骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植改善腦梗死患者神經(jīng)功能機(jī)制研究

何振東

（南京市溧水縣中醫(yī)院，江蘇 南京 211200）

隨著分子生物學(xué)和生命科學(xué)的發(fā)展，干細(xì)胞移植已成為醫(yī)學(xué)研究和治療的一種重要途徑，它是用細(xì)胞替代治療遺傳和退行性等疾病的新方法。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）是一種來(lái)源于中胚層的，具有多向分化能力的組織干細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)［1］，BMSCs在治療腦梗死及后遺癥方面具有良好的療效和安全性。本研究通過(guò)分析2010年以來(lái)用BMSCs治療38例腦梗死的臨床資料，希望為臨床治療提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2010年4月—2012年2月收治的腦梗死患者38例，將其隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。治療組20例，其中男12例，女8例，年齡49～74歲，平均（56.4±7.9）歲；對(duì)照組18例，男11例，女7例，年齡47～76歲，平均（54.3±8.7）歲。兩組患者一般資料無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），所有患者均符合第四屆腦血管病會(huì)議確定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)

所有符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的腦梗死患者，包括腦卒中、腦栓塞、腦血栓。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn)

急性腦出血患者，包括暫時(shí)性腦缺血、對(duì)治療藥物有不良反應(yīng)的患者、顱內(nèi)腫瘤、腦外傷及其他肝臟、腎臟疾病者和無(wú)自主能力者。

1.4 治療方法

對(duì)照組采用常規(guī)的治療方法：使用腦神經(jīng)保護(hù)藥如單唾液酸四己酸神經(jīng)節(jié)苷酯、腦蛋白水解物等，口服辛伐他汀等他汀類(lèi)藥物，同時(shí)使用抗凝藥物如低劑量阿司匹林等。此外，加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)康復(fù)如四肢關(guān)節(jié)的主動(dòng)運(yùn)動(dòng)，緩慢行走運(yùn)動(dòng)等，培養(yǎng)患者的生活自理能力，運(yùn)動(dòng)療程大于2個(gè)月。治療組在此基礎(chǔ)上進(jìn)行肝細(xì)胞移植。治療前經(jīng)患者或家屬簽署知情同意書(shū)，骨髓穿刺，取自體骨髓300mL，同時(shí)用肝素抗凝；按照 Dharmasaroja法［3］進(jìn)行培養(yǎng)分離：利用 DME／F12（1∶1）培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度37℃；再用5%的CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)，每3天換液一次，直到細(xì)胞基本融合后再用胰蛋白酶酶解；最后用生理鹽水配置成干細(xì)胞液（1×108／mL）。將配置好的干細(xì)胞液靜脈滴注患者，同時(shí)密切觀察生命指標(biāo)，于3個(gè)月后判斷療效。

1.5 評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

按照美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生院的NHISS和BI神經(jīng)損傷評(píng)分評(píng)價(jià)患者治療前后的神經(jīng)功能；再對(duì)照治療前后的影像學(xué)判斷患者的腦灌注量指標(biāo)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有研究數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以（）表示，組間率的比較采用χ2檢驗(yàn)。若P＜0.05則表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

治療3個(gè)月后，治療組和對(duì)照組的NIHSS和BI均有提高，提示我們無(wú)論常規(guī)藥物治療還是加用干細(xì)胞移植治療，對(duì)腦梗死都有一定療效，但治療組的療效和腦部灌注量均優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.01），見(jiàn)表1。

表1 兩組評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)比（）

表1 兩組評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)比（）

BI NHISS類(lèi)型 h灌注量治療前 治療后治療組 18 36.9±7.9 56.2±6.1 10.2±2.3 4.9±2.1 45.2±1治療前 治療后 治療前 治療后2.5 65.2±16.2對(duì)照組 20 39.1±6.2 79.1±7.1 10.8±2.9 7.1±2.3 48.3±9.8 46.2±10.5 t 3.49 10.75 4.55 P P＜0.01 P＜0.01 P＜0.01

