餌料對(duì)日本烏賊幼體生長(zhǎng)及成活率的影響

王躍斌，孫 忠，王偉定，陸建學(xué)

（1.浙江海洋學(xué)院海洋與漁業(yè)研究所，浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江舟山 316100；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)部東海與遠(yuǎn)洋漁業(yè)資源開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 200090）

日本烏賊Sepiella japonica俗名墨斗魚(yú)、海貓，屬頭足綱、二鰓亞綱、十腕目、烏賊科、無(wú)針烏賊屬，與曼氏無(wú)針烏賊Sepiella maindroni屬同種異名，為淺海洄游性頭足類，在我國(guó)福建、浙江沿海水域廣泛分布[1-2]。其肉質(zhì)鮮美，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，而內(nèi)骨骼及其提取物具有止血、保健等藥用價(jià)值，曾是我國(guó)四大漁業(yè)支柱產(chǎn)業(yè)之一[3-5]。自20世紀(jì)80年代以來(lái)，由于過(guò)度捕撈、環(huán)境污染等影響，日本烏賊的產(chǎn)量急劇下降，至今已近衰竭。為振興海洋經(jīng)濟(jì)，保護(hù)物種，進(jìn)行日本烏賊人工繁育技術(shù)的研究已迫在眉睫。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者就日本烏賊的資源調(diào)查、生態(tài)習(xí)性、養(yǎng)殖繁育、營(yíng)養(yǎng)分析等方面進(jìn)行了研究[6-14]，但有關(guān)日本烏賊幼苗的開(kāi)口餌料和幼體餌料的研究報(bào)道卻較少[15]，其中以蒙古裸腹溞為開(kāi)口餌料更是鮮有報(bào)道。本文分別以烏賊初孵幼體和不同規(guī)格烏賊幼體為研究對(duì)象，以豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體、橈足類和蒙古裸腹溞及其不同組合為開(kāi)口餌料，比較研究其對(duì)日本烏賊初孵幼體生長(zhǎng)成活的影響；以糠蝦、冰鮮小鯧魚(yú)、配合飼料為餌料分別投喂兩種不同規(guī)格的日本烏賊幼體的效果，以期為人工繁育的餌料選擇提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

日本烏賊親體為海捕自然親體，經(jīng)室內(nèi)人工培育獲得受精卵。試驗(yàn)的幼體為同一對(duì)烏賊產(chǎn)卵，經(jīng)孵化出膜后培育1～2 d的初孵幼體，平均胴長(zhǎng)為3.28±0.5 mm（n=20），數(shù)量300只，用于開(kāi)口餌料試驗(yàn)。餌料試驗(yàn)所用日本烏賊幼體由人工育苗獲得。挑選2種規(guī)格的烏賊幼體作為試驗(yàn)幼體，小規(guī)格烏賊幼體胴長(zhǎng)為9.7±0.3 mm（n=20），數(shù)量 300 只；大規(guī)格烏賊幼體胴長(zhǎng)為 30.1±0.5 mm（n=20），數(shù)量 300 只。所用烏賊均為同一批孵化出膜幼體。

烏賊培育和生物餌料培養(yǎng)用水均為沙濾自然海水，鹽度 21～28，pH 8.00～8.10，水溫 27.5～31.4 ℃。試驗(yàn)容器為40 cm×40 cm×20 cm的泡沫箱，容積約為30 L。餌料試驗(yàn)于2009年7-8月在浙江省海水增養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室基地進(jìn)行。養(yǎng)殖用水為經(jīng)過(guò)沙濾的天然海水，鹽度為26～28，水溫為26～29℃。試驗(yàn)容器為1 000 L容積的聚乙烯塑料水槽。

