歐亞鱸幼魚飼料中維生素C適宜含量的研究

吉林省長春市水產(chǎn)研究院 孫 麗 郭貴良

吉林農(nóng)業(yè)大學動物科技學院 韓宇田 蘆洪梅

吉林省東遼縣安西水庫 安長春

維生素C又名抗壞血酸，具有參與體內(nèi)氧化還原反應，在細胞抗氧化、膠原蛋白形成、機體免疫調(diào)節(jié)、鐵離子的吸收和轉(zhuǎn)運等方面起著重要作用。作為脯氨酸和賴氨酸羥化酶的輔酶參與膠原蛋白形成，對結締組織、創(chuàng)傷愈合時組織和骨骼的形成有重要作用，同時它能促進養(yǎng)殖動物快速生長、緩解應激、增強機體抗感染能力 （Wali等，2003；Merchie等，1996）。除少數(shù)魚類如鱘類、鯊魚和鰻等魚類具有合成維生素C的能力，但大多數(shù)魚類因體內(nèi)缺乏L-古酪糖酸內(nèi)酯氧化酶活性而不具備合成維生素C的能力，這些魚類必須從飼料中獲得維生素C才能滿足需要 （Dabrowski和Cierezko，2001）。歐亞鱸（Perca fluviatilis）屬鱸形目、鱸科、鱸屬、又稱河鱸、五道黑、五彩斑魚和赤鱸等。為肉食性兇猛魚類，廣泛分布于歐洲及亞洲北部冷溫帶，在我國僅產(chǎn)于新疆的額爾齊斯河、烏倫古河水域和博斯騰湖，是一種名貴的冷溫帶淡水名優(yōu)土著品種。該魚肉質(zhì)鮮嫩，爽滑少刺，富含人體必需氨基酸，富含蛋白質(zhì)，脂肪含量較低，是淡水魚類中的珍品，深受消費者青睞。具有廣鹽性和廣溫性、生長速度快，尤其適應常年水溫較低的水庫養(yǎng)殖和抗病力強等特點。歐亞鱸營養(yǎng)需要研究才剛起步，對其蛋白質(zhì)和蛋能比等營養(yǎng)需求有些報道 （Mathis等，2003；Fiogb 和 kestemontay，1996）。然而迄今為止未見其飼料中維生素C適宜含量的報道。本研究旨在了解歐亞鱸幼魚配合飼料中維生素C的適宜含量，為開發(fā)高效的配合飼料提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗用魚 試驗用歐亞鱸初始體重 （7.46±0.29）g，體質(zhì)健康，規(guī)格一致，購于河北石家莊特種養(yǎng)殖場。先放入暫養(yǎng)池中，挑選規(guī)格整齊、體質(zhì)健康的魚900尾，用食鹽水溶液消毒后，放養(yǎng)于室內(nèi)玻璃缸中。

1.2 試驗設計與試驗飼料 在基礎飼料中分別添加維生素 C 0、50、100、200、400、800 mg/kg，以微晶纖維素為填充劑，使各試驗組飼料其他營養(yǎng)水平保持一致，不添加維生素C的基礎飼料飼喂組為對照組，共6個處理組，每個處理組3個重復，每個重復30尾魚。試驗用維生素C源為維生素C多聚磷酸酯 （羅氏公司，維生素C含量為35.0%）?；A飼料配方及主要營養(yǎng)指標見表1。主要飼料原料均粉碎使其能全部通過0.45 mm的分析篩，再按比例混合和攪拌均勻后擠壓成直徑約為1.0 mm的顆粒，風干后置于-4℃冷柜中保存、備用。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗開始前用基礎飼料馴養(yǎng)15 d，以適應環(huán)境和試驗飼料。養(yǎng)殖試驗于2011年4月9日至6月4日在室內(nèi)玻璃缸 （80 cm×60 cm×50cm），每缸放養(yǎng)60尾。試驗開始后，每日于09∶00和17∶00投喂2次，投飼量為魚體質(zhì)量的2.5% ～4.0%，并根據(jù)生長、攝食情況作適當調(diào)整，養(yǎng)殖期間24 h不間斷充氣，試驗期間水溫為23～30℃，pH為7.1±0.1，溶解氧大于5.0 mg/L，氨氮小于0.5 mg/L，養(yǎng)殖時間為56 d。