3 討論

腦梗死具有發(fā)病率高、死亡率高等特點(diǎn)，嚴(yán)重威脅人類(lèi)的生命安全，同時(shí)腦梗死治療后易出現(xiàn)偏癱及行動(dòng)障礙等，給社會(huì)和家庭帶來(lái)沉重負(fù)擔(dān)。目前治療的方式主要是利用一些溶栓或改善微循環(huán)藥物，但由于腦梗死發(fā)病急、并發(fā)癥多，療效往往不理想，因此目前對(duì)此病的研究重點(diǎn)主要是如何提高神經(jīng)細(xì)胞的再生以改善神經(jīng)的各項(xiàng)功能，使患者更好地恢復(fù)。

干細(xì)胞移植是當(dāng)今醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)，它通過(guò)細(xì)胞注入來(lái)提高機(jī)體的自身更新能力。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是存在于骨髓中的一種非造血干細(xì)胞，有很高的增殖和更新能力，能夠多向分化。大量研究證實(shí)［4］，BMSCs在治療腦梗死方面具有極大的優(yōu)越性，它主要通過(guò)以下途徑起到治療作用：①替代損傷的神經(jīng)細(xì)胞，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)［5］人類(lèi)BMSCs移植到腦缺血的大鼠中，可以分化為神經(jīng)元細(xì)胞，提高大鼠的神經(jīng)系統(tǒng)各項(xiàng)功能，減輕各項(xiàng)功能障礙；②分泌營(yíng)養(yǎng)因子，研究發(fā)現(xiàn)［6］，移植的BMSCs可以分泌VEGF（血管生成因子）和神經(jīng)生長(zhǎng)因子來(lái)改善神經(jīng)系統(tǒng)功能和促進(jìn)腦部新血管的生成；③刺激內(nèi)源性細(xì)胞的生長(zhǎng)，這可能與BMSCs可以分泌細(xì)胞生長(zhǎng)因子，改善細(xì)胞的形成內(nèi)環(huán)境，激活新神經(jīng)元的生成有關(guān)；④減少腦部膠質(zhì)瘢痕形成，研究證實(shí)，BMSCs可以通過(guò)炎性調(diào)節(jié)來(lái)抑制腦部膠質(zhì)細(xì)胞的形成，減少腦部膠質(zhì)瘢痕形成，改善腦梗死的癥狀，減少后遺癥的發(fā)生［7］。

本研究發(fā)現(xiàn)，采用自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療腦梗死，可以明顯提高腦梗死的損傷修復(fù)，增加腦灌注量。治療組中，基礎(chǔ)治療加用BMSCs可明顯減少NHISS和BI評(píng)分，與對(duì)照組相比，有顯著性差異（P＜0.01）；同時(shí)在腦灌注量中，治療組（65.2±16.2）也明顯高于對(duì)照組（46.2±10.5），兩組差異顯著（P＜0.01）。因此，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植方法治療腦梗死療效顯著，值得臨床推薦應(yīng)用。

［1］桂莉，范文輝，李露斯，等.大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植后大鼠腦梗死區(qū)超微結(jié)構(gòu)變化的研究［J］.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，26（6）：523－525.

［2］王燕琳，閆禹，宋波，等.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植影響慢性腦缺血大鼠認(rèn)知功能及海馬區(qū)Nogo－A、NgR的表達(dá)［J］.中國(guó)組織工程研究，2012，16（10）：1833－1836.

［3］彭玉，張其梅，游輝，等.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)腦缺血性損傷大鼠神經(jīng)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)［J］.中國(guó)組織工程研究，2012，16（23）：4187－4192.

［4］孟憲國(guó)，朱士文，高華，等.自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療腦梗死：6個(gè)月隨訪［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2009，13（32）：6374－6378.

［5］梅雪蕊.補(bǔ)陽(yáng)還五湯聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用［D］.鄭州：河南中醫(yī)學(xué)院，2008，12（3）：637－639.

［6］張婷勇.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植并用單唾液酸神經(jīng)節(jié)苷脂治療大鼠腦梗死［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2011，15（14）：2557－2561.

［7］梁松嵐，郝光，楊風(fēng)剛，等.骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療對(duì)大鼠腦梗死后神經(jīng)再生抑制因素的影響［J］.中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志，2011，28（9）：781－785.