莫匹羅星噴霧劑治療大鼠燙傷

蘇 勍，范 瑩，孔凡貞

莫匹羅星噴霧劑是以莫匹羅星為主藥，加入成膜材料甲殼素和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）制成的治療皮膚燙傷的藥物。本實(shí)驗(yàn)旨在觀測(cè)其對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠燙傷創(chuàng)面愈合的影響?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康成年Wistar大鼠，雌雄各半，體重220~250 g，由山東青島藥品檢驗(yàn)所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 藥物與試劑 莫匹羅星噴霧劑，自制，每mL中含莫匹羅星20 mg；莫匹羅星軟膏，天津中美史克制藥公司生產(chǎn)。

1.3 淺Ⅱ度、深Ⅱ度燙傷大鼠模型的建立[1]按文獻(xiàn)介紹方法將大鼠用3%的異戊巴比妥鈉（35 mg/kg體重）腹腔注射麻醉后，用10%的硫化鈉腹部脫毛，24 h后，用長直鉗夾住40層的紗布（4 cm×4 cm）浸入熱水中，待水溫恒定于99℃時(shí)，取出，立即平鋪于隔熱板上，其上有3 cm×3 cm孔洞以確定待燙部位，以紗布接觸大鼠皮膚后開始計(jì)時(shí)，燙傷時(shí)間分別為6、12 s，傷后單籠飼養(yǎng)。24 h后取創(chuàng)面組織切片，經(jīng)染色證實(shí)燙傷程度。以建立淺Ⅱ度、深Ⅱ度大鼠燙傷模型。

從大體形態(tài)學(xué)上觀察，燙傷后大鼠創(chuàng)面與正常組織的分界明顯，創(chuàng)面明顯高出正常皮膚。隨著燙傷時(shí)間的延長，創(chuàng)面潮濕、顏色由白至灰白。正常皮膚經(jīng)過HE染色后，可見清晰有序的表皮、真皮以及皮下組織。燙傷6 s的大鼠，其創(chuàng)面色澤稍發(fā)白，肉眼可以區(qū)分燙傷部位與正常區(qū)域，24 h后創(chuàng)面色澤逐漸加深，輕度腫脹。48 h可見與創(chuàng)面相同的痂。病理發(fā)現(xiàn)表皮層次減少，表皮和真皮之間有水皰形成。符合淺Ⅱ度燙傷創(chuàng)面特征。燙傷12 s的大鼠，創(chuàng)面皮膚立即變白，輕度腫脹，肉眼可明顯區(qū)分燙傷部位與正常區(qū)域。24h后創(chuàng)面色澤加深，邊界清析。48 h可見與創(chuàng)面相同的痂。病理發(fā)現(xiàn)表皮層細(xì)胞及毛囊上皮細(xì)胞核固縮，真皮組織深部受損，但皮下深部可見殘余的毛囊，病變符合深Ⅱ度燙傷創(chuàng)面特征。

1.4 試驗(yàn)分組 將48只大鼠隨機(jī)分成6組，8只/組，分別為淺Ⅱ度燙傷、深Ⅱ度燙傷組，相應(yīng)模型的莫匹羅星噴霧劑組、莫匹羅星軟膏組和空白對(duì)照組。所有動(dòng)物用0.3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，按照各組給藥配方給藥，莫匹羅星噴霧劑組，莫匹羅星軟膏組和空白對(duì)照組給藥2次/d。

1.5 檢測(cè)指標(biāo)及方法 記錄各組創(chuàng)面愈合時(shí)間，并于傷后7、14、21 d觀察并描繪記錄創(chuàng)面皮膚的愈合率。創(chuàng)面愈合時(shí)間和創(chuàng)面愈合率：模型制備后，每日觀察大鼠的活動(dòng)狀況并按Nagelschmidt法計(jì)算各時(shí)相點(diǎn)創(chuàng)面愈合率：用透明的稱量紙（5 cm×5 cm，重量平均約為0.1048 g）覆蓋在大鼠腹部創(chuàng)面，將創(chuàng)面邊緣描繪在透明的稱量紙上，剪去多余紙邊，稱重，按下面公式計(jì)算創(chuàng)面面積：創(chuàng)面面積=（5 cm×5 cm×紙片重）/0.1048 g，記錄創(chuàng)面面積及脫痂長毛時(shí)間，并按下面公式計(jì)算創(chuàng)面愈合率：創(chuàng)面愈合率（%）=（原始創(chuàng)面面積-未愈合創(chuàng)面面積）/原始創(chuàng)面面積×100%

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，用t檢驗(yàn)比較組間差異。

2 結(jié) 果

用藥組創(chuàng)面腫脹、滲出程度較對(duì)照組輕。傷后創(chuàng)面干燥結(jié)痂，痂皮呈淡黃色，質(zhì)地較軟，無異常分泌物及感染，能夠較快的促進(jìn)創(chuàng)面上皮和肉芽的發(fā)生，限制瘢痕的形成，促進(jìn)壞死組織的脫落，促進(jìn)創(chuàng)面的愈合。用藥組創(chuàng)面愈合時(shí)間明顯縮短，相同時(shí)間內(nèi)創(chuàng)面愈合率顯著高于模型組，與陽性對(duì)照組相比無顯著性差異，但創(chuàng)面愈合時(shí)間和相同時(shí)間內(nèi)創(chuàng)面愈合率略優(yōu)于陽性對(duì)照組。見表1、2。