橈足類采捕自基地的海水圍塘，并用40目和80目篩網(wǎng)分級(jí)過(guò)濾，體長(zhǎng)為0.82～0.91 mm；豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體為市售鹵蟲(chóng)卵孵化所得，體長(zhǎng)為 0.30～0.35 mm；蒙古裸腹溞為人工培養(yǎng)，體長(zhǎng)為 1.0～1.2 mm。將所獲的3種生物餌料分別暫養(yǎng)于培養(yǎng)桶中，用小球藻強(qiáng)化培養(yǎng)6～12 h后待用?？肺r采自基地的海水養(yǎng)殖池塘，體長(zhǎng)為5～8 mm；取新鮮冰凍小鯧魚(yú)魚(yú)肉，剪成長(zhǎng)約1 cm、直徑約4～6 mm的肉條備用；配合飼料由寧波天邦股份有限公司提供的魚(yú)用顆粒飼料，粒徑2～3 mm，緩沉性，粗蛋白質(zhì)含量48%，粗脂肪含量12%，粗纖維5%，粗灰分18%。

1.2 試驗(yàn)方法

開(kāi)口餌料試驗(yàn)共分5組，分別為豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體組、橈足類+豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體組、蒙古裸腹溞組、蒙古裸腹溞+豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體組和蒙古裸腹溞+橈足類組，每組各設(shè)3個(gè)重復(fù)，共15只泡沫箱。試驗(yàn)周期為14 d。試驗(yàn)開(kāi)始前從暫養(yǎng)幼體中每次隨機(jī)取15只，稱重，隨機(jī)置于1個(gè)泡沫箱，并加1只氣石，連續(xù)24 h充氣。初孵幼體初始平均體重為18.00±1.5 mg。試驗(yàn)期間每天投餌1次，投餌量視當(dāng)日攝食和殘餌情況適當(dāng)調(diào)整。日換水1次，換水量為1/2，并及時(shí)清理培養(yǎng)容器內(nèi)的死亡個(gè)體。每日測(cè)量水溫、鹽度、pH，檢查各組烏賊的活動(dòng)、攝食等情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將每個(gè)試驗(yàn)水槽的烏賊幼體群體稱重，測(cè)量烏賊個(gè)體胴長(zhǎng)，并計(jì)算成活率、增長(zhǎng)率和增重率。

餌料試驗(yàn)選用大小2種規(guī)格的烏賊幼體，每種規(guī)格的幼體設(shè)3組，分別投喂糠蝦、魚(yú)肉、配合飼料，每組設(shè)2個(gè)重復(fù)，共用12個(gè)試驗(yàn)水槽。每個(gè)水槽飼養(yǎng)50只烏賊幼體。試驗(yàn)周期為15 d。試驗(yàn)開(kāi)始前先停食24 h，隨后從同種規(guī)格幼體中每次隨機(jī)取100只，稱重，隨機(jī)置于1個(gè)水槽內(nèi)，大規(guī)格幼體平均體重為3.0±0.1 g，小規(guī)格幼體平均體重為 0.29±0.03 g。試驗(yàn)期間每天分 5 次（05:00、08:00、11:00、14:00 和 17:00）投喂試驗(yàn)幼體，根據(jù)當(dāng)日攝食情況調(diào)整日投喂量。投喂結(jié)束30 min后，清理殘餌和糞便。每天換水2次（07:00和16:00），每次換水量為90%。試驗(yàn)期間每天測(cè)量水溫，每周測(cè)量溶氧（試驗(yàn)期間為6.1～8.2 mg/L），及時(shí)清理水槽內(nèi)的死亡個(gè)體。試驗(yàn)結(jié)束前停食24 h，每個(gè)試驗(yàn)水槽的烏賊幼體群體稱重，并從中隨機(jī)抽取10只測(cè)量胴長(zhǎng)，若水槽中存活幼體不足10只，則全部取樣測(cè)量胴長(zhǎng)。

2 結(jié)果與分析

2.1 開(kāi)口餌料

開(kāi)口餌料的試驗(yàn)結(jié)果匯總于圖1和表1。由圖1可見(jiàn)，不同餌料組日本烏賊初孵的成活率從高到低依次為，裸腹溞+橈足類組＞裸腹溞組＞裸腹溞+豐年蟲(chóng)組＞橈足類+豐年蟲(chóng)組＞豐年蟲(chóng)組。豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體組的初孵幼體全部死亡；裸腹溞+橈足類組成活率顯著高于其他組（P＜0.05），而其余3組成活率的組間差異不顯著（P＜0.05）。

