孕婦血型抗體效價(jià)檢測(cè)產(chǎn)前診斷的探討

劉傳喜 阮 崢 丁 旭

（吉林大學(xué)第四醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130011）

新生兒溶血病在我國(guó)由于ABO血型及Rh血型不不合造成的新生兒溶血病（HND），前者較為常見(jiàn)。研究證實(shí)孕婦產(chǎn)前IgG抗-A（B）水平的高低與ABO HDN的發(fā)病率盡管沒(méi)有絕對(duì)的一致性，但有高度的相關(guān)性[1,2]。孕婦血清中的IgG類(lèi)抗-A和抗-B的效價(jià)測(cè)定可以幫助預(yù)測(cè)和判斷HDN的發(fā)生和程度[3]。本人用微柱凝集技術(shù)（MGI）檢測(cè)孕婦血型Ig類(lèi)血型抗體效價(jià)水平。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

來(lái)自2010年1月至2011年6月來(lái)我院婦科門(mén)診就診的O型孕婦共計(jì)248人，年齡24～38歲，孕期為12～38周，其中配偶A型116人，B型102人，AB型23人，孕婦RhD陰性7人，配偶RhD陽(yáng)性。

1.2 試劑與儀器

0.8%ABO反定型紅細(xì)胞懸液和抗人球微柱凝膠卡（均長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn)）批號(hào)：20091209、20101103；0.2mol/L 2-巰基乙醇（2ME）（上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任有限公司）；TO-3A型血型血清學(xué)用離心機(jī)和FYQ免疫微柱孵育器（長(zhǎng)春博研科學(xué)生物儀器有限責(zé)任公司）；電熱恒溫水箱（ 天津市泰斯特儀器有限公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)本預(yù)處理

取200μL孕婦血清標(biāo)本和200μL 0.2mol/L 2-巰基乙醇應(yīng)用液充分混勻，試管加塞蓋置37℃水浴60min，充分裂解血清中IgM類(lèi)抗體，吸經(jīng)2-ME處理的血清用生理鹽水做倍比稀釋?zhuān)♂尪确謩e為1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512，留待進(jìn)行平行試驗(yàn)。

1.3.2 MGI

取微柱凝膠試劑卡做好標(biāo)記在微孔內(nèi)各加入50μL與孕婦配偶相同血型的0.8%標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液，再依次加入上述處理的稀釋度為1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512的血清50μL，置專(zhuān)用孵育器內(nèi)37℃孵育15min，再放入專(zhuān)用離心機(jī)離心5min（900轉(zhuǎn)/分，2min；1500轉(zhuǎn)/分，3min），結(jié)果判定以出現(xiàn)1+號(hào)凝集的最高稀釋度的倒數(shù)為抗體效價(jià)。

2 結(jié) 果

結(jié)果判定以出現(xiàn)1+號(hào)凝集的最高稀釋度的倒數(shù)為IgG抗-A（B）和抗-D的價(jià)效，IgG抗-A（B）價(jià)效≥64為異常，抗-D檢出者為陽(yáng)性，未檢出者為陰性。

在所檢測(cè)的241例O型血孕婦中，配偶血型組合（O-A）、（O-B）、（O-AB）的例數(shù)116、102和23，抗體效價(jià)≥64有81例，異常檢出例占總數(shù)的33.6%（81/241）其中IgG抗-A測(cè)定有139，例效價(jià)≥64有36例，異常檢出占總抗-A的14.9%（36/241），IgG抗-B測(cè)定有125例，例效價(jià)≥64有45例18.67%（45/241）。結(jié)果見(jiàn)表1。其中19例gG抗-A（B）效價(jià)≥64，O型血孕婦所生新生兒作HDN血清學(xué)檢查，結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 241例O型血孕婦血清IgG抗-A（B）效價(jià)與例數(shù)分布