表1 基礎飼料及營養(yǎng)水平

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長指標 養(yǎng)殖試驗結束，饑餓24 h后，稱每缸魚的總質(zhì)量，計算增重率、蛋白質(zhì)效率和成活率。

式中，I為攝入飼料的干質(zhì)量，g；W0和 Wt為初末魚體的總質(zhì)量，g；Wd為死魚的總質(zhì)量，g；CP為飼料蛋白質(zhì)的含量，%。

1.4.2 肝組織中維生素C的測定 從每個重復中取3尾歐亞鱸，解剖取得魚體的肝臟，用聯(lián)菲羅啉測定法測定肝臟中維生素C含量，整個操作過程均在冰盤上進行。

1.4.3 歐亞鱸擁擠脅迫前后血糖的測定 養(yǎng)殖試驗結束時，將各組魚轉(zhuǎn)移到直徑為50 cm的塑料桶中，每桶加入10 L水，使其密度為110 g/L，試驗魚在擁擠和限制的環(huán)境中脅迫1 h，然后放回到原來的養(yǎng)殖系統(tǒng)中，同樣做3個重復，分別在脅迫開始前（對照）和脅迫后 0、3、12、24、48 h 取樣，每個時間段每組取5尾魚，采樣前，隨機快速撈取幼魚，立即投入濃度為200 mg/L的MS-222中作快速深度麻醉，用一次性醫(yī)用注射器從尾靜脈取血，4℃靜置 24 h后，2500 r/min離心 10 min，分離血清，-20℃保存?zhèn)溆?。應激期間不投餌，應激結束恢復期間正常投餌。采用葡萄糖氧化酶—過氧化物酶法測定血糖含量。

1.5 統(tǒng)計分析 采用SPSS 10.0軟件進行單因素方差分析，用Duncan’s多重比較分析組間差異顯著性程度，顯著性水平為P＜0.05。

2 結果

2.1 飼料中不同水平的維生素C對歐亞鱸生長性能的影響 攝食添加不同含量維生素C的試驗飼料8周后，試驗魚的成活率、魚體增重、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率見表2。維生素C添加組的成活率都顯著高于對照組（P＜0.05）；飼料中維生素C添加量從0.0升高到100 mg/kg時，魚體增重呈現(xiàn)出上升趨勢，添加量為100 mg/kg時，顯著高于未添加組（P＜0.05），但添加量繼續(xù)增大，魚體增重率無顯著變化（P＞0.05），不同維生素C水平對河鱸魚種生長性能的影響擬合成兩條直線，Y1=0.5582X1+150.63，Y2=-0.0011X2+202.97 二者的交點對應的維生素C的含量為93.58 mg/kg，經(jīng)折線模型分析表明，歐亞鱸幼魚達到最大生長時，飼料中的維生素C的最低添加量93.58 mg/kg。飼料中維生素C添加量為100 mg/kg時，飼料系數(shù)最低，添加量繼續(xù)增大，則不再顯著，并維持在同一水平上；飼料中維生素C添加量高于50 mg/kg時，蛋白質(zhì)效率則顯著升高（P＜0.05）。

2.2 飼料中不同水平的維生素C對歐亞鱸肝臟中維生素C含量的影響 由表2可見，歐亞鱸肝臟中維生素C含量隨飼料中維生素C添加量（0～200 mg/kg）的增大而不斷上升，但添加量繼續(xù)升高，則肝臟中維生素C不再有顯著變化，達到飽和狀態(tài)，不同維生素C水平對歐亞鱸肝臟維生素C的影響擬合成兩條直線，Y1=0.0076X1+2.642，Y2=-0.002X2+4.075二者的交點對應的維生素C的含量為149.27 mg/kg。經(jīng)折線分析表明，肝臟中維生素C達到飽和時，飼料中的維生素C的最低添加量149.27 mg/kg。