由表1可見(jiàn)，裸腹溞+橈足類組的增長(zhǎng)率顯著高于其它3 組（P＜0.05），而橈足類+豐年蟲(chóng)組的增長(zhǎng)率則顯著低于其它3組（P＜0.05）。裸腹溞組和裸腹溞+豐年蟲(chóng)組間的增長(zhǎng)率無(wú)顯著差異（P＜0.05）。各餌料組間的增重率沒(méi)有顯著性差異（P＜0.05），從高到低依次為裸腹溞+橈足類＞裸腹溞+豐年蟲(chóng)＞裸腹溞＞橈足類+豐年蟲(chóng)。

圖1 不同餌料組烏賊幼體的成活率（%）Fig.1 Survival rate of Sepiella japonica larvae in different diets（%）

表1 不同開(kāi)口餌料對(duì)烏賊幼體生長(zhǎng)的影響Tab.1 Effect of different diets on the growth performance of Sepiella japonica larvae

2.2 餌料試驗(yàn)

餌料試驗(yàn)結(jié)果匯總于圖2～4。從圖2可見(jiàn)，糠蝦組的烏賊幼體存活率最高（54%～82%），其次為鯧魚(yú)肉組（18%～40%），配合飼料組的烏賊幼體存活率最低（6%～10%）。不同規(guī)格烏賊幼體的存活率也不同，在同一餌料組中，大規(guī)格幼體存活率均高于小規(guī)格幼體。

從圖3可見(jiàn)，同一餌料組中，小規(guī)格烏賊幼體增重率均高于大規(guī)格烏賊幼體。對(duì)于小規(guī)格烏賊幼體，鯧魚(yú)肉組的增重率最高（1 306%），其次為糠蝦組（1 130%），增重率最低的為配合飼料組（984%）；對(duì)于大規(guī)格烏賊幼體，增重率最高的為糠蝦組（301%），鯧魚(yú)肉組和配合飼料組的增重率則依次降低，分別為201%和107%。

從圖4可見(jiàn)，不同規(guī)格的烏賊幼體，其平均旬生長(zhǎng)也不同。在同一餌料組中，小規(guī)格賊幼體的平均旬生長(zhǎng)均高于大規(guī)格幼體。小規(guī)格幼體的平均旬生長(zhǎng)由高到低排列為鯧魚(yú)肉組＞糠蝦組＞配合飼料組，分別為 14.7 mm、13.8 mm、11.1 mm；大規(guī)格幼體的平均旬生長(zhǎng)由高到低排列為糠蝦組＞鯧魚(yú)肉組＞配合飼料組，分別為 11.0 mm、7.8 mm、3.5 mm。

圖2 烏賊幼體的存活率（%）Fig.2 Survival rate of S.japonica larvae（%）

圖3 烏賊幼體的增重率（%）Fig.3 Weight gain rate of S.japonica larvae（%）

圖4 烏賊幼體的平均旬生長(zhǎng)（mm）Fig.4 Mantle length every ten days of S.japonica larvae（mm）

3 討論

餌料是機(jī)體維持生命的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，也是物種人工繁育中最重要的環(huán)節(jié)。餌料的選擇通常從三個(gè)方面來(lái)綜合考慮：一是可食性，選擇的餌料必須是機(jī)體能夠攝取的，就烏賊初孵幼體而言，通常選擇適口的浮游動(dòng)物為開(kāi)口餌料。二是營(yíng)養(yǎng)的均衡性，不同的餌料其營(yíng)養(yǎng)成份的組成不同，這些營(yíng)養(yǎng)成份是否能完全滿足生物的生長(zhǎng)、發(fā)育所需。三是獲得的便利性，一種營(yíng)養(yǎng)全面的餌料，但在培養(yǎng)或獲取非常困難時(shí)，在生產(chǎn)上往往也難以應(yīng)用。

3.1 不同開(kāi)口餌料對(duì)初孵烏賊幼體的影響

從本試驗(yàn)的結(jié)果可知，對(duì)于日本烏賊而言，蒙古裸腹溞、橈足類和豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體3種生物餌料的飼養(yǎng)效果是依次遞減的，而蒙古裸腹溞與其他兩種生物餌料混合投喂效果均優(yōu)于單獨(dú)投喂蒙古裸腹溞，這可能與不同餌料間的營(yíng)養(yǎng)差異有關(guān)。