表2 19例O型血孕婦血清中IgG抗-A（B）效價(jià)于HDN關(guān)系

3 討 論

新生兒溶血病（HDN）是指母嬰血型不合引起的同族免疫性溶血。有報(bào)道說(shuō)ABO溶血病占新生兒溶血的85.3%，Rh溶血病占14.6%，MN溶血病占0.1%。ABO血型不合中約1/5發(fā)病，RhD血型不合者約1/20發(fā)病。本病主要是母嬰間血型不合而產(chǎn)生同族血型免疫反應(yīng)的遺傳性疾病。其次是RH系統(tǒng)，胎兒由父母新方面遺傳來(lái)的顯性抗原恰為母親所缺少，此抗原侵入母體，產(chǎn)生免疫抗體，通過(guò)胎盤(pán)絨毛膜進(jìn)入胎兒血循環(huán)與胎兒紅細(xì)胞凝集、使之破壞而出現(xiàn)溶血，引起貧血、水腫、脾腫大和生后短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)進(jìn)行性重度黃疸，甚至發(fā)生膽紅素腦病。常導(dǎo)致胎兒早期流產(chǎn)或新生兒貧血，甚至造成新生兒死亡等嚴(yán)重后果。已知的可發(fā)生新生兒溶血病的20多個(gè)血型系統(tǒng)200余個(gè)血型抗原中，以ABO系統(tǒng)最為常見(jiàn)，其次RH系統(tǒng)，每個(gè)血型系統(tǒng)在遺傳上都是獨(dú)立的，并按孟德?tīng)柗▌t遺傳。引起新生兒溶血病以的ABO系統(tǒng)為最多，次為Rh系統(tǒng)，ABO血型系統(tǒng)引起防新生兒溶血病的比例比RH系統(tǒng)多[1]。檢測(cè)母親血清中是否存在IgG性質(zhì)抗-A（B）抗體及效價(jià)，就可對(duì)ABO系統(tǒng)HDN發(fā)生進(jìn)行預(yù)測(cè)，ABO溶血病通常以母親為O型，子女為A型或B型的發(fā)病率為高[2]，所以IgG-A（B）水平的測(cè)定對(duì)胎兒溶血癥狀的減輕，新生兒HDN發(fā)病率的降低有著非常重要的意義。對(duì)待妊娠約20周的、ABO血型不合的孕婦，特別是存在原因不明的流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎等情況的，需要?jiǎng)討B(tài)監(jiān)測(cè)血型抗體效價(jià)，若母親的IgG-A（B）≥128，結(jié)果很可能是嬰兒已經(jīng)受害，若IgG-A（B）≥512，幾乎98.1%發(fā)病[3]。表2結(jié)果表明新生兒HCN發(fā)病率與母體內(nèi)的IgG 血型效價(jià)呈正相關(guān)[4]。此時(shí)就需要格外重視，并積極采取措施降低孕婦體內(nèi)IgG水平。

HDN的發(fā)病率隨著母體內(nèi)的IgG類(lèi)血型抗體水平增高而增大，所以對(duì)母體IgG-A（B）和抗-D效價(jià)進(jìn)行有效的檢測(cè)，可避免免疫性溶血的發(fā)生，有利于早期診斷和治療。我院采用微柱凝膠免疫試劑卡檢測(cè)IgG血型抗體效價(jià)孕婦進(jìn)行產(chǎn)前干預(yù)治療，可明顯降低HDN的發(fā)病率。

[1]劉達(dá)莊.免疫血液學(xué)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1981:76-77.

[2]達(dá)莊.免疫血液學(xué)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2002:128-131.

[3]孫悅玲,施選性,金春子,等.O型流產(chǎn)婦女再孕與IgG抗體效價(jià)的關(guān)系[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志,2005,13(10):68-69.

[4]武建,孔惠良,方美玉,等.孕婦體內(nèi)ABO血型血清抗體動(dòng)態(tài)觀察[J].臨床血液學(xué)雜志(輸血與檢驗(yàn)版),2007,4(3):102-103.