液基細(xì)胞學(xué)與高危型人乳頭瘤病毒檢測在篩查宮頸病變中的價(jià)值比較研究

林文芳

昆明市官渡區(qū)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，云南昆明 650200

目前，隨著各種宮頸病變高危因素的增加，宮頸病變的發(fā)生已有年輕化、日益上升的趨勢[1]。由于子宮頸易于暴露，可以直接進(jìn)行細(xì)胞學(xué)及活體組織檢查，故臨床上多以其作為進(jìn)行早期診斷的參考物。細(xì)胞學(xué)檢測多以巴氏分級的方法，由于該分級系統(tǒng)易受人為因素的影響，特異性和敏感性不強(qiáng)，并有2%～50%的假陰性率[2]，隨著細(xì)胞學(xué)診斷的不斷發(fā)展，液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）已逐步取代傳統(tǒng)的脫落細(xì)胞巴氏分級法檢查。高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）的持續(xù)感染是發(fā)生宮頸癌的生物學(xué)病因和必要條件，因此，高危型人乳頭瘤病毒的檢測作為一項(xiàng)重要手段，越來越多地被應(yīng)用于宮頸病變的篩查?，F(xiàn)就筆者所在醫(yī)院160例婦科患者的TCT檢測陽性結(jié)果與HPV-DNA定性結(jié)果進(jìn)行對比分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇筆者所在醫(yī)院體檢的160例白帶異常、有接觸性出血史的慢性宮頸炎或疑似宮頸病變的患者，提取其宮頸口脫落細(xì)胞樣本。年齡22～64歲，進(jìn)行TCT檢測及HPV-DNA檢測。

1.2 方法

1.2.1 TCT檢測及診斷標(biāo)準(zhǔn) 先以無菌干棉球輕輕擦去宮頸表面黏液，再將宮頸細(xì)胞刷插入宮頸管內(nèi)約1 cm左右，保持適當(dāng)壓力，使細(xì)胞刷呈扇形，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)3～5圈，停留10 s，在官頸外口及宮頸管收集脫落細(xì)胞，并將其洗入盛有細(xì)胞保存液的小瓶中。通過比重液離心后，經(jīng)自然沉淀法將標(biāo)本中的黏液、血液和炎性細(xì)胞分離，收集余下的上皮細(xì)胞制成直徑為13 mm超薄層細(xì)胞于載玻片上，制片過程中自動(dòng)完成細(xì)胞染色。

診斷標(biāo)準(zhǔn):采用TBS分類法[3]，即正常范圍、不明意義的非典型鱗狀細(xì)胞（ASC-US）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL=鱗狀上皮輕度非典型增生CINⅠ）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL，分為鱗狀上皮中度非典型增生CINⅡ、鱗狀上皮重度非典型增生CINⅢ和原位鱗狀細(xì)胞癌SCC）。報(bào)告包括有無HPV感染。

1.2.2 HPV-DNA檢測及診斷標(biāo)準(zhǔn) 標(biāo)本采集均使用一次性取樣器插入宮頸管逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)6～8圈，取頸管分泌物裝入保存液中。通過雜交捕獲二代檢查（HC-Ⅱ）檢測高危型人頭瘤 病 毒 分 型，16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 和 68等13種高危亞型。當(dāng)RLU/PC≥10時(shí)為陽性。

1.2.3 宮頸病理活檢 對兩種方法確定的高危HPV陽性的患者行陰道鏡檢查，可疑部位取活檢送病理檢查，選取3、6、9、12點(diǎn)等多個(gè)點(diǎn)位，必要時(shí)行錐切處理，所有標(biāo)本均送病理科進(jìn)行病理診斷。病理組織學(xué)診斷陽性為CINⅠ以上病變，以病理組織學(xué)檢查結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行，計(jì)量資料以（x ± s）的形式表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用x2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 TCT與HPV-DNA的陽性檢出率比較