表 1 莫匹羅星噴霧劑治療淺Ⅱ度及深Ⅱ度燙傷大鼠創(chuàng)面愈合時(shí)間（x±s）

3 討 論

實(shí)用的動(dòng)物燙傷模型是研究燙傷藥物和治療方法的前提。目前文獻(xiàn)報(bào)道的用于燙傷的動(dòng)物多為嚙齒類動(dòng)物如小鼠和大鼠、家兔等，因此筆者選擇的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大鼠。已有的文獻(xiàn)顯示燙傷模型制作方法、采用的燙傷溫度與持續(xù)時(shí)間各不相同，對(duì)各度燙傷時(shí)間界限的界定也不標(biāo)準(zhǔn)；而且在燙傷實(shí)驗(yàn)中，創(chuàng)面燙傷程度除了與溫度和持續(xù)時(shí)間相關(guān)，還受壓力因素的影響。由于目前多采用加熱鐵板、銅板、燙傷器等方法造成燙傷，此類燙傷用物的致傷部位為一堅(jiān)硬的平面，與動(dòng)物圓形的體型皮膚表面不相吻合，因此只能通過施加壓力，使皮膚形成一平面，這在燙傷過程中勢(shì)必使皮膚弧面頂點(diǎn)先受熱力損傷，最后是弧面的最低點(diǎn)。這種熱力致傷過程的不平衡性導(dǎo)致創(chuàng)面燙傷程度深淺不一。經(jīng)查閱文獻(xiàn)[1]，筆者最終選用紗布作為燙傷用物，主要是由于紗布柔軟，容易變形，浸滿熱水后，可利用熱水的重力作用使其與皮膚弧面緊貼，而無需再施以壓力，并且繃緊的紗布在致傷過程中不會(huì)起皺，這均有利于降低系統(tǒng)誤差。

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是燙傷創(chuàng)面感染的主要菌株之一，莫匹羅星對(duì)MRSA高度敏感,與其它抗生素?zé)o交叉耐藥性，因該藥口服、肌肉注射、靜脈注射后在血漿中迅速分解而失活，血漿半衰期<30 min，故僅適用于局部應(yīng)用，可作為燙傷創(chuàng)面MRSA感染，尤其是MRSA感染的首選局部抗菌藥物[2]。

甲殼素是一種可再生高分子天然多糖，來源廣泛，安全性好，該物質(zhì)具有天然的抗菌活性，抗菌譜較廣，對(duì)革蘭陽性菌、陰性菌及白色念珠菌均有明顯的抑殺效果。國內(nèi)外研究已證明，甲殼素有明顯的促進(jìn)傷口肉芽組織生長，提高愈合速度作用，能促進(jìn)內(nèi)皮生長，減少纖維組織增生和瘢痕形成。用于治療外傷、燒傷和褥瘡均獲得滿意的效果[3-5]。

莫匹羅星外用制劑目前在國內(nèi)僅有軟膏劑上市，主要針對(duì)治療皮膚外傷感染，用于治療燒燙傷時(shí)有給藥不便、刺激性大、劑量難以把握等缺點(diǎn)，而制成噴霧劑則可避免這些缺點(diǎn)。甲殼素具有良好的生物相容性、柔韌性、成膜性，是適宜的噴霧劑載體，并且與莫匹羅星有相似的抗菌作用。將甲殼素與莫匹羅星共同制成噴霧劑用于治療燒燙傷，使用后可迅速在創(chuàng)面表面成膜，使用方便，給藥量易于控制，刺激性小，對(duì)創(chuàng)面起保護(hù)作用，并且可以延緩莫匹羅星藥物的釋放，增強(qiáng)其抗菌作用，是理想的治療燒燙傷藥物。

[1]Wistar.大鼠Ⅱ度燙傷模型的建立[J].護(hù)理研究，2003，17（6A）：624-626.

[2]李孝建，劉 樺.莫匹羅星對(duì)大面積燒傷后殘余創(chuàng)面感染的療效[J]. 中華醫(yī)院感染雜志，2000，10(2)：1215.

[3]Uchida Y.Antibacterial activity of chitin and chitosan[J].Gekkan Fudo Kemikran,1988,(4)：22.

[4]Muzzarelli RAA,Tarsi R,Filippini O,et al.Antimicrobial properties of N-carboxybutyl chitosan,antimicro[J].Agents Chemother,1990,34(10)：2019-2023.

[5]王愛勤，薛佐良，趙敏生，等.醫(yī)用殼聚糖膜的制備與性能研究[J].北京生物醫(yī)學(xué)工程，1996，15(1)：40-51.