有研究認(rèn)為，鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體缺乏高度不飽和脂肪酸，尤其是生物生長(zhǎng)發(fā)育所必須的DHA，大量投喂鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體會(huì)影響生物的成活率，而且分離鹵蟲(chóng)卵卵殼、死卵的工作量大，分離不徹底也會(huì)影響攝食和成活[16]。本試驗(yàn)期間，投喂的豐年蟲(chóng)幼體僅用藻類強(qiáng)化，結(jié)果單獨(dú)投喂日本烏賊大量死亡，這一結(jié)果與之前學(xué)者的結(jié)論相一致。在育苗生產(chǎn)中，豐年蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體不宜單獨(dú)長(zhǎng)時(shí)間使用，而應(yīng)與輪蟲(chóng)、橈足類等餌料搭配使用，而且投喂前應(yīng)進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化，以增加其DHA含量。

蒙古裸腹溞和橈足類適宜作為烏賊幼體的開(kāi)口餌料，但在存活率上仍然較低。這與試驗(yàn)后期水溫高、培養(yǎng)水體小、環(huán)境因子變化幅度大等有關(guān)。在培養(yǎng)殖過(guò)程中，如何控制環(huán)境因子變化，控制投喂量，防止水質(zhì)惡化，以提高培養(yǎng)成活率，這將是日本烏賊生產(chǎn)性育苗今后研究的重點(diǎn)。

3.2 餌料對(duì)不同規(guī)格烏賊幼體的影響

由于日本烏賊性喜活餌，在其生產(chǎn)中大多使用鮮活餌料或冰鮮雜魚(yú)飼養(yǎng)，但這2種餌料均有儲(chǔ)運(yùn)不便、養(yǎng)殖污染嚴(yán)重、成本較高等諸多弊端。因此，開(kāi)發(fā)高效廉價(jià)的配合飼料是實(shí)現(xiàn)日本烏賊大規(guī)模集約化養(yǎng)殖的關(guān)鍵技術(shù)。從本試驗(yàn)的結(jié)果可知，配合飼料組的烏賊生長(zhǎng)及存活率均為最低。李正等[15]研究指出，非烏賊專用配合飼料營(yíng)養(yǎng)不足且不均衡，不能滿足烏賊生長(zhǎng)發(fā)育，甚至可能含有過(guò)量抑制烏賊生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)；喜食活餌的攝食天性，使得烏賊攝食配合飼料的馴化時(shí)間多于一般水產(chǎn)物種。除此之外，本文每個(gè)水槽的烏賊飼養(yǎng)數(shù)量為50只，密度相對(duì)較大，在長(zhǎng)時(shí)間的饑餓狀態(tài)下，可能會(huì)加劇烏賊相殘的狀況。這些因素可能是配合飼料飼養(yǎng)烏賊效果欠佳的主要原因。

生物在不同生長(zhǎng)階段，其最適餌料的種類也不盡相同。從本試驗(yàn)的結(jié)果可知，對(duì)于胴長(zhǎng)約為1 cm的烏賊幼體，糠蝦組的存活率最高，而小鯧魚(yú)肉組的生長(zhǎng)最好；對(duì)于胴長(zhǎng)約3 cm的烏賊幼體，糠蝦組的生長(zhǎng)及存活率都是最高的。無(wú)論投喂哪種餌料，大規(guī)格烏賊幼體的存活率均高于小規(guī)格烏賊幼體，而生長(zhǎng)速度則相反，小規(guī)格烏賊幼體的生長(zhǎng)要快于大規(guī)格烏賊幼體。一般情況下，選擇餌料的首要問(wèn)題是其可食性，適口性欠佳的餌料即使?fàn)I養(yǎng)豐富均衡，也難以被攝食利用。對(duì)于胴長(zhǎng)約為1 cm的烏賊幼體，野生鮮活糠蝦的適口性最佳，且營(yíng)養(yǎng)豐富，故其存活率最高，生長(zhǎng)效果也較好。冰鮮小鯧魚(yú)肉的適口性與糠蝦相比較差，故其存活率低于糠蝦組，但其生長(zhǎng)效果卻好于糠蝦。這可能是由于冰鮮小鯧魚(yú)肉的蛋白含量較高，其蛋白轉(zhuǎn)化效率可能高于糠蝦，而由于適口性較差導(dǎo)致的饑餓使得烏賊間的產(chǎn)生相殘情況，加劇個(gè)體大小分化，出現(xiàn)了存活率相對(duì)較低但生長(zhǎng)相對(duì)較好的狀況。對(duì)于胴長(zhǎng)約為3 cm的烏賊幼體，糠蝦的飼養(yǎng)效果最好，這符合烏賊喜食活餌的攝食天性。一般來(lái)說(shuō)，隨著年齡的增長(zhǎng)和體重的增加，生物對(duì)于各種不良因素的耐受性也逐漸增強(qiáng)，這與本試驗(yàn)結(jié)果相同，不論投喂何種餌料，大規(guī)格烏賊幼體的存活率均高于小規(guī)格烏賊幼體。

