Eur J Clin Invest，2007，37（11）：842－851．

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