表2 不同維生素C水平對歐亞鱸魚種生長性能的影響

2.3 不同維生素C水平對歐亞鱸魚種擁擠脅迫前后血糖的影響 見表3。急性脅迫前，各組血糖之間無顯著差異（P＞0.05），脅迫后，各組在0～24 h間的變化趨勢相類似，都是脅迫后3 h達到高峰，然后開始下降，但到脅迫后24 h還沒有完全恢復到脅迫前的水平。血糖受到飼料中添加維生素C的顯著影響（P＜0.05），血糖升高峰值最低的和血糖恢復接近脅迫前的水平的都是飼料中維生素C為400～800 mg/kg組。

3 討論

關于魚類對維生素C的需要量的確定，多采用生長、組織維生素C的沉積和免疫需要量等指標來評定（陳建明等，2007；Foumier等，2000；秦啟偉等，2000）。具體評定時，由于維生素C的來源、試驗動物、試驗條件、養(yǎng)殖時間和評定指標的差異變化很大 （陳建明等，2007； 王吉橋等，2005；Ai等，2004；Foumier等，2000；秦啟偉等，2000）。以增重率為指標，多數(shù)養(yǎng)殖魚類對維生素C的最適生長需要量為50～100 mg/kg，本試驗以魚體平均增重率為指標，得到河鱸魚種達到最大生長時，飼料中的維生素C的最低添加量93.58 mg/kg。而有研究表明，軍曹魚（趙紅霞等，2008）和翹嘴舶魚種（陳建明等，2007）對維生素C的最適需要量分別為70 mg/kg和53 mg/kg。魚類肝臟是維生素C的主要代謝場所，也是維生素積累和發(fā)揮作用的主要器官。對雜交羅非魚（Shiau和 Hsu，1999）、點帶石斑魚（周歧存等，2005）和中華鱘（高強等，2006）等的研究表明，肝臟中維生素C積累量則隨飼料維生素C添加水平提高而顯著上升。周歧存等（2005）和 Foumier等（2000）用肝臟維生素 C 飽和濃度估算魚類對維生素C需要量。本試驗中通過折線模型得出肝臟中維生素C達到飽和時的飼料中的維生素C的最低添加量149.27 mg/kg。肝臟達到飽和時維生素C需要量要高于以生長速度作為評價指標的數(shù)值。這與Gouillou等（1998）和陳建明等（2007）報道一致。

表3 不同維生素C水平對歐亞鱸魚種擁擠脅迫前后血糖的影響

魚類在應激和病害侵襲條件下需要更多的維生素C來維持其生理功能和抗病力，以免疫學指標來確定需要量時，需要量往往高于通過生長指標確定的值（王吉橋等，2005；Ai等，2004；秦啟偉等，2000）。以血清皮質(zhì)醇含量、溶菌酶活力和補體活性為指標時，金頭鯛維生素C的適宜含量為250 mg/kg，以抗病力為指標時，金頭鯛維生素C的適宜含量為 300 ～ 500 mg/kg（Alexis等，1999）。本試驗中，從抗擁擠脅迫等判據(jù)來看，急性脅迫前，各組血葡萄糖之間無顯著差異，脅迫后，血糖升高峰值最低的和血糖恢復接近脅迫前的水平最快的都是飼料中維生素C為400～800 mg/kg，表明歐亞鱸幼魚在抗擁擠脅迫過程中需要較高水平的維生素C來完成。綜上所述，歐亞鱸幼魚生長性能最佳的飼料維生素C需要量是93.58 mg/kg，獲得肝臟維生素C飽和沉積的維生素C的需要量是149.27 mg/kg，需要400～800 mg/kg水平的維生素C來抵抗擁擠脅迫。

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