為保證飼養(yǎng)效果，在生產(chǎn)中應(yīng)注意不同階段的餌料選擇。根據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果，胴長(zhǎng)約為1 cm的日本烏賊，較為適宜的餌料是糠蝦。當(dāng)烏賊幼體胴長(zhǎng)超過(guò)3 cm時(shí)，可逐漸添加冰鮮魚(yú)肉進(jìn)行過(guò)渡，以便同時(shí)兼顧存活率和生長(zhǎng)效果。

[1]張 璽,齊鐘彥.貝類學(xué)綱要[M].北京:科學(xué)出版社,1961:289-350.

[2]ADAM W,REES W J.A review of the cephalopod family Sepiidae[J].Sci Rep John Murray Exped,1966,11:1-165.

[3]陳小娥.曼氏無(wú)針烏賊墨的主要營(yíng)養(yǎng)成分研究[J].浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2000,19(4):324-326.

[4]周 鋒.烏賊骨白及散治療上消化道出血39例[J].遼寧中醫(yī)雜志,2004,31(2):144.

[5]劉淑萍.烏賊墨抗腫瘤作用研究進(jìn)展[J].中國(guó)腫瘤,2005(3):171-173.

[6]吳常文,趙淑江,徐蝶娜.舟山漁場(chǎng)針烏賊(Sepia andreana)的生物學(xué)特性及其漁場(chǎng)分布變遷[J].海洋與湖沼,2006,37(3):231-237.

[7]?？姑?吳常文,呂振明,等.曼氏無(wú)針烏賊增養(yǎng)殖開(kāi)發(fā)與利用的研究進(jìn)展[J].中國(guó)水產(chǎn),2008(3):55-56.

[8]李星頡,戴鍵壽.烏賊資源增殖的有關(guān)問(wèn)題[J].浙江水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1986,5(2):105-107.

[9]郭 新,范廣鉆,郟國(guó)生.浙江近海曼氏無(wú)針烏賊食性的初步分析[J].浙江水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1986,5(2):171-175.

[10]戴建壽,宋麗珍.大陳漁場(chǎng)曼氏無(wú)針烏賊生殖期食性初步研究[J].浙江水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),1986,5(2):185-187.

[11]KOIDOY,KURATAY,KAWAKAMI T.Ecology on Sepia esculenta and Sepiella japonica caught in Tokyo Bay[J].Aquaculture,1956,3(3):10-50.

[12]NATSUKARI Y,TASHIRO M.Neritic squid resources and cuttlefish resources in Japan[J].Behaviour and Physiology,1991,18:149-226.

[13]鄭美麗,肖金華,鄭微云,等.曼氏無(wú)針烏賊的趨光特性[J].廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,1980,19(3):91-99.

[14]鄭小東,林祥志,王昭凱,等.日本無(wú)針烏賊全人工養(yǎng)殖條件下生活史研究[J].海洋湖沼通報(bào),2010(3):24-28.

[15]李 正,蔣霞敏,王春琳.餌料對(duì)曼氏無(wú)針烏賊幼體生長(zhǎng)、成活率及營(yíng)養(yǎng)成分的影響[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,22(6):436-441.

[16]謝仰杰,鄭金寶.餌料對(duì)真鯛稚幼魚(yú)存活和生長(zhǎng)的影響[J].臺(tái)灣海峽,1998,17(12):29-33.