160例患者分別經(jīng)TCT和HPV-DNA檢測，陽性高危HPV檢測結(jié)果，HPV-DNA檢出率為41.9%，顯著高于TCT檢測陽性率（16.2%），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見表1。

表1 TCT與HPV-DNA的陽性檢出率比較（n,%）

2.2 TCT、HPV-DNA與療理結(jié)果符合率比較

兩種方法HPV檢測結(jié)果經(jīng)病理檢驗(yàn)符合情況見表2。TCT檢測HPV陽性26例，經(jīng)病理確認(rèn)19例，陽性符合率為73.1%，HPV-DNA檢測HPV陽性67例，經(jīng)病理確認(rèn)33例，陽性符合率為49.3%，兩種方法在陽性符合率方面存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），TCT檢測HPV陽性結(jié)果與真實(shí)情況相符合度好于HPV-DNA法。

表2 TCT、HPV-DNA與病理結(jié)果符合率比較結(jié)果

3 討論

人乳頭瘤病毒是一種共價(jià)雙鏈環(huán)狀DNA病毒，廣泛存在于自然界中，具有高度組織和宿主特異性，可致人類皮膚和黏膜異常增生，引起宿主組織疣狀病變及乳頭狀瘤。目前認(rèn)為持續(xù)高危型HPV感染是宮頸疾病進(jìn)一步發(fā)展為宮頸癌的必經(jīng)過程[4]。

目前，HPV-DNA檢查已作為宮頸癌的篩查手段。臨床上主要應(yīng)用的是第二代雜交捕獲法，該檢測方法簡單、效率高，對高危型HPV病毒檢測敏感度較高，有較高的HPV檢測譜。而且，HC-Ⅱ法克服了傳統(tǒng)細(xì)胞學(xué)普查法存在的假陰性較高的弊端，提升了可操作性。本研究表明HPV-DNA法檢測HPV陽性檢出率顯著高于TCT法（P＜0.01），表明HPV-DNA法靈敏度要高于TCT法。

另一方面，TCT法改善了傳統(tǒng)的涂片方法，提高了涂片的質(zhì)量，便于對上皮細(xì)胞的辨認(rèn)，尤其是對體積小、數(shù)量較少的鱗狀上皮病變的識(shí)別能力，提高了診斷的陽性率。本研究發(fā)現(xiàn)TCT法與病理檢測法陽性符合率非常高（73.1%），顯著高于HPV-DNA法（49.3%），說明TCT法精確度要高于HPV-DNA法。HPV-DNA法陽性檢出率高，但與病理金標(biāo)準(zhǔn)的陽性符合率低，表明高危型HPV陽性不一定存在宮頸疾病，只有高危HPV的持續(xù)感染才會(huì)引發(fā)宮頸癌的發(fā)生。

總之，兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，因此在臨床宮頸病變診斷中，尤其是宮頸癌的早期診斷，應(yīng)將兩種方法聯(lián)合使用[5-6]。TCT技術(shù)提高了診斷的準(zhǔn)確性，而HPV-DNA檢測技術(shù)敏感度高，對宮頸病變的早期診斷具有重要意義。兩種方法聯(lián)合使用，有較高的臨床使用價(jià)值和推廣前景。

[1] 楊位，金平.宮頸病變診斷方法研究新進(jìn)展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2010，9（6）：161-162.

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[3] 羅巧明，林華歡.宮頸刮片在基層醫(yī)院宮頸病變普查中的應(yīng)用[J].廣東醫(yī)學(xué)，2010，31（9）：1148-1149.

[4] 梁雯.高危型人乳頭瘤病毒檢測與細(xì)胞學(xué)檢查應(yīng)用于宮頸癌篩查的比較分析 [J].中國醫(yī)藥指南，2009，22（7）：101-102.

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[6] 黃曉清.宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查2508例分析[J].廣西醫(yī)學(xué)，2009，33（6）：728-729.